Hvernig er HPLC frábrugðið GC dálki?

HPLC (hágæða vökvaskiljun) og GC (gasskiljun) eru bæði öflug greiningaraðferðir sem notaðar eru til að aðgreina, bera kennsl á og mæla efnasambönd í fjölmörgum sýnum. Hins vegar eru þau mjög mismunandi hvað varðar notkun, búnað og forrit. Þessi grein gerir grein fyrir lykilmuninum á HPLC og GC dálkum, með áherslu á hönnun þeirra, virkni og hæfi fyrir mismunandi tegundir greiningar.

Dálkahönnun

HPLC dálkar

HPLC dálkar eru venjulega styttri og breiðari en GC dálkar. Þeir eru venjulega allt að 30 cm að lengd og hafa innri þvermál á bilinu 2,1 mm til 8 mm. Pökkunin innan HPLC súlna samanstendur af litlum agnum (venjulega minna en 5 míkron í þvermál) sem veita stórt yfirborð til að hafa samskipti við sýnishorn. Pökkunareiginleikar þessara dálka gera þeim kleift að aðgreina efnasambönd á skilvirkan hátt út frá efnafræðilegum eiginleikum þeirra.

Helstu eiginleikar:

Lengd: allt að 30 cm

Þvermál: Venjulega á milli 2,1 mm og 8 mm

Umbúðaefni: Litlar agnir (t.d. kísil) með ýmsum yfirborðsbreytingum sem henta fyrir mismunandi aðskilnaðaraðferðir (t.d. snúinn fasa, venjulegur fas).

GC dálkar

GC dálkar eru aftur á móti lengri og þrengri, venjulega allt að 100 m að lengd og hafa innri þvermál á bilinu 0,1 mm til 1 mm. Hægt er að skipta þeim í tvær megin gerðir: pakkað dálka og háræðar dálkar. Pakkaðar súlur innihalda fastan kyrrstæðan fasa eða vökva húðaður á föstum stuðningi, en háræðasúlur eru með þunna filmu af kyrrstæðum fasa húðuð á innri vegginn.

Helstu eiginleikar:

Lengd: allt að 100 m

Þvermál: Venjulega á milli 0,1 mm og 1 mm

Tegundir: Pakkað súlur (fastur eða fljótandi kyrrstæður fas) og háræðar dálkar (opinn pípulaga uppbygging).

Farsími

Hágæða vökvaskiljun

Í HPLC er hreyfanlegur fasinn venjulega fljótandi leysir eða blanda af skautuðum eða ekki skautuðum leysum. Algeng leysiefni eru vatn, metanól, asetónítríl og ýmis jafnalausn. Val á farsíma er mikilvægt vegna þess að það hefur áhrif á samspil greiniefnisins og kyrrstigs innan súlunnar.

Gasskiljun

GC notar loftkenndan farsíma, oftast óvirkan gas eins og helíum eða köfnunarefni. Sýnið verður að vera sveiflukennt til að gufa upp þegar það er sett inn í súluna. Þessi krafa þýðir að GC hentar fyrst og fremst til að greina rokgjörn efnasambönd, en HPLC ræður við fjölbreyttari efni, þar með talið óstöðug efnasambönd.

Aðskilnaðarbúnaður

Hágæða vökvaskiljun

HPLC skilur efnasambönd út frá skyldleika þeirra við kyrrstæða áfanga miðað við farsíma. Hægt er að nota ýmsa litskiljun:

Aftur á fasa litskiljun: Óskautandi kyrrstæður áfanga með skauta farsíma.

Venjuleg fasa litskiljun: Polar kyrrstæða fas með ópólaða farsíma.

ION Exchange litskiljun: Aðgreinir hlaðnar tegundir byggðar á samskiptum þeirra við hlaðinn kyrrstæða áfanga.

Útilokun á stærð útilokunar: Aðgreinir sameindir byggðar á stærð.

Gasskiljun

Í gasskiljun er aðskilnað fyrst og fremst náð með mismun á sveiflum og suðumarkum greiningarinnar. Efnasambönd sem gufa upp munu auðveldlega skolast úr súlunni fyrst en minna sveiflukennd efnasambönd munu taka lengri tíma að komast í gegnum. Milliverkanir milli greiniefnisins og kyrrstæðra áfanga geta einnig haft áhrif á varðveislutíma.

Næmi og upplausn

HPLC næmi

HPLC hefur yfirleitt meiri næmi fyrir óstöðug efnasambönd vegna þess að það er hægt að greina lægri styrk sýna án uppgufunar. Með því að nota minni agnastærðir í HPLC dálkum veitir stærra yfirborð fyrir samspil, sem bætir upplausn.

GC næmi

Þar sem gasskiljun er fær um að einbeita greiningum með uppgufun er það fær um að ná mikilli næmi fyrir rokgjörn efnasambönd. Háræðasúlur hafa yfirleitt betri upplausn en pakkaðar dálkar vegna lengri lengdar og minni þvermál.

Forrit HPLC og GC

HPLC forrit

HPLC er notað á fjölmörgum sviðum vegna fjölhæfni þess:

Lyfjagreining: Notað við prófun lyfja og gæðaeftirlit.

Umhverfispróf: Greindu mengunarefni í vatni og jarðvegssýnum.

Prófun á matvælaöryggi: Greina mengunarefni og sannreyna gæði matvæla.

Líftækni: Hreinsaðu prótein og kjarnsýrur.

Gasskiljunarforrit

GC er fyrst og fremst notað til að greina rokgjörn lífræn efnasambönd:

Umhverfisgreining: Að mæla rokgjörn lífræn efnasambönd í loftmengun og vatni.

Réttarvísindi: Að greina efni á glæpasviðum.

Petrochemical Industry: Að einkenna kolvetni í eldsneyti.

Bragð- og ilmgreining: Að bera kennsl á rokgjörn hluti í matvælum.

Í stuttu máli eru HPLC og GC mismunandi litskiljun sem henta fyrir mismunandi tegundir greiningar sem byggjast á dálkhönnun þeirra, farsíma, aðskilnaðarbúnaði, notkun, næmi og upplausnargetu. HPLC er hentugur fyrir óstöðugt eða hitauppstreymi efnasambönd sem þurfa fljótandi farsíma, en GC skar sig fram við að greina rokgjörn efni með loftkenndum farsíma. Að skilja þennan mun gerir vísindamönnum kleift að velja viðeigandi aðferð fyrir sértækar greiningarþarfir sínar og tryggja nákvæmar niðurstöður á ýmsum vísindasviðum.

Veistu muninn á HPLC hettuglösum og GC hettuglösum? Athugaðu þessa grein: Hver er munurinn á HPLC hettuglösum og GC hettuglösum?