Suluhisho za utayarishaji wa mfano wa HPLC kwa matokeo bora

Hatua nne za utayarishaji wa mfano wa HPLC

Hatua ya 1. Uchambuzi wa suluhisho za maji

Hatua ya 2. Maandalizi ya Viwango

Kutayarisha viwango vya kitambulisho cha kiwanja na usahihi inaweza kuwa mchakato wa kusumbua na wa wakati. Uzani kwa usahihi ili kiasi kilichoelezewa cha kutengenezea kinaweza kutumiwa ni ngumu, na taka kwa sababu ya kosa inaweza kuwa na gharama kubwa - haswa wakati wa kufanya kazi na dawa. Sababu zingine kama vile joto zinazidisha maandalizi ya kawaida. Kushuka kwa joto hubadilisha wiani wa kutengenezea na kuchangia tofauti kubwa katika mkusanyiko.



Kutumia usawa ambao unawezesha usahihi wa uzito hadi maeneo kadhaa ya decimal na kuelekeza mchakato kwa kuunganisha usawa na mgawanyaji wa kutengenezea inahakikisha usahihi wa hali ya juu. Kutumia programu kama vile YAPP16 Dosing Q-APP inawezesha mahesabu ya moja kwa moja na ufuatiliaji wa gravimetric wa maadili yaliyopimwa. Kuandika hali ya joto na wiani wa kutengenezea pia inahakikisha viwango sahihi sana, haswa wakati wa kuandaa viwango katika siku za baadaye. Uhamisho wa data moja kwa moja kutoka kwa matumizi ya uzito wa YAPP16 kwa programu ya Thermo Sayansi ™ Chromeleon ™ 7.2 Programu ya Takwimu ya Chromatografia (CDS) ni chaguo kwa utunzaji wa data isiyo na karatasi na uadilifu kamili wa data.

Hatua ya 3. Rudi kwenye misingi na bomba nzuri

Umuhimu wa bomba sahihi na sahihi mara nyingi hupuuzwa na kuchukuliwa kwa urahisi. Kiwango cha ustadi wa watumiaji na uzoefu unaweza kuwa na athari kubwa kwa uchambuzi nyeti kama HPLC. Chagua bomba la kulia linaweza kupunguza makosa ya kibinadamu na gharama zinazohusiana za vimumunyisho vilivyopotea.



Mabomba ya mitambo na kufuli kwa kiasi hutoa suluhisho rahisi la kuzuia mabadiliko ya kiasi cha bahati mbaya, wakati bomba za elektroniki za kisasa zaidi huondoa kutofautisha kwa watumiaji ili kutoa viwango sahihi. Ncha ya bomba pia ni maelezo muhimu ya kuzingatia kwa uchambuzi wa HPLC. Vidokezo vya chini vya uhifadhi ni bora wakati wa kufanya kazi na vimumunyisho vya viscosities tofauti, kwani zinaongeza urejeshaji wa sampuli. Uchafuzi wa mfano pia unaweza kutokea kama matokeo ya leaching kutoka ncha ya bomba. Kama hivyo, vidokezo vilivyo na upinzani mkubwa wa kemikali huhifadhi uadilifu wa mfano.

Hatua ya 4. Filter kwa usahihi na maisha marefu

Kuchukua huduma ya ziada kuchuja sampuli kabla ya uchambuzi inaboresha kuegemea na inaweza kuongeza muda wa maisha ya safu ya HPLC kwa kuzuia athari za kuziba. Vichungi vya sindano ni suluhisho rahisi, la haraka la sampuli za kuchuja kabla ya chromatografia ya safu. Kama ilivyo kwa vidokezo vya bomba, vimumunyisho vinavyotumika katika HPLC vinahitaji vichungi maalum ili kuzuia uvujaji na uchafu wa mfano.

Utando wa selulosi ni sugu kwa dimethyl sulfoxide (DMSO), amides, ketoni, ester, na misombo ya ether. Kwa vimumunyisho vikali, utando usio na polyethersulfone (PTFO) huzuia uvujaji wa leaching na sampuli. Mfano wa kuchujwa inakuwa wakati mwingi wakati idadi ya sampuli inapoongezeka. Vitengo vya kuchuja vya sampuli nyingi, kama mfumo wa kuchuja wa Claristep ®, vinaweza kusindika sampuli bila sindano na utayarishaji wa mfano wa haraka bila kutoa sadaka.

Shida tano unahitaji kulipa kipaumbele kwa！

1. Je! Ni shida gani kubwa za sampuli zinazowakabili maabara?

Maabara iko chini ya shinikizo kwa wakati na gharama, mara nyingi hushughulika sio tu na idadi kubwa ya sampuli lakini pia sampuli za asili tofauti. Utayarishaji wa sampuli ni eneo ambalo tofauti ndogo kati ya aina za sampuli au njia za kuandaa sampuli na vifaa vinavyotumiwa vinaweza kuathiri matokeo yaliyopatikana. Kuhakikisha utangamano kati ya vifaa kwenye kifaa cha kuchuja na kutengenezea kunaweza kupunguza maswala; Kwa mfano, viwango vya misombo inayoweza kutolewa ambayo inaweza kuingiliana na ugunduzi wa uchambuzi.

2. Ni nini kinatokea wakati sampuli ya Prep inakwenda vibaya?

Kabla ya matumizi ya juu ya utendaji wa chromatografia ya kioevu (HPLC), sampuli zinatayarishwa na njia mbali mbali, ambazo zote zina uwezo wa kushawishi matokeo ya uchambuzi kwa kuathiri sampuli iliyoingizwa kwenye mfumo. Utayarishaji wa sampuli isiyofaa inaweza kusababisha kupunguzwa kwa maisha ya safu, kuongezeka kwa mahitaji ya huduma kwa vifaa, wakati wa kupumzika wa vifaa, kupunguzwa kwa ufanisi wa utenganisho wa chromatographic na kuzaliana, na shida zingine nyingi.

3. Mara ya kwanza, kuchujwa inaonekana kama mchakato rahisi ...

Ingawa kuchujwa ni sehemu inayoonekana kuwa ndogo ya mtiririko mkubwa wa kazi, athari ya kuchagua kichujio sahihi kwa programu iliyopewa inaweza kuwa kubwa. Kwa mfano, njia ambazo haziondoi vitu vya kutosha vya chembe vinaweza kusababisha kuzuia safu. Chaguo lisilofaa la vifaa vya utayarishaji wa sampuli zinaweza, chini ya hali fulani, kutolewa misombo inayoweza kutolewa kwenye sampuli, kumfunga uchambuzi wa riba au kuanzisha makosa kupitia upotezaji wa sampuli - zote zinashawishi ubora na kuzaliana kwa matokeo yaliyozingatiwa. Ikiwa una hakika kuwa matumizi yako ya kuchuja hayachangii makosa ambayo yanahitaji uchunguzi wa rework au sababu ya mizizi, utaokoa pesa na ujipe amani ya akili.

4. Je! Ni mfano gani wa kawaida wa Prep 'unashindwa'?

Chaguo la membrane isiyo sahihi ni shida moja tunaona mengi. Maswala yanaweza kuonekana kama kilele cha nje kutoka kwa viboreshaji, ambavyo vinaweza kuingiliana na ugunduzi wa uchambuzi wa riba. Kukosekana kwa media ya vichungi na sampuli au kutengenezea kwa hali ya upinzani wa kemikali sio tu kwa athari za uharibifu kwenye media ya vichungi. Vimumunyisho vinaweza kusababisha uvimbe mdogo wa vifaa vya membrane ya polymeric wakati hauendani kabisa, ambayo kwa upande inaweza kuathiri utendaji wa kuchuja, na kusababisha kusafisha sampuli zisizofaa. Njia moja ya kushughulikia suala hili ni kuchagua membrane ambayo inaendana sana na vimumunyisho vya maji na kikaboni. Kwa utayarishaji wa kawaida wa sampuli ya HPLC, sindano na vichungi visivyo na sindano vyenye utando wa selulosi iliyotengenezwa upya ni chaguo nzuri kwa sababu ya utangamano wao mpana wa kutengenezea.

Matumizi ya kifaa cha kichujio ambacho ni kubwa kuliko inahitajika kwa kiasi kinachoandaliwa ni shimo lingine la kawaida. Matumizi ya vifaa vya vichungi vikubwa sana inamaanisha kuwa idadi ndogo ya sampuli itabaki kwenye kichungi, hata baada ya tahadhari kuchukuliwa kufukuza iwezekanavyo.

5. Je! Ni faida gani za kuchukua hatua ya kuchuja kwa umakini?

Lengo la msingi la maabara nyingi zinazohusika katika upimaji wa uchambuzi ni kukuza michakato thabiti ambayo inasababisha matokeo thabiti - na ambayo yanahitaji kuchuja thabiti. Uteuzi wa kifaa cha kuchuja na saizi ya kulia ya pore na sifa za kutunza husaidia kuhakikisha uondoaji mzuri wa chembe, wakati uchaguzi wa saizi sahihi na muundo wa kitengo cha vichungi unaweza kusaidia kupunguza upotezaji wa sampuli. Filtration nzuri pia husaidia kulinda safu na uwezekano wa kupanua maisha ya sindano na safu.

Hitimisho

HPLC ni mbinu muhimu kwa sayansi ya maisha na utafiti wa biopharmaceutical kwani hutoa matokeo sahihi, yanayoweza kuzaa. Usahihi huu unategemea uadilifu wa sampuli ya HPLC, na njia bora ya kuhakikisha sampuli za hali ya juu ni kuanza na zana bora. Na suluhisho za maji ya Ultrapure, maandalizi ya kawaida, bomba, vidokezo, na vichungi, akaunti ya mfano wa HPLC kwa kila undani. Suluhisho za kiotomatiki na programu pia husaidia kudhibiti utayarishaji wa sampuli kutoa sampuli safi kwa matokeo safi.

Majadiliano zaidi juu ya suluhisho za sampuli za HPLC zinakaribishwa!