1. ไม่มีคอลัมน์ HPLC ของคุณ
2. ความไวที่สูงขึ้นของคอลัมน์ HPLC ของคุณ
3. ความแม่นยำสูงขึ้น
4. ยอดเขาที่เป็นบวกเท็จน้อยลง
5. เสียงพื้นหลังน้อยลง
6. ไม่มีการชะ
สี่ขั้นตอนสำหรับการเตรียมตัวอย่าง HPLC
ให้เราโน้มน้าวใจคุณว่าคุณจะประหยัดเวลาด้วยการแก้ปัญหาของเราได้อย่างไรและในเวลาเดียวกันก็เพิ่มความสามารถในการทำซ้ำของผลลัพธ์ของคุณ:
ขั้นตอนที่ 1. การวิเคราะห์สารละลายน้ำ
คุณภาพน้ำที่ไม่ดีเป็นหนึ่งในปัจจัยที่ใหญ่ที่สุดในการแก้ไขปัญหาในระหว่างการวิ่ง HPLC สิ่งสกปรกของน้ำในเฟสมือถือสามารถโต้ตอบกับคอลัมน์และส่งผลให้เกิดความละเอียดและความไวที่ไม่ดีหรือยอดเขาที่ไม่คาดคิดในโครมาโตแกรมโดยทั่วไปเรียกว่ายอดผี การใช้น้ำ ultrapure ช่วยลดความเสี่ยงของการปนเปื้อนด้วยคาร์บอนอินทรีย์จุลินทรีย์เอนโดท็อกซิน RNASE และ DNASE Ultrapure Water มีให้ซื้ออย่างไรก็ตามการใช้ระบบการทำให้บริสุทธิ์น้ำในห้องปฏิบัติการของคุณเป็นวิธีที่ง่ายที่สุดในการรับรองน้ำที่มีคุณภาพสูง น้ำเกรดรีเอเจนต์ประเภท 1 ที่ตรงกับมาตรฐาน ASTM, NCCLS, ISO และ USP เป็นตัวเลือกที่ดีที่สุดสำหรับแอปพลิเคชัน HPLC
ขั้นตอนที่ 2. การเตรียมมาตรฐาน
การเตรียมมาตรฐานสำหรับการระบุและปริมาณสารประกอบอาจเป็นกระบวนการที่น่าเบื่อและใช้เวลานาน การชั่งน้ำหนักของแข็งอย่างแม่นยำเพื่อให้ปริมาณตัวทำละลายที่กำหนดไว้ล่วงหน้าสามารถใช้งานได้ยากและของเสียเนื่องจากข้อผิดพลาดอาจมีค่าใช้จ่ายสูงโดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อทำงานกับยา ปัจจัยอื่น ๆ เช่นอุณหภูมิทำให้การเตรียมมาตรฐานซับซ้อนยิ่งขึ้น ความผันผวนของอุณหภูมิเปลี่ยนความหนาแน่นของตัวทำละลายและนำไปสู่ความแตกต่างอย่างมากในความเข้มข้น
การใช้ความสมดุลที่ช่วยให้การชั่งน้ำหนักมีความแม่นยำสูงถึงทศนิยมหลายตำแหน่งและทำให้กระบวนการอัตโนมัติโดยการเชื่อมโยงความสมดุลกับเครื่องทำละลายรับประกันความแม่นยำสูงสุด การใช้ซอฟต์แวร์เช่น YAPP16 Dosing Q
APP ช่วยให้การคำนวณอัตโนมัติและการตรวจสอบค่า gravimetric ของค่าที่วัดได้ การบันทึกอุณหภูมิและความหนาแน่นของตัวทำละลายยังช่วยให้มั่นใจได้ว่ามีความเข้มข้นที่แม่นยำสูงโดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อเตรียมมาตรฐานในวันต่อ ๆ ไป การถ่ายโอนข้อมูลโดยตรงจากแอปพลิเคชันการชั่งน้ำหนัก YAPP16 ไปยังซอฟต์แวร์ Thermo Scientific ™ Chromeleon ™ 7.2 Chromatography System (CDS) เป็นตัวเลือกสำหรับการจัดการข้อมูลไร้กระดาษพร้อมความสมบูรณ์ของข้อมูลเต็มรูปแบบ
ขั้นตอนที่ 3. กลับไปสู่พื้นฐานด้วยการปิเปตที่ดี
ความสำคัญของการปิเปตที่แม่นยำและแม่นยำมักถูกมองข้ามและได้รับอนุญาต ระดับทักษะและประสบการณ์ของผู้ใช้อาจมีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญสำหรับการวิเคราะห์ที่ละเอียดอ่อนเช่น HPLC การเลือกปิเปตที่เหมาะสมสามารถลดข้อผิดพลาดของมนุษย์และค่าใช้จ่ายที่เกี่ยวข้องของตัวทำละลายที่สูญเปล่า
ปิเปตเชิงกลที่มีการล็อคปริมาตรเสนอวิธีแก้ปัญหาง่าย ๆ สำหรับการป้องกันการเปลี่ยนแปลงระดับเสียงโดยไม่ตั้งใจ ปลายปิเปตยังเป็นรายละเอียดที่สำคัญที่ต้องพิจารณาสำหรับการวิเคราะห์ HPLC เคล็ดลับการเก็บรักษาต่ำจะดีที่สุดเมื่อทำงานกับตัวทำละลายของความหนืดที่แตกต่างกัน การปนเปื้อนตัวอย่างสามารถเกิดขึ้นได้เนื่องจากการชะล้างจากปลายปิเปต ดังนั้นเคล็ดลับที่มีความต้านทานต่อสารเคมีสูงรักษาความสมบูรณ์ของตัวอย่าง
ขั้นตอนที่ 4. ตัวกรองเพื่อความแม่นยำและอายุยืน
การดูแลเพิ่มเติมเพื่อกรองตัวอย่างก่อนการวิเคราะห์ช่วยเพิ่มความน่าเชื่อถือและสามารถยืดอายุการใช้งานของคอลัมน์ HPLC ได้โดยการป้องกันการอุดตัน ตัวกรองเข็มฉีดยาเป็นวิธีแก้ปัญหาที่ง่ายและรวดเร็วสำหรับการกรองตัวอย่างก่อนคอลัมน์โครมาโตกราฟี เช่นเดียวกับเคล็ดลับปิเปตตัวทำละลายที่ใช้ใน HPLC จำเป็นต้องใช้ตัวกรองเฉพาะเพื่อป้องกันการชะล้างและการปนเปื้อนตัวอย่าง
เยื่อหุ้มเซลล์เซลลูโลสทนต่อ dimethyl sulfoxide (DMSO), amides, ketones, ester และ ether สารประกอบ สำหรับตัวทำละลายที่รุนแรงโดยเฉพาะอย่างยิ่งเยื่อหุ้มเซลล์ polyethersulfone ที่ไม่เคลือบผิว (PTFO) ป้องกันการชะล้างและการปนเปื้อนตัวอย่าง การกรองตัวอย่างจะใช้เวลานานมากเมื่อจำนวนตัวอย่างเพิ่มขึ้น หน่วยกรองตัวอย่างหลายตัวอย่างเช่นระบบการกรองClaristep®สามารถประมวลผลตัวอย่างได้โดยไม่ต้องใช้เข็มฉีดยาและการเตรียมตัวอย่างที่รวดเร็วโดยไม่ต้องเสียสละคุณภาพ
ปัญหาห้าประการที่คุณต้องใส่ใจกับ！
1. ปัญหาการเตรียมตัวอย่างที่ใหญ่ที่สุดกำลังเผชิญกับห้องปฏิบัติการคืออะไร?
ห้องปฏิบัติการอยู่ภายใต้แรงกดดันที่เพิ่มขึ้นในแง่ของเวลาและค่าใช้จ่ายซึ่งมักจะจัดการไม่เพียง แต่มีตัวอย่างจำนวนมากเท่านั้น แต่ยังรวมถึงตัวอย่างของธรรมชาติที่แตกต่างกัน การเตรียมตัวอย่างเป็นพื้นที่ที่ความแตกต่างเล็กน้อยระหว่างประเภทตัวอย่างหรือวิธีการเตรียมตัวอย่างและวัสดุที่ใช้อาจส่งผลกระทบต่อผลลัพธ์ที่ได้รับ การสร้างความมั่นใจในความเข้ากันได้ระหว่างวัสดุในอุปกรณ์การกรองและตัวทำละลายสามารถลดปัญหาได้ ตัวอย่างเช่นระดับของสารประกอบที่สกัดได้ซึ่งอาจรบกวนการตรวจจับ analyte
2. จะเกิดอะไรขึ้นเมื่อการเตรียมตัวอย่างผิดพลาด?
ก่อนที่จะมีการวิเคราะห์แอปพลิเคชั่นโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง (HPLC) ตัวอย่างจะจัดทำโดยวิธีการที่หลากหลายซึ่งทั้งหมดมีศักยภาพที่จะมีอิทธิพลต่อผลการวิเคราะห์โดยส่งผลกระทบต่อตัวอย่างที่ฉีดเข้าไปในระบบ การเตรียมตัวอย่างที่ไม่มีประสิทธิภาพสามารถนำไปสู่การลดอายุการใช้งานคอลัมน์เพิ่มความต้องการบริการที่เพิ่มขึ้นสำหรับส่วนประกอบการหยุดทำงานที่อาจเกิดขึ้นจากการใช้เครื่องมือการลดประสิทธิภาพการแยกโครมาโตกราฟีและการทำซ้ำและปัญหาอื่น ๆ อีกมากมาย
3. อย่างรวดเร็วก่อนการกรองดูเหมือนจะเป็นกระบวนการง่ายๆ ...
แม้ว่าการกรองจะเป็นส่วนเล็ก ๆ ของเวิร์กโฟลว์ขนาดใหญ่ แต่ผลกระทบของการเลือกตัวกรองที่เหมาะสมสำหรับแอปพลิเคชันที่กำหนดนั้นมีความสำคัญ ตัวอย่างเช่นวิธีการที่ไม่ได้ขจัดอนุภาคอนุภาคที่เพียงพออาจส่งผลให้เกิดการปิดกั้นคอลัมน์ ตัวเลือกที่ไม่เหมาะสมของอุปกรณ์การเตรียมตัวอย่างสามารถปล่อยสารประกอบที่สกัดได้ในตัวอย่างบางอย่างให้กับตัวอย่าง, ผูกการวิเคราะห์ที่น่าสนใจหรือแนะนำข้อผิดพลาดผ่านการสูญเสียตัวอย่าง
ทั้งหมดมีอิทธิพลต่อคุณภาพและความสามารถในการทำซ้ำของผลลัพธ์ที่สังเกตได้ หากคุณมั่นใจว่าวัสดุสิ้นเปลืองการกรองของคุณไม่ได้มีส่วนทำให้เกิดข้อผิดพลาดที่ต้องมีการทำซ้ำหรือการสืบสวนรูทสาเหตุคุณจะประหยัดเงินและให้ความอุ่นใจตัวเอง
4. ตัวอย่างที่พบบ่อยที่สุดคืออะไร 'ล้มเหลว'
ตัวเลือกเมมเบรนตัวกรองที่ไม่ถูกต้องเป็นปัญหาหนึ่งที่เราเห็นมาก ปัญหาสามารถปรากฏเป็นยอดเขาภายนอกจากสกัดซึ่งสามารถรบกวนการตรวจจับการวิเคราะห์ที่น่าสนใจ ความไม่ลงรอยกันของสื่อตัวกรองที่มีตัวอย่างหรือตัวทำละลายในแง่ของความต้านทานทางเคมีไม่ได้ จำกัด อยู่เพียง แต่ผลกระทบจากการสลายตัวต่อสื่อตัวกรองเท่านั้น ตัวทำละลายอาจทำให้เกิดอาการบวมเล็กน้อยของวัสดุเยื่อหุ้มเซลล์พอลิเมอร์เมื่อไม่เข้ากันได้อย่างสมบูรณ์ซึ่งจะส่งผลต่อประสิทธิภาพการกรองซึ่งนำไปสู่การทำความสะอาดตัวอย่างที่ไม่มีประสิทธิภาพ วิธีหนึ่งในการแก้ไขปัญหานี้คือการเลือกเมมเบรนที่เข้ากันได้กับตัวทำละลายทั้งน้ำและอินทรีย์ สำหรับการเตรียมตัวอย่าง HPLC ทั่วไปตัวกรองเข็มฉีดยาและตัวกรองแบบไร้ระบบที่มีเยื่อหุ้มเซลลูโลสที่สร้างใหม่เป็นตัวเลือกที่ดีเนื่องจากความเข้ากันได้ของตัวทำละลายในวงกว้าง
การใช้อุปกรณ์ตัวกรองที่มีขนาดใหญ่กว่าที่จำเป็นสำหรับระดับเสียงที่เตรียมไว้เป็นข้อผิดพลาดทั่วไปอีกประการหนึ่ง การใช้อุปกรณ์ตัวกรองขนาดใหญ่เกินไปหมายความว่าตัวอย่างจำนวนเล็กน้อยจะยังคงอยู่ในตัวกรองแม้หลังจากข้อควรระวังจะถูกขับออกให้มากที่สุด
5. อะไรคือข้อดีของการทำขั้นตอนการกรองอย่างจริงจัง?
เป้าหมายพื้นฐานของห้องปฏิบัติการส่วนใหญ่ที่มีส่วนร่วมในการทดสอบการวิเคราะห์คือการพัฒนากระบวนการที่สอดคล้องกันซึ่งหนุนผลลัพธ์ที่สอดคล้องกัน
และต้องมีการกรองที่สอดคล้องกัน การเลือกอุปกรณ์การกรองที่มีขนาดรูขุมขนที่เหมาะสมและลักษณะการเก็บรักษาช่วยให้มั่นใจว่าการกำจัดอนุภาคที่มีประสิทธิภาพในขณะที่การเลือกขนาดที่เหมาะสมและการออกแบบหน่วยกรองสามารถช่วยลดการสูญเสียตัวอย่าง การกรองที่ดียังช่วยปกป้องคอลัมน์และอาจขยายอายุการใช้งานของทั้งหัวฉีดและคอลัมน์
บทสรุป
HPLC เป็นเทคนิคที่มีค่าสำหรับวิทยาศาสตร์เพื่อชีวิตและการวิจัยทางชีวเวชภัณฑ์เนื่องจากให้ผลลัพธ์ที่ถูกต้องและทำซ้ำได้ ความแม่นยำนี้ขึ้นอยู่กับความสมบูรณ์ของตัวอย่าง HPLC และวิธีที่ดีที่สุดเพื่อให้แน่ใจว่าตัวอย่างคุณภาพสูงคือการเริ่มต้นด้วยเครื่องมือที่ดีที่สุด ด้วยวิธีแก้ปัญหาสำหรับน้ำ ultrapure, การเตรียมมาตรฐาน, ปิเปต, เคล็ดลับและตัวกรอง, บัญชีการเตรียมตัวอย่าง HPLC สำหรับทุกรายละเอียด โซลูชันและซอฟต์แวร์อัตโนมัติยังช่วยปรับปรุงตัวอย่างการเตรียมตัวอย่างเพื่อส่งตัวอย่างที่สะอาดเพื่อผลลัพธ์ที่สะอาด
การอภิปรายเพิ่มเติมเกี่ยวกับโซลูชั่นการเตรียมตัวอย่าง HPLC ได้รับการต้อนรับ!
ภาษาอังกฤษ
ชาวจีน
