Waxqabadka ugu sarreeya ee waxqabadka (hphc) waa farsamooyin falanqeyn ballaaran oo loo isticmaalo oo door muhiim ah ka ciyaara dhowr meelood oo ay ku jiraan dawooyinka, cilmiga deegaanka, iyo badbaadada cuntada. Si kastaba ha noqotee, guusha falanqaynta HPLC waxay kuxirantahay tayada muunad diyaarinta. Diyaarinta muunadda ee habboon waxay xaqiijineysaa tirooyinka saxda ah ee falanqaynta bartilmaameedka oo ay yareysaa faragalinta. Tilmaamahan dhameystiran wuxuu daboolayaa waxkasta oo aad uga baahan tahay inaad ka ogaato diyaarinta muunadda hplc, oo ay ku jiraan muhiimada, farsamooyinka, waxqabadka ugu wanaagsan, iyo talooyinka dhibaatada.
Marabtaa inaad waxbadan ka ogaato ee ku saabsan codsiyada chromatogy chromacogygyfy, fadlan calaamadee maqaalkan: 15 codsi oo ah chromatography vials qaybo kala duwan
Muhiimadda muunad diyaarinta ee HPLC
Diyaarinta Muunadda ayaa ah tallaabo muhiim u ah falanqaynta HPLC sababo dhowr ah awgood.
Yareeyaan ka dhexdhaca:Muunado badanaa waxaa ku jira cilad iyo qaybo ka mid ah qaybaha matrix oo carqaladeyn kara ogaanshaha falanqaynta bartilmaameedka. Farsamooyinka saamaynta muunadaha ee wax ku oolka ah ayaa kaa caawin kara ka saarida walxahaas aan loo baahnayn oo ay wanaajiyaan saxsanaanta falanqaynta.
Hagaajinta soo kabashada falanqaynta:Diyaar garow sax ah waxay hagaajisaa soo kabashada falanqeynta iyo waxay xaqiijineysaa in natiijadu ay ka tarjumayaan uruurinta dhabta ah ee muunadda asalka ah. Tani waxay si gaar ah muhiim ugu tahay falanqaynta falanqaynta halkaas oo falanqayntu ay ku jiraan iskucelin hoose.
Qaabka loo yaqaan 'peak'Tijaabooyin si sax ah loo diyaariyey waxay ka caawiyaan qaab-dhismeedka qaab-dhismeedka iyo si fiican loo qeexay koromomanka. Tani waxay muhiim u tahay tirinta saxda ah. Diyaarinta muunad aan habooneyn ayaa sababi karta daarta ugu sarreysa oo ballaadhan, oo cafisa tarjumaadda macluumaadka.
Ilaali nidaamkaaga HPLC:Suxurka muunadda ku jira ayaa dhaawici kara tiirarka iyo qaybaha kale ee nidaamkaaga HPLC, taasoo horseedaysa kharashaadka dayactirka ee kordha iyo xilliga hoose. Diyaar garow muunad sax ah ayaa yareynaysa halista nidaamka isku xidhka oo xirtaan.
Tallaabooyin muhiim ah oo ku saabsan diyaarinta muunadda hplc
1. Tijaabada Muunad
Tallaabada ugu horreysa ee diyaarinta muunadda ayaa ah in si sax ah loo qaado saamigaada. Tan waxaa ka mid ah:
Isticmaal weel nadiif ah:Had iyo jeer isticmaal weel nadiif ah, weelal ku leh si aad uga fogaato faddaraynta. Dhalo ama weelal tayo leh oo tayo leh ayaa lagula talinayaa.
Ka fogow faddaraynta:Adeegso galoofyada iyo aaladaha nadiif ah si looga hortago faddaraynta ka yimaada Sebum iyo ilo kale.
Calaamadeyn sax ah:Si cad u calaamadee saamballada si aad uga fogaato isku-dhafka oo aad hubiso raadinta.
2. Tusaalaha tusaalaha
Tusaalaha isku-darka muunadku wuxuu hubiyaa isku-dhafan, oo muhiim u ah natiijooyinka soo saaridda. Farsamooyinka isku-darka waxaa ka mid ah:
Isku-darka Mechanaanta: Isku-darka muunado adag ama semi-adag oo adeegsanaya xiisad ama isku-darka.
Ultrasonic istcimaal:Codsiga 'ultrasound' si loo kala diro walxaha muunad dareeraha ah.
3. Dillaaca ama uruurinta
Iyada oo ku xidhan uruurinta la filayo ee falanqaynta, muunadaha waxaa laga yaabaa inay u baahdaan in lagu qasiyo ama la isku daro. Tan waxaa lagu gaari karaa:
Digniin:Tuurka tusaalaha uruurinta la doonayo adiga oo adeegsanaya isla xalka moobiilka.
U fiirsashada:Falanqaynta waxaa lagu urursan karaa iyadoo la adeegsanayo farsamooyinka sida uumiga ama soo saarida wejiga adag (SPE).
4. Shaandheynta
Firetrution waa lama huraan in meesha laga saaro arrinta kaqeybgalka sadarka ka xiraya tiirarka. Qaababka shaandhaynta guud waxaa ka mid ah:
Xirmooyinka xuubka xuubka:Isticmaal0.2μm ama 0.45μM miirayaashasi looga saaro walxaha. Caadi ahaan polytsulfesulfone (pes) ama miirayaasha miirayaasha nylon ayaa la istcimaalaa.
HALKAN:Saamballada leh waxyaabaha ka kooban walxaha sare, ee ladhaafka iyada oo loo marayo shaandhada cabirkiisu waa ka hortagi kartaa xidhmada.
50 SU'AALAHA BADAN LA ISWAYDIIYO KU SAABSAN SYRDIGE MARKAAD, Hubso inaad fiiriso maqaalkan wargelin ah: Mowduuca "sicirka siringaha" 50-aad su'aalaha badanaa la isweydiiyo
5. Xasiloonida muunadda
Tixgeli xasilinta muunaddaada si looga hortago nabaad-guurka falanqaynta.
FARSAMADA PH:Laqabsashada PH waxay gacan ka geysan kartaa xasilinta falalka qaarkood. Tusaale ahaan, xeryahooda aashitada waxay u baahan karaan aashito si looga hortago nabaad-guurka.
Waxyaabaha lagu daro:Ku darista xasilinta ama xasilinta ama waxyaabaha lagu keydiyo waxay gacan ka geysan karaan joogtaynta saamaynta muunadda inta lagu gudajiro keydinta iyo falanqaynta.
6. Xullifka xallinta
Waa muhiim in la xusho dareeraha saxda ah ee lagu kala dirayo shaashaddaada oo aad hubiso in is-waafajinta nidaamkaaga HPLC. Tixgeli waxyaabaha soo socda:
Xaraashka Nolosha:Si loo gaaro kala diris dhammaystiran, dareeraha convent waa inuu iswaafajiyaa wanaagga falanqaynta.
Isku-darka wejiga wareega: U adeegso solvent oo la jaan qaada wajiga mobilada si loo yareeyo faragelinta mustaqbalka.
7. Diyaarinta heerarka
Diyaarinta heerarka diyaarinta ayaa lagama maarmaan ah in lagu muujiyo falanqeeye muunad ah. Tan waxaa ka mid ah:
Diyaarinta qalooca qalooca:Diyaarso taxane ah oo ka mid ah uruurinta loo yaqaan ee falanqaynta si loo dhiso qalooca qalooca ee tirinta.
Adeegso isku mid oo isku mid ah:Si loo ilaaliyo joogteynta, had iyo jeer u diyaarso heerarkaaga adoo isticmaalaya xaalado iyo xaalado isku mid ah muunadahaaga.
Dhaqanka ugu fiican ee loogu talagalay diyaarinta muunadda hplc
Raac nidaamka hawlgalka caadiga ah (SOPS):Samee oo u hogaansanaada una qaybiso SPS si loo diyaariyo muunad si loo hubiyo joogteynta iyo taranka.
Isticmaal reagents tayo sare leh iyo solvors:Had iyo jeer isticmaal dareeraha heerkulka ah iyo dib-u-habeyn daahir ah si loo yareeyo faddaraynta.
Ka ilaali goobta shaqadaada:Hayso aaggaaga diyaarinta ah ee diyaarinta ah nadiif ah oo loo habeeyey si loo yareeyo halista faddaraynta.
Diiwaangeliso wax walba:Hayso diiwaanada faahfaahsan ee nidaamkaaga diyaarinta muunadda, oo ay ku jiraan ka weecashooyinka ka yimaada borotokoolka caadiga ah.
Qaab-dhismeedka qaababka:Si joogto ah u xaqiiji qaababka diyaarinta saamiga si joogto ah si aad u hubiso inay bixiyaan natiijooyin la isku halleyn karo oo soo saari karo.
Dhibaataynta Dhibaatooyinka Diyaarinta Muunada ee caadiga ah
Qaabka ugu sarreeya ee saboolka ah:Haddii meelaha ugu sarreeya ay balaaran yihiin ama jeesjeeska, tani waxay muujin kartaa kala-joogsi la'aan aan dhameystirnayn ama joogitaanka qayb ka mid ah. Hubso in muunaddaada uu si fiican isugu dhafan yahay oo la sifeeyo.
Ghost Peaks:Peaks cirfiidka waxaa sababi kara cilado ku saabsan dareeraha ama muunadda, isticmaal dareeraha sareeya oo hubi in dhammaan dhalada iyo qalabka ay nadiif yihiin.
Dareen hooseeya:Haddii xasaasiyaddu hooseyso, ka fikir inaad siiso habkaaga soosaarka ama kordhinta u fiirsashada falanqayntaada.
Safka xariirka:Xargaha soo noqnoqda ayaa laga yaabaa inay muujiso in muunaddaada ay ka kooban tahay qayb aad u fara badan ama sifiican looma sifeyn. Dib-u-qiimee hannaankaaga faylkaaga oo tixgeli pre-pru-scription.
Natiijooyinka iswaafaqsan:Kala duwanaanshaha natiijooyinka ayaa ka imaan kara diyaarinta muunadda iswaafajinta. Xisaabiro dhammaan habraacyada oo hubi in shaqaalaha ku lug leh diyaarinta muujinta si sax ah loo tababaro.
Farsamooyinka diyaarinta muunadaha ee sareeya
Sida baahida loo falanqeysey kordhinta, shaybaarada waxay qaadayaan farsamooyin diyaarin diyaarin oo horumarsan si loo wanaajiyo hufnaanta iyo sax ahaanta:
1. Soosaarista wejiga adag (SPE)
Spe waa farsamooyin aad loo adeegsado oo u oggolaanaya soo saarista falanqaynta ee falanqaynta khadadka qalafsan. Waxay ku lug leedahay ka gudbaya muunad dareere ah iyada oo loo marayo waxyaabo adkeed oo adag oo haysa bartilmaameedka bartilmaameedka ah inta uu u oggolaanayo cilado inuu dhex maro.
2. Soosaarka dareeraha-dareeraha ah (lle)
Lle waa farsamooyin kala go 'falanqayn ah oo ku saleysan xalidooda laba cabitaanno aan la dumin karin. Qaabkani wuxuu waxtar u leeyahay kala goynta xeryahooda oo leh xulashooyin kaladuwan waxaana badanaa loo isticmaalaa falanqaynta deegaanka iyo dawooyinka.
3. Quffers (dhaqso, fudud, rakhiis ah, wax ku ool ah, la burburiyey oo aamin ah)
Qiyaastu waa hab caan ah oo loogu diyaariyo saamballada cuntada iyo bey'adda oo isku daraya soo saarista iyo nadiifinta nadiifinta hal hannaan, taasoo ka dhigeysa mid wax ku ool ah oo qiimo leh.
4.
Wax soo saar iyo soo saaritaan ayaa si weyn u wanaajin kara nidaamyo diyaarin ah oo otomaatig ah, oo fulin kara howlo sida dillaac, fidsan, oo ay ku yareyneyso faragelinta ugu yar ee aadanaha, taasoo yareyneysa halista khaladaadka.
Marabtaa inaad waxbadan ka ogaato diyaarinta muunadda HPLC, fadlan calaamadee maqaalkan: Qaabka muunada ee loo yaqaan 'hplc' xalka diyaarinta natiijooyinka ugu wanaagsan
Gabagabo
Diyaarinta saamiga ee HPLC waa tallaabo muhiim ah oo si weyn saameyn ugu yeelan kara sax ahaanta iyo isku halaynta natiijooyinka falanqaynta. Adigoo raacaya dhaqamada ugu wanaagsan, adoo adeegsanaya farsamooyin ku habboon, iyo wax ka qabashada dhibaatooyinka caamka ah, shaybaarada waxay kobcin karaan hannaanka diyaarinta muunadda iyagoo qabanaya farsamooyin horumarsan iyo teknolojiyad ahaan sida falanqaynta loo baahan yahay horumar. Dibedda waxay sii wanaajin doontaa waxtarka iyo waxtarka falanqaynta HPLC. Diyaarinta muunadda ee habboon ma fiicna oo keliya natiijooyinka natiijooyinka, laakiin sidoo kale waxay ilaalisaa nidaamka HPLC, hubinta isku halaynta muddada-dheer iyo waxqabadka.