Datrysiadau paratoi sampl HPLC ar gyfer y canlyniadau gorau
Newyddion
Categorïau
Nghwgrwm

Datrysiadau paratoi sampl HPLC ar gyfer y canlyniadau gorau

Gorff 26ain, 2022
HPLC yw un o'r dulliau dadansoddol manwl uchel mwyaf cyffredin. Ei brif amcan: Cyflawni canlyniadau atgynyrchiol a phenodol. Mae angen paratoi'n optimaidd i'w chwistrellu'n uniongyrchol ar golofn HPLC.
I gyflawni hyn, mae angen diddymu eich sampl nid yn unig yn y toddydd priodol. Yn bwysicach fyth, rhaid iddo hefyd fod yn rhydd o ronynnau i ddiystyru ymyrraeth yn y ffordd orau bosibl wrth ganfod ac i atal rhwystro'ch colofn. Mae'r paratoi sampl llafur-ddwys hwn yn aml yn feichus diflas sy'n cymryd llawer o amser.

Datrysiad Prepartion Sampl HPLC

Mae paratoi sampl yn rhan hanfodol o ddadansoddiadau cromatograffig a sbectrosgopig. Bwriad y broses yw darparu datrysiad cynrychioliadol, atgynyrchiol a homogenaidd sy'n addas i'w chwistrellu i'r golofn ar gyfer dadansoddiad cromatograffig, i mewn i ffynhonnell arsugniad atomig ICP-MS \ /, neu i mewn i diwb Cuvette neu NMR i'w nodweddu ymhellach. Nod paratoi sampl yw darparu sampl aliquot bod (a) yn gymharol rhydd o ymyrraeth, (b) na fydd yn niweidio'r golofn neu'r offeryn, ac (c) yn gydnaws â'r dull dadansoddol a fwriadwyd.

O'i gymharu â pharatoi sampl optimized a heb ei optimeiddio

Prep sampl heb ei optimeiddio

Cromatogram gyda sŵn cefndir amlwg a chynffon brig
Datrysiad Prepartion Sampl HPLC

Mewn dadansoddiad HPLC, gall problemau sy'n tarddu o baratoi sampl ddigwydd.
1. Rhwystr posib eich colofn HPLC
2. Sensitifrwydd is eich colofn HPLC
3. Cynffon brig
4. Copaon mwy ffug-gadarnhaol
5. Sŵn cefndir uwch
6. Leachables

Paratoi sampl wedi'i optimeiddio

Cromatogram gyda llinell sylfaen sefydlog a chopaon cymesur

Datrysiad Prepartion Sampl HPLC

Mae defnyddio cynhyrchion Sartorius i baratoi samplau ar gyfer HPLC yn atal y problemau arferol rhag digwydd ac yn caniatáu cywirdeb dadansoddol uwch.
1.no rhwystro'ch colofn HPLC
2. Sensitifrwydd uwch eich colofn HPLC
3. Cywirdeb uwch
4. Llai o gopaon ffug-gadarnhaol
5. Llai o sŵn cefndir
6.Ni Heverable

Pedwar Cam ar gyfer Paratoi Sampl HPLC

Gadewch inni eich argyhoeddi sut y gallwch arbed amser gyda'n datrysiadau ac ar yr un pryd gynyddu atgynyrchioldeb eich canlyniadau:

Cam 1. Dadansoddiad o atebion dyfrllyd

Ansawdd dŵr gwael yw un o'r ffactorau mwyaf sy'n cyfrannu at broblemau yn ystod rhediadau HPLC. Gall amhureddau dŵr yn y cyfnod symudol ryngweithio â'r golofn ac arwain at ddatrysiad a sensitifrwydd gwael neu gopaon annisgwyl yn y cromatogram, y cyfeirir atynt yn gyffredin fel copaon ysbrydion. Mae defnyddio dŵr ultrapure yn lleihau'n sylweddol y risg o halogi â charbonau organig, micro -organebau, endotocsinau, RNases, a DNAses. Mae dŵr ultrapure ar gael i'w brynu, fodd bynnag, gan ddefnyddio system puro dŵr yn eich labordy yw'r ffordd hawsaf o sicrhau dŵr ultrapure o ansawdd uchel. Dŵr gradd ymweithredydd Math 1 sy'n cwrdd â safonau ASTM, NCCLS, ISO, a USP yw'r dewis gorau ar gyfer cymwysiadau HPLC.

Cam 2. Paratoi Safonau

Gall paratoi safonau ar gyfer adnabod a meintioli cyfansawdd fod yn broses ddiflas a llafurus. Mae'n anodd pwyso solid yn gywir fel y gellir defnyddio cyfaint o doddydd wedi'i ddiffinio ymlaen llaw, a gall gwastraff oherwydd gwall fod yn gostus - yn enwedig wrth weithio gyda fferyllol. Mae ffactorau eraill fel tymheredd yn cymhlethu paratoi safonol ymhellach. Mae amrywiadau tymheredd yn newid dwysedd y toddyddion ac yn cyfrannu at wahaniaethau dramatig mewn crynodiad.

Datrysiad Prepartion Sampl HPLC

Mae defnyddio cydbwysedd sy'n galluogi cywirdeb pwyso hyd at sawl man degol ac awtomeiddio'r broses trwy gysylltu'r cydbwysedd â dosbarthwr toddydd yn gwarantu'r manwl gywirdeb uchaf. Mae defnyddio meddalwedd fel Dosio YAPP16 Q-APP yn galluogi cyfrifiadau awtomatig a monitro disgimetrig o werthoedd wedi'u mesur. Mae dogfennu tymheredd a dwysedd y toddydd hefyd yn sicrhau crynodiadau cywir iawn, yn enwedig wrth baratoi safonau ar y diwrnodau dilynol. Mae trosglwyddo data uniongyrchol o'r cymhwysiad pwyso YAPP16 i feddalwedd System Ddata Cromatograffeg (CDS) Thermo Scientific ™ Chromeleon ™ 7.2 yn opsiwn ar gyfer trin data di -bapur gyda chywirdeb data llawn.

Cam 3. Ewch yn ôl at y pethau sylfaenol gyda phibetio da

Mae pwysigrwydd pibetio cywir a manwl gywir yn cael ei anwybyddu a'i gymryd yn ganiataol yn rhy aml. Gall lefel sgiliau a phrofiad y defnyddiwr fod â goblygiadau sylweddol ar gyfer dadansoddiadau sensitif fel HPLC. Gall dewis y pibed cywir leihau gwall dynol a chostau cysylltiedig toddyddion sy'n cael eu gwastraffu.

Datrysiad Prepartion Sampl HPLC

Mae pibellau mecanyddol sydd â chlo cyfaint yn cynnig datrysiad syml ar gyfer atal newidiadau cyfaint damweiniol, tra bod pibellau electronig mwy soffistigedig yn dileu amrywioldeb defnyddwyr i ddarparu cyfeintiau manwl gywir yn gyson. Mae'r domen pibed hefyd yn fanylyn pwysig i'w hystyried ar gyfer dadansoddiadau HPLC. Awgrymiadau cadw isel sydd orau wrth weithio gyda thoddyddion o wahanol gludedd, wrth iddynt gynyddu adferiad sampl i'r eithaf. Gall halogi sampl ddigwydd hefyd o ganlyniad i drwytholchi o'r domen pibed. O'r herwydd, mae awgrymiadau ag ymwrthedd cemegol uchel yn cadw cyfanrwydd sampl.

Cam 4. Hidlo ar gyfer cywirdeb a hirhoedledd

Mae cymryd gofal ychwanegol i hidlo samplau cyn eu dadansoddi yn gwella dibynadwyedd a gall estyn oes y golofn HPLC trwy atal effeithiau clocsio. Mae hidlwyr chwistrell yn ddatrysiad syml, cyflym ar gyfer hidlo samplau cyn cromatograffeg colofn. Yn yr un modd ag awgrymiadau pibed, mae'r toddyddion a ddefnyddir yn HPLC yn gofyn am hidlwyr penodol i atal trwytholchi a samplu halogiad.

Datrysiad Prepartion Sampl HPLC

Mae pilenni cellwlos yn gwrthsefyll sylffocsid dimethyl (DMSO), amidau, cetonau, ester, ac cyfansoddion ether. Ar gyfer toddyddion arbennig o lem, mae pilenni polyethersulfone heb eu gorchuddio (PTFO) yn atal trwytholchi a halogi sampl. Mae hidlo sampl yn cymryd llawer o amser pan fydd y rhif sampl yn cynyddu. Gall unedau hidlo aml-sampl, fel system hidlo Claristep®, brosesu samplau heb chwistrelli a pharatoi sampl trac cyflym heb aberthu ansawdd.

Pum problem mae angen i chi roi sylw i!

1. Beth yw'r problemau paratoi sampl mwyaf sy'n wynebu labordai?

Mae labordai o dan bwysau cynyddol o ran amser a chost, yn aml yn delio nid yn unig â niferoedd uchel o samplau ond hefyd samplau o natur amrywiol. Mae paratoi sampl yn faes lle gall gwahaniaethau cynnil rhwng mathau o samplau neu'r dulliau paratoi sampl a'r deunyddiau a ddefnyddir effeithio ar y canlyniadau a gafwyd. Gall sicrhau cydnawsedd rhwng y deunyddiau yn y ddyfais hidlo a'r toddydd leihau materion; Er enghraifft, y lefelau o gyfansoddion y gellir eu tynnu a allai ymyrryd â chanfod dadansoddiadau.

Datrysiad Prepartion Sampl HPLC

2. Beth sy'n digwydd pan fydd paratoi sampl yn mynd o'i le?

Cyn cymwysiadau cromatograffeg hylif perfformiad uchel dadansoddol (HPLC), paratoir samplau gan amrywiaeth o ddulliau, y mae gan bob un ohonynt y potensial i ddylanwadu ar ganlyniadau dadansoddol trwy effeithio ar y sampl a chwistrellwyd i'r system. Gall paratoi sampl aneffeithiol arwain at ostyngiad ym mywyd y golofn, mwy o ofynion gwasanaeth ar gyfer cydrannau, amser segur posibl offeryniaeth, gostyngiad mewn effeithlonrwydd gwahanu cromatograffig ac atgynyrchioldeb, a llawer o broblemau eraill.

3. Ar yr olwg gyntaf, mae hidlo yn ymddangos fel proses syml ...

Er bod hidlo yn rhan sy'n ymddangos yn fach o lif gwaith mawr, gall effaith dewis yr hidlydd cywir ar gyfer cais penodol fod yn sylweddol. Er enghraifft, gall dulliau nad ydynt yn cael gwared ar ddigon o ddeunydd gronynnol arwain at flocio colofnau. Gallai dewis amhriodol o ddyfeisiau paratoi sampl, o dan rai amgylchiadau, ryddhau cyfansoddion y gellir eu tynnu i'r sampl, rhwymo dadansoddiadau o ddiddordeb neu gyflwyno gwallau trwy golli sampl - pob un yn dylanwadu ar ansawdd ac atgynyrchioldeb y canlyniadau a arsylwyd. Os ydych chi'n hyderus nad yw'ch nwyddau traul hidlo yn cyfrannu at wallau y mae angen eu hailweithio neu ymchwiliadau achos gwreiddiau, byddwch chi'n arbed arian ac yn rhoi tawelwch meddwl i chi'ch hun.

Datrysiad Prepartion Sampl HPLC

4. Beth yw’r sampl fwyaf cyffredin Prep ‘yn methu’?

Mae dewis pilen hidlo anghywir yn un broblem rydyn ni'n ei gweld llawer. Gall materion ymddangos fel copaon allanol o echdynnu, a all ymyrryd â chanfod y dadansoddiadau o ddiddordeb. Nid yw anghydnawsedd cyfryngau hidlo â sampl neu doddydd o ran ymwrthedd cemegol wedi'i gyfyngu'n llwyr i effeithiau diddymu ar y cyfryngau hidlo. Gall toddyddion achosi ychydig o ddeunyddiau pilen polymerig pan nad ydyn nhw'n gwbl gydnaws, a all yn ei dro effeithio ar berfformiad hidlo, gan arwain at lanhau samplau yn aneffeithiol. Un ffordd o fynd i'r afael â'r mater hwn yw trwy ddewis pilen sy'n gydnaws yn fras â thoddyddion dyfrllyd ac organig. Ar gyfer paratoi sampl HPLC nodweddiadol, mae hidlwyr chwistrell a chwistrell sy'n cynnwys pilenni seliwlos wedi'u hadfywio yn opsiwn da oherwydd eu cydnawsedd toddyddion eang.

Mae defnyddio dyfais hidlo sy'n fwy na'r angen ar gyfer y gyfrol sy'n cael ei pharatoi yn broblem gyffredin arall. Mae defnyddio dyfeisiau hidlo rhy fawr yn golygu y bydd ychydig bach o'r sampl yn aros yn yr hidlydd, hyd yn oed ar ôl i ragofalon gael eu cymryd i ddiarddel cymaint â phosibl.

Datrysiad Prepartion Sampl HPLC

5. Beth yw manteision cymryd y cam hidlo o ddifrif?

Nod sylfaenol o'r mwyafrif o labordai sy'n ymwneud â phrofi dadansoddol yw datblygu prosesau cyson sy'n sail i ganlyniadau cyson - ac sy'n gofyn am hidlo'n gyson. Mae dewis dyfais hidlo sydd â maint y mandwll cywir a nodweddion cadw yn helpu i sicrhau tynnu gronynnol yn effeithiol, tra gall y dewis o faint priodol a dyluniad yr uned hidlo helpu i leihau colli sampl. Mae hidlo da hefyd yn helpu i amddiffyn y golofn ac o bosibl yn ymestyn oes y chwistrellwr a'r golofn.

Nghasgliad

Mae HPLC yn dechneg werthfawr ar gyfer gwyddor bywyd ac ymchwil biofferyllol gan ei fod yn sicrhau canlyniadau cywir, atgynyrchiol. Mae'r cywirdeb hwn yn dibynnu ar gyfanrwydd y sampl HPLC, a'r ffordd orau o sicrhau samplau o ansawdd uchel yw dechrau gyda'r offer gorau. Gyda datrysiadau ar gyfer dŵr ultrapure, paratoi safonol, pibedau, awgrymiadau a hidlwyr, mae llinell baratoi sampl HPLC yn cyfrif am bob manylyn. Mae datrysiadau a meddalwedd awtomataidd hefyd yn helpu i symleiddio paratoad sampl i ddarparu samplau glân ar gyfer canlyniadau glân.

Croesewir mwy o drafodaethau am atebion paratoi sampl HPLC!


Ymholiadau