Високопродуктивна рідинна хроматографія (ВЕРХ) - це ключова аналітична методика, що використовується в лабораторіях у таких різноманітних галузях, як фармацевтичні препарати, екологічні науки та безпека харчових продуктів. У світі ВЕРХ є дві основні категорії: аналітична ВЕРХ та препаративна ВЕРХ. Хоча обидві методи використовують подібні принципи для розділення сполук, вони використовуються для різних цілей і мають різні робочі параметри. Цей блог вивчить відмінності між аналітичною та підготовчою ВЕРХ, включаючи їх мету, масштаб роботи, обладнання та додатки.
Хочете знати повну інформацію про флакони ВЕРХ, будь ласка, перевірте цю статтю: Енциклопедія флаконів ВЕРХ
Розуміння аналітичної ВЕРХ
Визначення та мета
Аналітична ВЕРХ зосереджується насамперед на розділенні та ідентифікації сполук у зразку. Основна мета - отримати якісну та кількісну інформацію про компоненти, присутні в суміші. Аналітичний ВЕРХ часто використовується для:
Якісний аналіз: ідентифікація компонентів вибірки.
Кількісний аналіз: визначення концентрації конкретної сполуки у зразку.
Масштаб роботи
Аналітична ВЕРХ працює в меншому масштабі, як правило, включає ін'єкції зразків мікролітера. Використовувані обсяги, як правило, знаходяться в діапазоні від 1 до 100 мкл, що дозволяє проаналізувати кілька зразків за один пробіг. Цей невеликий масштаб ідеально підходить для звичайного тестування та контролю якості.
Розмір стовпчика та розмір частинок
Стовпці, що використовуються в аналітичній ВЕРХ, зазвичай мають невеликий діаметр, як правило, близько 4,6 мм, і упаковані з невеликими стаціонарними фазовими частинками (3-5 мкм). Ця конфігурація дозволяє проводити високу роздільну здатність та ефективне розділення сполук, що підходить для детального аналізу.
Методи виявлення
Аналітична ВЕРХ використовує різноманітні методи виявлення, включаючи УФ-видимість, флуоресценцію та мас-спектрометрію. Вибір детектора залежить від характеру аналіту та конкретних вимог аналізу. Неруйнівні детектори часто використовуються для того, щоб зразок можна було проаналізувати без значних втрат.
Хочете знати 50 відповідей про флакони ВЕРХ, будь ласка, перевірте цю статтю: 50 найчастіше задаються питання щодо флаконів ВЕРХ
Розуміння підготовчої ВЕРХ
Визначення та мета
Препаративна ВЕРХ, з іншого боку, має на меті відокремити та очистити конкретні сполуки від суміші. Основна мета - виділити достатню кількість цільової сполуки для подальшого аналізу або використання. Підготовчий
ВЕРХ зазвичай використовується для таких програм:
З'єднання сполуки: вилучення та очищення конкретних сполук для дослідницьких або промислових застосувань.
Підготовка зразків: Підготовка зразків для подальшого аналізу або формулювання.
Масштаб операцій
Препаративна ВЕРХ виконується в більш масштабах, ніж аналітична ВЕРХ. Обсяги зразка можуть становити від кількох мілілітрів до декількох літрів, залежно від очікуваного виходу цільової сполуки. Цей більший масштаб дозволяє збирати достатню кількість очищеного матеріалу для подальшого використання.
Розмір стовпчика та розмір частинок
Стовпці, що використовуються для препаративної ВЕРХ, значно більші, як правило, від 20 мм до 100 мм або більше діаметра. Стовпці упаковані з більшими стаціонарними фазовими частинками (як правило, 10-20 мкм) для збільшення швидкості потоку та розміщення більших обсягів зразків. Ця конструкція допомагає знизити задній тиск і досягти ефективного розділення сполук.
Методи виявлення
При препаративній ВЕРХ методи виявлення можуть відрізнятися від тих, що використовуються в аналітичній ВЕРХ. Незважаючи на те, що неруйнівні детектори все ще поширені, підготовчі системи часто використовують детектори, які здатні збирати дроби на основі профілю елюції. Це дозволяє виділити конкретні сполуки, коли вони елютують із стовпця.
Хочете дізнатися більше про застосування хроматографічних флаконів, будь ласка, перевірте цю статтю:П'ять методів очищення флаконів ВЕРХ
Ключові відмінності між аналітичною та препаративною ВЕРХ
|
Означати
|
Аналітична ВЕРХ
|
Препаративна ВЕРХ
|
|
Мета
|
Якісний та кількісний аналіз
|
Ізоляція та очищення сполук
|
|
Масштаб роботи
|
Дрібні (мкл обсягів)
|
Масштабні (мл до L обсягів)
|
|
Розміри стовпця
|
Менший діаметр (4,6 мм)
|
Більший діаметр (20-100 мм)
|
|
Розмір частинок
|
Менші частинки (3-5 мкм)
|
Більші частинки (10-20 мкм)
|
|
Швидкість потоку
|
Нижня швидкість потоку (0,1-5 мл \ / хв)
|
Більш високі швидкості потоку (10-200 мл \ / хв)
|
|
Методи виявлення
|
Неруйнівні детектори (УФ, МС)
|
Колекція фракцій на основі профілю елюції
|
Вибір між аналітичною та підготовчою ВЕРХ
Вибираючи між аналітичною та препаративою ВЕРХ, врахуйте наступні фактори:
Мета аналізу: Визначте, чи є основна мета якісно та кількісно аналізувати сполуки або виділити конкретні сполуки для подальшого використання.
Кількість зразка: Оцініть кількість наявних зразків. Якщо є невелика кількість зразка, аналітична ВЕРХ може бути більш доцільною. І навпаки, якщо потрібна велика кількість зразка, препаративна ВЕРХ є кращим вибором.
Необхідна чистота та врожайність: Розгляньте необхідну чистоту та вихід цільової сполуки. Препаративна ВЕРХ має на меті максимізувати відновлення конкретної сполуки, тоді як аналітичний ВЕРХ зосереджується на наданні детальної інформації про склад вибірки.
Ресурси та обладнання: Оцініть наявні ресурси, включаючи обладнання та бюджет. Препаративні системи ВЕРХ, як правило, дорожчі та потребують більше інвестицій у обладнання та експлуатаційні витрати.
Зацікавлені в освоєнні підготовки зразків ВЕРХ? Перевірте цю статтю:Рішення для підготовки зразків ВЕРХ для найкращих результатів.
Висновок
Як аналітична, так і підготовча ВЕРХ є цінними методами в галузі хроматографії, і кожен має різне використання залежно від потреб дослідників та промисловості. Хоча аналітична ВЕРХ ідеально підходить для детального аналізу та кількісного визначення сполук, препаративна ВЕРХ має важливе значення для виділення та очищення конкретних сполук для подальших застосувань. Розуміння відмінностей між цими двома методами допоможе дослідникам приймати обгрунтовані рішення, оптимізувати свої робочі процеси та отримати точні та надійні результати в своїх аналізах. Оскільки технологія HPLC продовжує просуватися, як аналітичні, так і підготовчі методи залишатимуться невід'ємною частиною успішних наукових досліджень усіх видів.
Англійська мова
Китайський
