Yuqori ishlash suyuq xromatografiyasi (HPLC) - bu farmatsevtika, ekologik fanlar va oziq-ovqat xavfsizligi kabi bir xilda laboratoriyalarda ishlatiladigan asosiy analitik usul. XPLC dunyo doirasida ikkita asosiy toifa mavjud: tahliliy XPLC va XALQ. Ikkala usul ham shunga o'xshash printsiplardan alohida birikmalarga sarflaydilar, ular turli maqsadlarda ishlatiladi va boshqa operatsion parametrlarga ega. Ushbu blog analitik va tayyorgar XPLC o'rtasidagi tafovutlar, shu jumladan ularning maqsadi, foydalanish, uskunalar va dasturlar o'rtasidagi tafovutlarni o'rganadi.
HPLC flaki haqida to'liq ma'lumotni bilishni xohlaysiz, iltimos, ushbu maqolani tekshiring: HPLC flakonlari entsiklopediyasi
Tahliliy HPLCni tushunish
Ta'rif va maqsad
Tahliliy HPLC, birinchi navbatda namunadagi birikmalarni ajratish va aniqlashni aniqlashda. Asosiy maqsad aralashmada mavjud bo'lgan qismlar haqida sifatli va miqdoriy ma'lumotlarni olish. Tahliliy HPLC ko'pincha ishlatiladi:
Sifatli tahlil: namunaning tarkibiy qismlarini aniqlash.
Miqdoriy tahlil: namunadagi ma'lum bir birikmaning kontsentratsiyasini aniqlash.
Ishlash ko'lami
Tahliliy HPLC Odatda mikroliter namunaviy in'ektsiyalarni o'z ichiga olgan kichikroq hajmda ishlaydi. Odatda ishlatilgan hajmlar odatda 1 dan 100 mkl diapazonda, bir nechta namunalarni bitta yugurishda tahlil qilishga imkon beradi. Ushbu kichik miqyosda muntazam sinov va sifat nazorati uchun juda mos keladi.
Ustun hajmi va zarracha hajmi
Tahlil bilan tahliliy HPLCda ishlatiladigan ustunlar odatda diametri, odatda 4,6 mm, kichik statsionar faz zarralari (3-5 mkm) bilan to'ldiriladi. Ushbu konfiguratsiya yuqori piksellar va samarali birikma ajratishga imkon beradi, batafsil tahlil qilish uchun mos keladi.
Aniqlash usullari
Tahliliy XPLC turli xil aniqlash usullarini, shu jumladan UB-ko'rinadigan, floresan va spektrometriya ishlaydi. Detektorni tanlash analite xususiyatiga va tahlilning o'ziga xos talablariga bog'liq. Nafar bo'lmagan detektorlar ko'pincha namunalarni sezilarli yo'qotishsiz tahlil qilishlari mumkinligini ta'minlash uchun ishlatiladi.
HPLC flaki haqida 50 ta javobni bilishni xohlaysiz, iltimos, ushbu maqolani tekshiring: 50 ta eng ko'p beriladigan savollar HPLC flaki
Tayyorlangan HPLC tushunish
Ta'rif va maqsad
Boshqa tomondan, iloji boricha aniq birikmalarni ajratish va tozalash maqsadlariga qaratilgan. Asosiy maqsadi keyingi tahlil qilish yoki foydalanish uchun maqsadli miqdorni ajratishdir. Tayyor
HPLC odatda quyidagi dasturlar uchun ishlatiladi:
Murakkab izolyatsiya: tadqiqot yoki sanoat dasturlari uchun ma'lum bir birikmalarni qazib olish va tozalash.
Namuna tayyorlash: keyingi tahlil yoki shakllantirish uchun namunalar tayyorlash.
Operatsiyalar miqyosi
Tayyor XPLC tahliliy XPLCga qaraganda kattaroq miqyosda amalga oshiriladi. Namuna hajmi bir necha millilerlardan bir necha litrgacha bo'lishi mumkin, maqsad birikmasining kutilgan hosiliga qarab. Ushbu kattaroq miqyosda etarli miqdordagi tozalangan materialni keyingi foydalanish uchun yig'ish imkonini beradi.
Ustun hajmi va zarracha hajmi
XPPLC uchun ishlatiladigan ustunlar odatda 20 mm dan 100 mm gacha yoki diametri kattaroqroq. Ustunlar asta-sekin statsionar faz zarralari (odatda 10-20 mkm) bilan oqim stavkalarini ko'paytirish va kattaroq namunalarni joylashtirish bilan to'ldiriladi. Ushbu dizayn orqaga bosimni kamaytirishga va aralashmalarning samarali ajratishga erishishga yordam beradi.
Aniqlash usullari
Tayyor XPLCda aniqlash usullari tahliliy HPLC-da ishlatiladiganlardan farq qilishi mumkin. Zararsiz detektorlar hali ham keng tarqalgan, tayyorgarliklar ko'pincha noroziliklar bilan asoslanadigan fraktsiyalarni yig'ishga qodir bo'lgan detektorlardan foydalanadi. Bu aniq birikmalarni ustundan oqartirishga imkon beradi.
Xromatografiya flakonlarini qo'llash haqida ko'proq bilishni xohlaysiz, iltimos, ushbu maqolani tekshiring:HPLC flakonlari uchun beshta tozalash usullari
Tealitik va tayyorgar XPLC o'rtasidagi asosiy farqlar
|
O'ziga xos xususiyat
|
Tahliliy HPLC
|
Tayyor XPLC
|
|
Maqsad
|
Sifatli va miqdoriy tahlil
|
Izolyatsiya va birikmalarni tozalash
|
|
Ishlash ko'lami
|
Kichik miqyosli (mkl hajmi)
|
Katta miqyosli (ml bo'laklarga)
|
|
Ustun o'lchamlari
|
Kichik diametr (4.6 mm)
|
Kattaroq diametri (20-100 mm)
|
|
Zarracha hajmi
|
Kichik zarralar (3-5 mkm)
|
Katta zarralar (10-20 mkm)
|
|
Oqim stavkalari
|
Pastki oqim stavkalari (0.1-5 ml \ / min)
|
Yuqori oqim stavkalari (10-200 ml \ / min)
|
|
Aniqlash usullari
|
Nafar bo'lmagan vositachilar (UV, MS)
|
Miqqol profiliga asoslangan fraktsiya yig'ish
|
Analitik va tayyorgar XPLC o'rtasida tanlash
Analitik va tayyorgar XPLC o'rtasida tanlashda quyidagi omillarni ko'rib chiqing:
Tahlil qilish maqsadi: asosiy maqsad birikmalarni sifatli va miqdoriy tahlil qilish yoki keyingi foydalanish uchun o'ziga xos birikmalarni izolyatsiya qilish yoki ajratish degani.
Namuna miqdori: mavjud bo'lgan namuna miqdorini baholang. Agar oz miqdordagi namunali namuna mavjud bo'lsa, tahliliy HPLC ko'proq mos bo'lishi mumkin. Aksincha, agar ko'p miqdordagi namuna kerak bo'lsa, hplc yaxshiroq tanlovdir.
Kerakli poklik va hosil: Maqsad birikmasining kerakli pokligini va hosilini ko'rib chiqing. Tayyor XPLC ma'lum bir birikmani engillashtirishga qaratilgan, tahliliy HPLC, namunaning tarkibi to'g'risida batafsil ma'lumot berishga qaratilgan.
Resurslar va uskunalar: mavjud resurslarni, shu jumladan uskunalar va byudjetni baholang. Tayyor XPLC tizimlari qimmatga tushadi va uskunalar va operatsion xarajatlarga ko'proq sarmoya kiritishni talab qiladi.
XPLC namunasini tayyorlashdan manfaatdormi? Ushbu maqolani tekshiring:XPLC eng yaxshi natijalar uchun tayyorgarlik echimlari.
Xulosa
Shuningdek, tahliliy va tayyorgar XPLC xromatografiya sohasida qimmatbaho texnikalardir va ularning har biri tadqiqotchilar va sanoat ehtiyojlariga qarab har xil foydalanishadi. HPLC tahliliy xplce - tarmoqlarni batafsil tahlil qilish va birlashtirish uchun ideal, ammo qo'shimcha ilovalar uchun maxsus birikmalarni izolyatsiyalash va tozalash uchun zarurdir. Ushbu ikki usul o'rtasidagi farqlarni tushunish tadqiqotchilarga xabardor qarorlar chiqarishga, ularning ishlarini optimallashtirish va ularning tahlillarida aniq va ishonchli natijalarga erishishga yordam beradi. XPLC texnologiyasi analitik va tayyorlovchi usullar har xil ilmiy izlanishlarning ajralmas qismi bo'lib qoladi.