HPLC -provberedningslösningar för bästa resultat

Fyra steg för HPLC -provberedning

Steg 1. Analys av vattenhaltiga lösningar

Steg 2. Förberedelse av standarder

Att förbereda standarder för sammansatt identifiering och kvantifiering kan vara en tråkig och tidskrävande process. Att noggrant väga ett fast ämne så att en fördefinierad volym lösningsmedel kan användas är svårt, och avfall på grund av fel kan vara kostsamt - särskilt när man arbetar med läkemedel. Andra faktorer som temperatur komplicerar ytterligare standardberedning. Temperaturfluktuationer förändrar lösningsmedelsdensiteten och bidrar till dramatiska skillnader i koncentration.



Att använda en balans som möjliggör en vägningsnoggrannhet upp till flera decimaler och automatisering av processen genom att koppla balansen till en lösningsmedelsdispenser garanterar den högsta precisionen. Användning av programvara som YAPP16-dosering Q-App möjliggör automatiska beräkningar och gravimetrisk övervakning av uppmätta värden. Att dokumentera temperaturen och densiteten för lösningsmedlet säkerställer också mycket exakta koncentrationer, särskilt när man förbereder standarder på efterföljande dagar. Direkt dataöverföring från YAPP16 -vägningsapplikationen till Thermo Scientific ™ Chromeleon ™ 7.2 Chromatography Data System (CDS) -programvaran är ett alternativ för papperslös datahantering med full dataintegritet.

Steg 3. Gå tillbaka till grunderna med bra pipettering

Betydelsen av korrekt och exakt pipettering förbises alltför ofta och tas för givet. Användarfärdighetsnivå och erfarenhet kan ha betydande konsekvenser för känsliga analyser som HPLC. Att välja rätt pipett kan minska mänskliga fel och de tillhörande kostnaderna för bortkastade lösningsmedel.



Mekaniska pipetter med ett volymlås erbjuder en enkel lösning för att förhindra oavsiktliga volymförändringar, medan mer sofistikerade elektroniska pipetter eliminerar användarvariabilitet för att konsekvent leverera exakta volymer. Pipettspetsen är också en viktig detalj att tänka på för HPLC -analyser. Låga retentionstips är bäst när man arbetar med lösningsmedel med olika viskositeter, eftersom de maximerar provåtervinning. Provföroreningar kan också uppstå till följd av urlakning från pipettspetsen. Som sådan bevarar tips med hög kemisk resistensprovintegritet.

Steg 4. Filtrera för noggrannhet och livslängd

Att ta ytterligare försiktighet för att filtrera prover före analysen förbättrar tillförlitligheten och kan förlänga livslängden för HPLC -kolumnen genom att förhindra tilltäppningseffekter. Sprutafilter är en enkel, snabb lösning för filtreringsprover före kolonnkromatografi. Liksom med pipettspetsar kräver lösningsmedlen som används i HPLC specifika filter för att förhindra lakning och provföroreningar.

Cellulosamembran är resistenta mot dimetylsulfoxid (DMSO), amider, ketoner, ester och eterföreningar. För speciellt hårda lösningsmedel förhindrar obelagda polyetersulfone -membran (PTFO) lakning och provföroreningar. Provfiltrering blir mycket tidskrävande när provantalet ökar. Multi-provfiltreringsenheter, såsom Claristep®-filtreringssystemet, kan bearbeta prover utan sprutor och snabbspårningsprovberedning utan att offra kvaliteten.

Fem problem du behöver för att uppmärksamma！

1. Vilka är de största provproblemen som står inför labb?

Laboratorier är under ökande tryck när det gäller tid och kostnad, och hanterar ofta inte bara med ett stort antal prover utan också prover av olika natur. Provberedning är ett område där subtila skillnader mellan provtyper eller provberedningsmetoder och material som används kan påverka de erhållna resultaten. Att säkerställa kompatibilitet mellan materialen i filtreringsenheten och lösningsmedlet kan minimera problem; Till exempel nivåerna av extraherbara föreningar som kan störa analytdetektering.

2. Vad händer när provförberedelsen går fel?

Före analytisk högpresterande vätskekromatografi (HPLC) -applikationer framställs prover med olika metoder, som alla har potential att påverka analytiska resultat genom att påverka provet injicerat i systemet. Ineffektiv provberedning kan leda till en minskning av kolumnlivslängden, ökade servicekrav för komponenter, potentiell driftstopp för instrumentering, minskning av kromatografisk separationseffektivitet och reproducerbarhet och många andra problem.

3. Vid första anblicken verkar filtrering som en enkel process ...

Även om filtrering är en till synes liten del av ett stort arbetsflöde, kan effekterna av att välja rätt filter för en given applikation vara betydande. Till exempel kan metoder som inte tar bort tillräckligt med partiklar resultera i kolonnblockering. Olämpligt val av provberedningsanordningar kan under vissa omständigheter frisätta extraherbara föreningar i provet, binda analytter av intresse eller införa fel genom provförlust - allt påverkar kvaliteten och reproducerbarheten av de observerade resultaten. Om du är övertygad om att dina filtreringsförbrukningsvaror inte bidrar till fel som kräver omarbetnings- eller rotorutredningar, kommer du att spara pengar och ge dig själv sinnesfrid.

4. Vilka är de vanligaste provförberedelserna "misslyckas"?

Felaktigt val av filtermembran är ett problem vi ser mycket. Frågor kan visas som främmande toppar från extraherbara, vilket kan störa detekteringen av analytterna av intresse. Inkompatibiliteten hos filtermedia med ett prov eller lösningsmedel i termer av kemisk resistens är inte enbart begränsad till upplösningseffekter på filtermediet. Lösningsmedel kan orsaka lätt svullnad av polymermembranmaterial när de inte är helt kompatibla, vilket i sin tur kan påverka filtreringsprestanda, vilket leder till ineffektiv sanering av prover. Ett sätt att ta itu med detta problem är genom att välja ett membran som i stort sett är förenligt med både vattenhaltiga och organiska lösningsmedel. För typiska HPLC -provberedning är sprutor och sprutlösa filter som innehåller regenererade cellulosamembran ett bra alternativ på grund av deras breda lösningsmedelskompatibilitet.

Användningen av en filteranordning som är större än vad som behövs för volymen som framställs är en annan vanlig fallgrop. Användningen av för stora filterenheter innebär att små mängder av provet kommer att förbli i filtret, även efter att försiktighetsåtgärder vidtas för att utvisa så mycket som möjligt.

5. Vilka är fördelarna med att ta filtreringssteget på allvar?

Ett grundläggande mål för de flesta laboratorier som bedriver analytisk testning är att utveckla konsekventa processer som ligger till grund för konsekventa resultat - och som kräver konsekvent filtrering. Valet av en filtreringsanordning med rätt porstorlek och retentionegenskaper hjälper till att säkerställa effektivt partikelavlägsnande, medan valet av lämplig storlek och design av filterenhet kan hjälpa till att minimera provförlust. God filtrering hjälper också till att skydda kolumnen och potentiellt förlänga livslängden för både injektorn och kolumnen.

Slutsats

HPLC är en värdefull teknik för livsvetenskap och biofarmaceutisk forskning eftersom den ger exakta, reproducerbara resultat. Denna noggrannhet beror på integriteten i HPLC-provet, och det bästa sättet att säkerställa prover av hög kvalitet är att börja med de bästa verktygen. Med lösningar för ultrapure -vatten, standardberedning, pipetter, tips och filter, står HPLC -provberedningslinjen för varje detalj. Automatiserade lösningar och programvara hjälper också till att effektivisera provberedning för att leverera rena prover för rena resultat.

Fler diskussioner om HPLC -provberedningslösningar välkomnas!