Undirbúningur sýnisins er mikilvægt skref í fljótandi litskiljunarferli (LC-MS) ferli, sem hefur áhrif á nákvæmni og áreiðanleika greiningarárangurs. Megintilgangurinn með undirbúningi sýnisins er að vinna úr, hreinsa og einbeita greiningum úr flóknum fylkjum og tryggja að þeir séu samhæfðir við LC-MS greiningu. Þetta skref er mikilvægt til að útrýma hugsanlegum truflunum sem geta haft áhrif á gæði gagna. Rétt sýnishornsundirbúningur bætir næmi og sértæki greiningarinnar, sem er nauðsynleg fyrir notkun á ýmsum sviðum eins og próteomics, umbrotsefnum, lyfjagreiningum og umhverfisprófunum.

Lykilmarkmið sýnishorns undirbúnings:

Fjarlæging á truflunum: útrýma efnum sem geta truflað uppgötvun markgreininga.

Styrkur greiniefna: Auka styrk greiningar til að bæta greiningarmörk.

Samhæfni: Undirbúðu sýni á þann hátt sem hægt er að greina þau með LC-MS kerfum á áhrifaríkan hátt.

Viltu vita meira um undirbúning HPLC sýnishorn, vinsamlegast athugaðu þessa grein: HPLC sýnishorn af undirbúningi fyrir besta árangur

Algengar aðferðir í LC-MS sýnisundirbúningi

Nokkrar aðferðir eru almennt notaðar í LC-MS sýnishorni. Hver aðferð hefur sína kosti og er valin út frá sérstökum kröfum greiningarinnar.

1. Fastfasa útdráttur (SPE)

SPE er mikið notað til að einangra greiniefni úr fljótandi sýnum. Þessi tækni felur í sér að koma sýnishorni í gegnum fastan kyrrstæðan áfanga sem heldur vali á markgreiningum en leyfa öðrum íhlutum að fara í gegnum. SPE er sérstaklega árangursríkt fyrir flókna fylki eins og blóð eða þvag og býður upp á nokkra ávinning:

Mikil endurheimtarhlutfall: SPE skilar venjulega hærri endurheimtunarhlutfalli samanborið við útdrátt fljótandi vökva.

Sjálfvirkni samhæfni: Auðvelt er að gera sjálfvirkan aðferð, auka afköst og skilvirkni.

2.. Próteinúrkoma

Próteinúrkoma er einföld en áhrifarík aðferð til að fjarlægja prótein úr lífsýnum. Þessi tækni er sérstaklega mikilvæg þegar greint er frá sýnum með mikið próteininnihald, svo sem plasma eða sermi. Með því að fella prótein út, einfaldar þessi aðferð fylkið og dregur úr truflunum í síðari greiningum.

Fljótur og skilvirkt: Það gerir kleift að fá skjót vinnslu sýna en viðhalda góðu batahlutfalli.

3. Vökva-vökva útdráttur (LLE)

LLE skilur greiniefni út frá leysni þeirra í tveimur ómerkilegum vökva - oftast vatnsfasa og lífrænt leysir. Þessi tækni er gagnleg til að draga úr skautaðri eða miðlungs skautasamböndum úr flóknum vatnsföllum.

Fjölhæf notkun: LLE er hægt að laga fyrir ýmis sýnishorn og gerðir, sem gerir það hentugt fyrir fjölbreytt úrval af forritum.

4. Afleiðu

Afleiðun felur í sér efnafræðilega að breyta greini til að auka greinanleika þeirra í LC-MS greiningu. Þetta ferli bætir eiginleika eins og sveiflur og jónun skilvirkni, sem gerir það sérstaklega gagnlegt fyrir efnasambönd með litla eðlislæga greinanleika.

Aukin næmi: Afleiðun getur aukið næmi og sértækni greiningar verulega fyrir sérstaka efnasambönd eins og amínósýrur eða sterar.

Langar að vita meira um forrit litskiljunar hettuglös, vinsamlegast athugaðu þessa grein: 15 Notkun litskiljunar hettuglös á mismunandi sviðum

Þættir sem hafa áhrif á val á undirbúningi sýnishorns

Að velja viðeigandi undirbúningstækni sýnishorns krefst nokkurra þátta:

Greiningarefnafræði: Að skilja pólun, hleðslu og stöðugleika greiniefna skiptir sköpum.

Sýnishorn og flækjustig: Rúmmálshömlur og flækjustig sýnishornsins geta ráðið hvaða aðferðir eru framkvæmanlegar.

Næmiskröfur: Mismunandi forrit geta haft mismunandi næmisþörf sem hefur áhrif á aðferð við aðferð.

Rannsóknarstofur: Aðgengi að búnaði til sjálfvirkni eða handvirkrar vinnslu getur haft áhrif á val á tækni.

Bestu starfshættir fyrir árangursríka sýnishorn

Til að ná sem bestum árangri í LC-MS greiningu er það nauðsynlegt að fylgja bestu starfsháttum við undirbúning sýnisins:

Stöðlun: Þróa staðlaðar samskiptareglur til að tryggja samræmi milli greininga.

Staðfesting: Staðfesta reglulega aðferðir til að staðfesta áreiðanleika þeirra og nákvæmni.

Lágmarkaðu meðhöndlun sýnisins: Farið úr fjölda meðferðar til að koma í veg fyrir tap eða mengun.

Notaðu gæðahvarfefni: Notaðu hágæða hvarfefni til að forðast að setja óhreinindi í sýni.

Málsmeðferð skjals: Haltu nákvæmar skrár yfir allar verklagsreglur til að auðvelda bilanaleit og hagræðingu aðferðar.

Niðurstaða

Árangursrík undirbúning sýnisins er grundvallaratriði fyrir árangursríka LC-MS greiningu. Með því að skilja ýmsar aðferðir eins og SPE, próteinúrkomu, LLE og afleiður geta sérfræðingar valið viðeigandi aðferð fyrir sérstakar kröfur þeirra. Ennfremur, í kjölfar bestu starfshátta mun bæta gæði gagna og tryggja áreiðanlegar niðurstöður fyrir mismunandi forrit í rannsóknar- og iðnaðarstillingum.

Að lokum, að ná tökum á undirbúningsaðferðum sýnishorns getur ekki aðeins bætt greiningarárangur, heldur einnig lagt veruleg framlag til framfara á sviðum eins og klínískri greiningu, þróun lyfja og umhverfiseftirlit.

Opnaðu leyndarmál réttra litskiljunar hettuglass undirbúnings fyrir nákvæma og áreiðanlega greiningu í aðeins 6 einföldum skrefum.Lestu áfram til að ná tökum á tækninni! 6 skref til að undirbúa litskiljun til greiningar

Fyrri:

LCMS vs GCMS: Hvaða tækni er best fyrir rannsóknir þínar?

Næst:

Hvað er TOC hettuglas og mikilvægi þess í litskiljun?