HPLC -monstervoorbereidingsoplossings vir die beste resultate

Vier stappe vir HPLC -monstervoorbereiding

Stap 1. Analise van waterige oplossings

Stap 2. Voorbereiding van standaarde

Die voorbereiding van standaarde vir saamgestelde identifikasie en kwantifisering kan 'n vervelige en tydrowende proses wees. Dit is moeilik om 'n vaste stof akkuraat te weeg, sodat 'n vooraf gedefinieerde volume oplosmiddel gebruik kan word, en afval as gevolg van foute kan duur wees - veral as u met farmaseutiese produkte werk. Ander faktore soos temperatuur bemoeilik die standaardvoorbereiding verder. Temperatuurskommelings verander die oplosmiddeldigtheid en dra by tot dramatiese verskille in konsentrasie.



Die gebruik van 'n balans wat 'n weeg van akkuraatheid tot verskeie desimale plekke moontlik maak en die proses outomatiseer deur die balans aan 'n oplosmiddel -dispenser te koppel, waarborg die hoogste akkuraatheid. Die gebruik van sagteware soos die YAPP16-doserings-Q-APP maak outomatiese berekeninge en gravimetriese monitering van gemete waardes moontlik. Deur die temperatuur en digtheid van die oplosmiddel te dokumenteer, verseker dit ook baie akkurate konsentrasies, veral as u op die daaropvolgende dae standaarde voorberei. Direkte data -oordrag van die YAPP16 Weighing -toepassing na die Thermo Scientific ™ Chromeleon ™ 7.2 Chromatography Data System (CDS) sagteware is 'n opsie vir papierlose hantering van data met volledige data -integriteit.

Stap 3. Gaan terug na die basiese beginsels met goeie pipet

Die belangrikheid van akkurate en presiese pipet word te gereeld oor die hoof gesien en as vanselfsprekend aanvaar. Die vaardigheidsvlak en ervaring van die gebruikers kan beduidende implikasies hê vir sensitiewe ontledings soos HPLC. Die keuse van die regte pipet kan menslike foute en die gepaardgaande koste van vermorsde oplosmiddels verminder.



Meganiese pipette met 'n volume -slot bied 'n eenvoudige oplossing om toevallige volume -veranderinge te voorkom, terwyl meer gesofistikeerde elektroniese pipette gebruikersveranderlikheid uitskakel om konstant presiese volumes te lewer. Die pipetpunt is ook 'n belangrike detail wat u moet oorweeg vir HPLC -ontledings. Lae retensie -wenke is die beste as u met oplosmiddels van verskillende viskositeite werk, aangesien dit die herstel van die monster maksimeer. Monsterbesoedeling kan ook voorkom as gevolg van loging vanaf die pipetpunt. As sodanig behou die wenke met 'n hoë chemiese weerstandsintegriteit.

Stap 4. Filter vir akkuraatheid en lang lewe

As u bykomend is om monsters te filter voor die ontleding, verbeter die betroubaarheid en kan die lewensduur van die HPLC -kolom verleng deur verstoppingseffekte te voorkom. Spuitfilters is 'n eenvoudige, vinnige oplossing vir die filtermonsters voor kolomchromatografie. Soos met pipetpunte, is die oplosmiddels wat in HPLC gebruik word, spesifieke filters noodsaak om loging en monsterbesoedeling te voorkom.

Sellulose -membrane is bestand teen dimetielsulfoksied (DMSO), amiede, ketone, ester en eterverbindings. Vir veral harde oplosmiddels voorkom onbedekte poliëtersulfoon (PTFO) membrane loging en monsterbesoedeling. Voorbeeldfiltrasie word baie tydrowend wanneer die monsternommer toeneem. Multi-monsterfiltrasie-eenhede, soos die Claristep®-filtrasiestelsel, kan monsters sonder spuite en vinnige voorbereiding van die monster verwerk sonder om kwaliteit in te boet.

Vyf probleme waaraan u moet let op！

1. Wat is die grootste monstervoorbereidingsprobleme wat laboratoriums in die gesig staar?

Laboratoriums word onder toenemende druk ten opsigte van tyd en koste, wat dikwels nie net met 'n groot aantal monsters handel nie, maar ook monsters van verskillende aard. Monstervoorbereiding is 'n gebied waar subtiele verskille tussen monstertipes of die monstervoorbereidingsmetodes en materiale wat gebruik word, die resultate kan beïnvloed. Die versoenbaarheid tussen die materiale in die filtrasietoestel en die oplosmiddel kan probleme tot die minimum beperk; Byvoorbeeld, die vlakke van onttrekbare verbindings wat die analietopsporing kan beïnvloed.

2. Wat gebeur as monstervoorbereiding verkeerd gaan?

Voor analitiese hoëprestasie-vloeistofchromatografie (HPLC) -toepassings word monsters met 'n verskeidenheid metodes berei, wat almal die potensiaal het om analitiese resultate te beïnvloed deur die monster wat in die stelsel ingespuit is, te beïnvloed. Oneffektiewe monstervoorbereiding kan lei tot 'n vermindering in die kolomleeftyd, verhoogde diensvereistes vir komponente, potensiële stilstand van instrumente, vermindering in chromatografiese skeidingsdoeltreffendheid en reproduceerbaarheid, en baie ander probleme.

3. Met die eerste oogopslag lyk filtrasie soos 'n eenvoudige proses ...

Alhoewel filtrasie 'n oënskynlik klein deel van 'n groot werkvloei is, kan die impak van die keuse van die regte filter vir 'n gegewe toepassing aansienlik wees. Byvoorbeeld, metodes wat nie voldoende deeltjies verwyder nie, kan lei tot kolomblokkering. Onvanpaste keuse van monstervoorbereidingstoestelle kan onder sekere omstandighede onttrekbare verbindings in die steekproef vrystel, ontleders van belang bind of foute inbring deur monsterverlies - alles beïnvloed die kwaliteit en reproduceerbaarheid van die waargenome resultate. As u vol vertroue is dat u filtrasie-verbruiksgoedere nie bydra tot foute wat herbewerking of worteloorsake-ondersoeke benodig nie, sal u geld bespaar en uself gemoedsrus gee.

4. Wat is die algemeenste voorbeeldvoorbereiding 'misluk'?

Verkeerde filtermembraankeuse is een probleem wat ons baie sien. Kwessies kan verskyn as vreemde pieke uit ekstrakte, wat die opsporing van die ontleders van belang kan beïnvloed. Die onverenigbaarheid van filtermedia met 'n monster of oplosmiddel in terme van chemiese weerstandigheid is nie net beperk tot die oplos van die filtermedia nie. Oplosmiddels kan effense swelling van polimeer membraanmateriaal veroorsaak as dit nie volledig versoenbaar is nie, wat op sy beurt die filtrasieprestasie kan beïnvloed, wat kan lei tot ondoeltreffende opruiming van monsters. Een manier om hierdie kwessie aan te spreek, is deur 'n membraan te kies wat breed versoenbaar is met beide waterige en organiese oplosmiddels. Vir tipiese HPLC -monstervoorbereiding is spuite en spuitlose filters wat regenereerde sellulose -membrane bevat, 'n goeie opsie vanweë hul breë oplosmiddelversoenbaarheid.

Die gebruik van 'n filterapparaat wat groter is as wat nodig is vir die voorbereiding van die volume, is nog 'n algemene slaggat. Die gebruik van te groot filtertoestelle beteken dat klein hoeveelhede van die monster in die filter sal bly, selfs nadat voorsorgmaatreëls getref is om soveel as moontlik te verdryf.

5. Wat is die voordele daarvan om die filtrasie -stap ernstig op te neem?

'N Fundamentele doelwit van die meeste laboratoriums wat analitiese toetsing doen, is om konsekwente prosesse te ontwikkel wat konsekwente resultate ondersteun - en wat konsekwente filter benodig. Die keuse van 'n filtrasiestoestel met die regte poriegrootte en retensie -eienskappe help om effektiewe deeltjie -verwydering te verseker, terwyl die keuse van toepaslike grootte en ontwerp van die filtereenheid die monsterverlies kan verminder. Goeie filtrasie help ook om die kolom te beskerm en brei moontlik die leeftyd van beide die inspuiter en die kolom uit.

Konklusie

HPLC is 'n waardevolle tegniek vir lewenswetenskap en biofarmaseutiese navorsing, aangesien dit akkurate, reproduceerbare resultate lewer. Hierdie akkuraatheid hang af van die integriteit van die HPLC-monster, en die beste manier om monsters van hoë gehalte te verseker, is om met die beste gereedskap te begin. Met oplossings vir ultrapure water, standaardvoorbereiding, pipette, wenke en filters, is die HPLC -monstervoorbereidingslyn vir elke detail. Outomatiese oplossings en sagteware help ook om monstervoorbereiding te stroomlyn om skoon monsters vir skoon resultate te lewer.

Meer besprekings oor HPLC -monstervoorbereidingsoplossings word verwelkom!