HPLC vs. LCMS: Cal debes escoller? 5 puntos

Principio de operación

HPLC

HPLC é unha técnica cromatográfica que separa os compostos en función das súas interaccións coas fases estacionarias e móbiles. En HPLC, unha fase móbil líquida é bombeada a través dunha columna chea de fase estacionaria, que normalmente está composta por pequenas partículas de sílice ou polímeros. Cando se introduce unha mestura de mostra no sistema, os compoñentes están separados en función da súa afinidade pola fase estacionaria. Os compostos que interactúan máis fortemente co elute de fase estacionaria máis lentamente, mentres que os compostos que interactúan menos fortemente elute máis rápido. Os compostos separados son detectados mediante unha variedade de detectores, como detectores UV-Vis, fluorescencia ou índice de refracción.

Quere saber máis sobre as aplicacións dos frascos de cromatografía, comproba este artigo:15 aplicacións de frascos de cromatografía en diferentes campos

LCMS

LCMS combina as capacidades de separación de HPLC coas capacidades de análise de masas da espectrometría de masas. En LCMS, as mostras son primeiro separadas usando HPLC, do mesmo xeito que no HPLC convencional. Non obstante, en vez de ser detectado por un detector convencional, os compostos eluídos introdúcense nun espectrómetro de masas. O espectrómetro de masas ioniza os compostos e mide a súa relación masa-carga, proporcionando información detallada sobre o peso molecular e a estrutura do analito. Esta combinación de separación e espectrometría de masas proporciona maior sensibilidade e especificidade que a HPLC só.

Mecanismo de separación

HPLC:HPLC usa alta presión para empurrar unha fase móbil líquida a través dunha columna embalada que contén unha fase estacionaria. Os compostos están separados en función das súas interaccións diferenciais coa fase estacionaria, obtendo separacións precisas e eficientes.

LCMS:LCMS combina as capacidades de separación física de HPLC coas capacidades de espectrometría de masas da espectrometría de masas (MS). O compoñente de cromatografía líquida separa os compostos, mentres que o espectrómetro de masas mide a relación masa-carga das especies ionizadas.

Sensibilidade e selectividade

HPLC:O HPLC ten boa sensibilidade e selectividade, especialmente cando se combina con detectores avanzados como UV-Vis, Fluorescencia ou Detectores de matriz de diodos. Non obstante, o HPLC só non pode proporcionar unha especificidade adecuada para mostras complexas.

LCMS:LCMS ten unha sensibilidade e selectividade superiores en comparación con HPLC. Os espectrómetros de masas poden identificar e cuantificar con precisión os compostos en función das súas relacións de masa-carga únicas, incluso en matrices complexas. Isto fai que os LCM sexan especialmente útiles para analizar compostos de rastro e confirmar a identidade de substancias descoñecidas.

HPLC:A preparación da mostra para HPLC normalmente implica dilución, filtración ou técnicas de extracción sinxelas. Non se precisan evaporar mostras, polo que o HPLC é adecuado para unha ampla gama de compostos, incluíndo substancias polares e non volátiles.

LCMS:A preparación de mostras para LCMS é similar á do HPLC, pero poden ser necesarios pasos adicionais para garantir a compatibilidade co espectrómetro de masas. Por exemplo, poden ser necesarios tampóns volátiles ou aditivos para mellorar a ionización e evitar a supresión de ións.

Aplicacións

HPLC:O HPLC é amplamente utilizado para a análise de farmacéuticos, alimentos e mostras ambientais. É particularmente eficaz para separar e cuantificar compostos en mesturas complexas, como impurezas de drogas, aditivos alimentarios e residuos de pesticidas.

LCMS:LCMS ten unha ampla gama de aplicacións, incluíndo:

Análise farmacéutica: usado no descubrimento de drogas, desenvolvemento e control de calidade.

Proteómica e metabolómica: usado para identificar e cuantificar proteínas e metabolitos en mostras biolóxicas.

Análise ambiental: úsase para detectar mostras de rastrexo en mostras de auga, solo e aire.

¿Curioso polo papel dos frascos de HPLC certificados para garantir unha análise de mostra precisa? Lea este artigo: A importancia dos frascos de HPLC certificados para a análise de mostras precisa

Conclusión

HPLC e LCMS son técnicas analíticas poderosas cos seus propios puntos fortes e limitacións. A elección entre ambos depende dos requisitos específicos da análise, como sensibilidade, selectividade, complexidade da mostra e recursos dispoñibles.

O HPLC é unha boa opción para a análise de rutina de compostos coñecidos en matrices relativamente sinxelas, onde o custo e a facilidade de uso son factores importantes. O LCMS, por outra banda, é a técnica preferida para analizar mostras complexas, identificar compostos descoñecidos e lograr a detección de nivel ultra-trazado.

A medida que a tecnoloxía continúa avanzando, a integración de HPLC e LCMS xogará un papel cada vez máis importante para satisfacer as necesidades en evolución da química analítica e garantir resultados de alta calidade en diversas aplicacións.