ХПЛЦ решења за припрему узорка за најбоље резултате

Четири корака за припрему узорка ХПЛЦ-а

1. корак. Анализа водених решења

2. корак. Припрема стандарда

Припрема стандарда за идентификацију и квантификацију једињења може бити мучно и дуготрајан процес. Прецизно тежине чврсте супстанце тако да се може користити унапред дефинисани запремина растварача је тешко, а отпад због грешке може бити скупо - посебно када је рад са фармацеутским производима. Остали фактори попут температуре додатно компликује стандардну припрему. Флуктуације температуре мењају густину растварача и доприносе драматичним разликама у концентрацији.



Користећи равнотежу која омогућава тачност тежине до неколико децималних места и аутоматизацију процеса повезивањем равнотеже до распршивача растварача гарантује највећу прецизност. Коришћење софтвера као што је ИАПП16 дозирање К-апликација омогућава аутоматско прорачун и гравиметрично надгледање измерених вредности. Документирање температуре и густине растварача такође осигурава високо тачне концентрације, посебно приликом припреме стандарда на наредним данима. Директни пренос података са ИПАПП16 апликације за вагање на Термо Сциентифиц ™ ЦхроМелеон ™ Цхроматограпхи Цхроматографски систем података (ЦДС) је опција за руковање подацима без папира са потпуним интегритетом података.

Корак 3. Вратите се на основе добром пивотира

Важност тачног и прецизног пипетинга је пречесто занемарена и узима се здраво за готово. Ниво и искуство у корисник може имати значајне импликације на осетљиве анализе попут ХПЛЦ-а. Одабир праве пипете може смањити људску грешку и придружени трошкови изгубљених растварача.



Механичке пипете са закључавањем запремине нуде једноставно решење за спречавање случајних промена запремине, док је софистицираније електронске пипете елиминисати варијабилност корисника како би се доследно испоручила прецизна количина. Врх пипете је такође важан детаљ који треба узети у обзир за ХПЛЦ анализе. Ниски савети за задржавање су најбољи када раде са растварачима различитих вискозбија, јер максимизирају опоравак узорка. Контаминација узорка се такође може појавити као резултат испирања са врха пипете. Као такви, савети са високом хемијском отпорношћу очувају интегритет узорка.

Корак 4. Филтер за тачност и дуговечност

Узимање додатне неге за филтер узорке пре анализе побољшава поузданост и може продужити живот ХПЛЦ колоне спречавањем ефеката зачепљења. Сиринге Филтери су једноставно, брзо раствор за филтрирање узорака пре хроматографије на колони. Као и код савета Пипете, растварачи који се користе у ХПЛЦ-у захтевају одређене филтере за спречавање контаминације испирања и узорка.

Мембране целулозе су отпорне на диметил сулфоксид (ДМСО), амиде, кетоне, естер и етерска једињења. Посебно оштре раствараче, необрађени полиехерулфоне (ПТФО) мембране спречавају испирање и контаминацију узорака. Филтрација узорка постаје веома дуготрајна када се повећава узорака. Јединице за филтрирање са више примјера, као што су Цларистеп® филтрациони систем, могу обрадити узорке без шприца и припрема узорака брзог праћења без жртвовања квалитета.

Пет проблема морате да обратите пажњу!

1. Који су највећи узорак припремних проблема са којима се суочавају лабораторију?

Лабораторије су под све већим притиском у погледу времена и трошкова, често се баве не само са великим бројем узорака, већ и узорака различитог природе. Припрема узорака је подручје где суптилне разлике између врста узорка или методе припреме узорка и коришћене материјале могу утицати на добијене резултате. Осигуравање компатибилности између материјала у уређају за филтрирање и растварач може да минимизира питања; На пример, нивои изводљивих једињења које би могле да ометају препознавање аналита.

2 Шта се догађа када припрема узорака пође по злу?

Пре анализе високо-перформанси течне хроматографије (ХПЛЦ), узорци се припремају различитим методама, чији су сви потенцијал да утичу на аналитичке резултате утицајем на узорак унесен у систем. Неефикасна припрема узорка може довести до смањења живота колоне, повећани захтеви за компоненте, потенцијално време инструментације, смањење хроматографског одвајања ефикасности и обновљивости и многих других проблема.

3. На први поглед, филтрирање изгледа као једноставан процес ...

Иако је филтрација наизглед мали део великог дела радног тока, утицај бирајућих филтера за дату пријаву може бити значајан. На пример, методе које не уклањају довољно честица могу резултирати блокирањем колоне. Непримјерени избор уређаја за припрему узорка могло би, под одређеним околностима, ослободити се једињења вађења у узорку, обавезати анализе интереса или увести грешке кроз губитак узорка - сви који утичу на квалитет и обнову примећених резултата. Ако сте сигурни да потрошни материјал за филтрирање не доприноси грешачима које захтевају преправљање или истраге корена, уштедите новац и дате себи мирно.

4. Који су најчешћи узорак припрема "не успе"?

Нетачан избор филтра мембрана је један проблем који много видимо. Питања могу се појавити као вањски врхови из валутирања, који могу ометати откривање аналитета од интереса. Некомпатибилност филтерских медија са узором или растварачем у погледу хемијске отпорности није искључиво ограничена на ефекте распуштања на филтерске медије. Растварачи могу проузроковати благи отицање полимерних мембранских материјала ако није у потпуности компатибилан, што заузврат може утицати на перформансе филтрације, што доводи до неефикасног чишћења узорака. Један од начина за решавање овог питања је одабиром мембране која је широко компатибилна са и воденим и органским растварачима. За типична ХПЛЦ Припрема узорка, шприц и грицкање филтера који садрже регенериране мембране целулозе су добра опција због њихове широке компатибилности растварача.

Употреба уређаја за филтер који је већи него што је потребно за припремљење за јачину звука је још једна уобичајена замка. Употреба великих филтрираних уређаја значи да ће мале количине узорка остати у филтеру, чак и након што се предузму мере предострожности да се што је више могуће.

5. Које су предности узимања филтрације озбиљно?

Основни циљ већине лабораторија који се баве аналитичком тестирањем је развити конзистентне процесе који подмањују доследне резултате - и то је потребно доследно филтрирање. Избор уређаја за филтрирање са правом карактеристикама величине пора и задржавања помаже у осигуравању ефикасног уклањања честица, док избор одговарајуће величине и дизајна филтерске јединице може помоћи у минимизирању губитка узорка. Добра филтрација такође помаже у заштити ступца и потенцијално продужава живот и ињектора и колоне.

Закључак

ХПЛЦ је драгоцена техника за животну науку и биофармацеутско истраживање, јер она испоручује тачне, репродуктивне резултате. Ова тачност зависи од интегритета ХПЛЦ узорка и најбољи начин да се осигура да се висококвалитетни узорци покрене са најбољим алатима. Са решењима за ултраПуре воде, стандардна припрема, пипете, савети и филтери, ХПЛЦ линије припреме узорака на све детаље. Аутоматизована решења и софтвер такође помажу у стјештају припрему узорка да бисте испоручили чисте узорке за чисте резултате.

Више дискусија о ХПЛЦ решењима за припрему узорка је добродошло!