Решенија за подготовка на примерокот HPLC за најдобри резултати

Четири чекори за подготовка на примерокот HPLC

Чекор 1. Анализа на водни раствори

Чекор 2. Подготовка на стандарди

Подготовката на стандарди за идентификација и квантификација на соединение може да биде досаден и одзема многу време. Точно тежи цврсто, така што може да се користи претходно дефиниран волумен на растворувач е тежок, а отпадот поради грешка може да биде скап - особено кога работите со фармацевтски производи. Други фактори, како што е температурата, дополнително ја комплицираат стандардната подготовка. Температурните флуктуации ја менуваат густината на растворувачот и придонесуваат за драматични разлики во концентрацијата.



Користењето рамнотежа што овозможува точност на мерење до неколку децимални места и автоматизирање на процесот со поврзување на билансот со растворувач на растворувач гарантира најголема прецизност. Користењето софтвер како што е дозирањето Q-APP за дозирање на YAPP16 овозможува автоматски пресметки и гравиметриско следење на измерените вредности. Документирање на температурата и густината на растворувачот, исто така, обезбедува многу точни концентрации, особено при подготовка на стандарди во наредните денови. Директен трансфер на податоци од апликацијата YAPP16 со мерење на софтверот Thermo Scientific ™ Chromeleon ™ 7.2 софтвер за податоци за хроматографија (CDS) е опција за ракување со податоци без хартија со целосен интегритет на податоците.

Чекор 3. Вратете се на основите со добро пипетирање

Важноста на точното и прецизно пипетирање премногу често се занемарува и се зема здраво за готово. Нивото и искуството на вештините на корисниците можат да имаат значајни импликации за чувствителни анализи како HPLC. Изборот на вистинската пипета може да ја намали човечката грешка и придружните трошоци за потрошени растворувачи.



Механичките пипети со заклучување на волуменот нудат едноставно решение за спречување на случајни промени во волуменот, додека пософистицираните електронски пипети ја елиминираат варијабилноста на корисниците за постојано да испорачуваат прецизни волумени. Врвот на пипетата е исто така важен детал што треба да се разгледа за анализите на HPLC. Советите за ниско задржување се најдобри кога работат со растворувачи со различни вискозности, бидејќи тие го зголемуваат закрепнувањето на примерокот. Загадувањето на примерокот може да се појави и како резултат на испуштање од врвот на пипетата. Како такви, совети со висока хемиска отпорност за зачувување на интегритетот на примерокот.

Чекор 4. Филтерот за точност и долговечност

Да се ​​грижиме за филтрирање на примероците пред анализата ја подобрува веродостојноста и може да го продолжи животот на колоната HPLC со спречување на ефектите за затнување. Филтрите за шприц се едноставно, брзо решение за филтрирање на примероци пред хроматографијата на колоната. Како и кај советите за пипета, растворувачите што се користат во HPLC бараат специфични филтри за да се спречи истекување и загадување на примерокот.

Мембраните на целулоза се отпорни на диметил сулфоксид (DMSO), амиди, кетони, естер и етерски соединенија. За особено груби растворувачи, мембраните на неоткриен полиетерсулфон (PTFO) спречуваат истекување и загадување на примерокот. Филтрацијата на примерокот станува многу одземаат многу време кога бројот на примерокот се зголемува. Единиците за филтрација со повеќе примероци, како што е системот за филтрирање Claristep®, можат да обработуваат примероци без шприцови и подготовка на примероци за брза патека без да жртвуваат квалитет.

Пет проблеми на кои треба да обрнете внимание на！

1. Кои се најголемите проблеми со подготвувањето на примерокот со кои се соочуваат лабораториите?

Лабораториите се под зголемен притисок во однос на времето и цената, честопати се занимаваат не само со голем број примероци, туку и со примероци со различни природи. Подготовката на примерокот е област каде што суптилните разлики помеѓу типовите на примероци или методите за подготовка на примерокот и користените материјали можат да влијаат на добиените резултати. Обезбедување компатибилност помеѓу материјалите во уредот за филтрација и растворувачот може да ги минимизира проблемите; На пример, нивоата на екстрактивни соединенија што можат да се мешаат во откривање на аналити.

2. Што се случува кога првичното подготвување на примерокот оди наопаку?

Пред аналитичките апликации со течна хроматографија со високи перформанси (HPLC), примероците се подготвуваат со различни методи, од кои сите имаат потенцијал да влијаат врз аналитичките резултати со влијание врз примерокот вбризгуван во системот. Неефикасната подготовка на примерокот може да доведе до намалување на животот на колоните, зголемени барања за услуги за компоненти, потенцијално прекинување на инструментацијата, намалување на ефикасноста и репродуктивноста на хроматографската раздвојување и многу други проблеми.

3. На прв поглед, филтрацијата изгледа како едноставен процес ...

Иако филтрацијата е навидум мал дел од голем проток на работа, влијанието на изборот на вистинскиот филтер за дадена апликација може да биде значително. На пример, методите кои не отстрануваат доволно честички може да резултираат во блокирање на колоната. Несоодветен избор на уреди за подготовка на примероци може, под одредени околности, да ослободи екстрактивни соединенија во примерокот, да ги врзува аналитите на интерес или да воведе грешки преку губење на примерокот - сите влијаат врз квалитетот и репродуктивноста на забележаните резултати. Ако сте сигурни дека вашите потрошувачки на филтрација не придонесуваат за грешки за кои е потребна истрага за репродукција или корен од причини, ќе заштедите пари и ќе си дадете мир на умот.

4. Кои се најчестите првични примероци „не успева“?

Неправилниот избор на мембрана на филтерот е еден проблем што го гледаме многу. Прашањата можат да се појават како вонредни врвови од екстрактибилни, кои можат да се мешаат во откривање на аналитите од интерес. Некомпатибилноста на филтрираните медиуми со примерок или растворувач во однос на хемиската отпорност не е ограничена само на ефектите од растворање на медиумите за филтрирање. Растворувачите можат да предизвикаат мало оток на полимерните мембрани материјали кога не се целосно компатибилни, што пак може да влијае на перформансите на филтрацијата, што доведува до неефикасно расчистување на примероците. Еден начин да се реши ова прашање е со избирање на мембрана која е широко компатибилна и со водни и органски растворувачи. За типична подготовка на примерокот HPLC, филтрите за шприц и без шприц што содржат регенерирани мембрани на целулоза се добра опција заради нивната широка компатибилност на растворувачот.

Употребата на уредот за филтрирање што е поголема од потребната за подготвената јачина на звук е уште еден вообичаен замки. Употребата на премногу големи уреди за филтрирање значи дека малите количини на примерокот ќе останат во филтерот, дури и откако ќе се преземат мерки на претпазливост за да се избрка што е можно повеќе.

5. Кои се предностите на сериозно преземање на чекор на филтрација?

Основна цел на повеќето лаборатории кои се вклучени во аналитичко тестирање е да развијат постојани процеси што ги поддржуваат постојаните резултати - и кои бараат конзистентно филтрирање. Изборот на уред за филтрација со вистинска големина на порите и карактеристиките на задржување помага да се обезбеди ефикасно отстранување на честички, додека изборот на соодветна големина и дизајн на единицата за филтрирање може да помогне во минимизирање на загубата на примерокот. Добрата филтрација исто така помага да се заштити колоната и потенцијално го продолжува животниот век на инјекторот и на колоната.

Заклучок

HPLC е вредна техника за животна наука и биофармацевтски истражувања бидејќи дава точни, репродуктивни резултати. Оваа точност зависи од интегритетот на примерокот HPLC и најдобриот начин да се обезбедат висококвалитетни примероци е да се започне со најдобрите алатки. Со решенија за вода со ултрапсура, стандардна подготовка, пипети, совети и филтри, линијата за подготовка на примерокот HPLC ги опфаќа сите детали. Автоматизираните решенија и софтверот исто така помагаат да се насочи подготовката на примерокот за испорака на чисти примероци за чисти резултати.

Повеќе дискусии за решенијата за подготовка на примерокот HPLC се добредојдени!