Allt sem þú þarft að vita um undirbúning HPLC sýnishorns

Undirbúningur sýnisins er mikilvægt skref í HPLC greiningu af ýmsum ástæðum.

Lágmarkaðu truflanir:Sýnishorn innihalda oft óhreinindi og fylkisíhluti sem geta truflað greiningar á markgreiningum. Árangursríkar undirbúningsaðferðir sýnishorns geta hjálpað til við að fjarlægja þessi óæskileg efni og bæta greiningarnákvæmni.

Bæta bata greiniefnis:Rétt undirbúningur bætir endurheimt greiniefna og tryggir að niðurstöður endurspegli raunverulegan styrk upprunalega sýnisins. Þetta er sérstaklega mikilvægt fyrir snefilgreiningu þar sem greiniefni eru til staðar við lágan styrk.

Auka hámarksform:Rétt útbúin sýni hjálpa til við að mynda samhverf og vel skilgreinda tinda í litskiljuninni. Þetta er mikilvægt fyrir nákvæma magngreiningu. Óviðeigandi sýnishorn getur leitt til hámarks hala og breikkun, sem flækir túlkun gagna.

Verndaðu HPLC kerfið þitt:Mengun í úrtakinu þínu getur skemmt dálka og aðra hluti í HPLC kerfinu þínu, sem leiðir til aukins viðhaldskostnaðar og niður í miðbæ. Rétt sýnishorn af undirbúningi dregur úr hættu á stíflu og slit á kerfinu.

Fyrsta skrefið í undirbúningi sýnisins er að safna sýninu þínu rétt. Þetta felur í sér:

Notaðu hreina ílát:Notaðu alltaf hreina, óvirkan ílát til að forðast mengun. Mælt er með gleri eða hágæða plastílátum.

Forðastu mengun:Notaðu hanska og hreina verkfæri til að koma í veg fyrir mengun frá sebum og öðrum heimildum.

Rétt merking:Ljóst er að merkimiða sýni til að forðast blöndur og tryggja rekjanleika.

Einsleitni sýnishorns tryggir einsleitni, sem er mikilvægt fyrir fjölföldun. Samræmisaðferðir fela í sér:

Vélræn einsleitni: Blanda fast eða hálf-fast sýni með því að nota hrærandi eða einsleitni.

Ultrasonic einsleitni:Notkun ómskoðunar til að dreifa agnum innan fljótandi sýni.

Það fer eftir væntanlegum styrk greininga, sýni geta þurft að þynna eða þétta. Þetta er hægt að ná með:

Þynning:Þynntu sýnið í tilætluðum styrk með sama leysi og farsíma.

Einbeiting:Hægt er að einbeita greiningum með því að nota tækni eins og uppgufun eða útdrátt í föstu fasa (SPE).

Síun er nauðsynleg til að fjarlægja svifryk sem geta stíflað HPLC dálka. Algengar síunaraðferðir fela í sér ：

Síun himna:Nota0,2 im eða 0,45 im síurTil að fjarlægja agnir. Venjulega eru polyethersulfone (PES) eða nylon síur notaðar.

Forsíun:Fyrir sýni með mikið agnainnihald getur forsíun í gegnum stærri svitahola síu komið í veg fyrir stíflu.


50 Algengar spurningar um sprautusíur, vertu viss um að skoða þessa fræðandi grein: Efni „sprautusíu“ 50 Algengar spurningar

Hugleiddu stöðugleika sýnisins til að koma í veg fyrir niðurbrot greiniefnisins.

PH aðlögun:Að stilla pH getur hjálpað til við að koma á stöðugleika ákveðinna greiniefna. Til dæmis geta súr efnasambönd þurft súrnun til að koma í veg fyrir niðurbrot.

Aukefni:Að bæta við sveiflujöfnun eða rotvarnarefni getur hjálpað til við að viðhalda heiðarleika sýnisins við geymslu og greiningu.

Það er mikilvægt að velja réttan leysir til að leysa sýnishornið þitt og tryggja eindrægni við HPLC kerfið þitt. Hugleiddu eftirfarandi:

Leysir pólun:Til að ná fullkominni upplausn verður leysirinn að passa við pólun greiniefnisins.

Samhæfni farsíma: Notaðu leysi sem er samhæfur við farsíma áfanga til að lágmarka hugsanlegar truflanir.

7. Undirbúningur staðla

Undirbúningur kvörðunarstaðla er nauðsynlegur til að mæla greiniefni í sýni. Þetta felur í sér:

Undirbúningur kvörðunarferils:Undirbúðu röð þekktra styrks greiniefnisins til að koma á kvörðunarferli til magngreiningar.

Notaðu sama leysi:Til að viðhalda samræmi skaltu alltaf undirbúa staðla þína með sama leysi og aðstæðum og sýnin þín.

Fylgdu stöðluðum rekstraraðferðum (SOP):Koma á og fylgja SOP til að undirbúa sýnishorn til að tryggja samræmi og fjölföldun.

Notaðu hágæða hvarfefni og leysiefni:Notaðu alltaf leysiefni HPLC-gráðu og hvarfefni í háum hreinum til að lágmarka mengun.

Haltu vinnusvæðinu þínu hreinu:Haltu sýnishornsundirbúningssvæðinu þínu hreinu og skipulögðu til að draga úr hættu á mengun.

Skjalfesta allt:Hafðu ítarlegar skrár um undirbúningsaðferðir þínar, þ.mt öll frávik frá stöðluðum samskiptareglum.

Staðfesta aðferðir:Staðfestu undirbúningsaðferðir sýnisins reglulega til að tryggja að þær gefi áreiðanlegar og endurtakanlegar niðurstöður.

Lélegt hámarksform:Ef tindar eru breiðir eða halar getur þetta bent til ófullkominnar upplausnar eða tilvist agna. Gakktu úr skugga um að sýnishornið þitt sé blandað vandlega og síað.

Draugatoppar:Draugatoppar geta stafað af óhreinindum í leysinum eða sýnishorni, notið hágildis leysir og tryggt að allur glervörur og búnaður séu hreinn.

Lítil næmi:Ef næmi er lítið skaltu íhuga að hámarka útdráttaraðferðina þína eða auka styrk greiningarinnar.

Dálkur stífla:Tíð stífla getur bent til þess að sýnið þitt innihaldi of margar agnir eða sé ekki verið að síast á fullnægjandi hátt. Endurmeta síunarferlið þitt og íhuga forsíun.

Ósamræmdar niðurstöður:Mismunur á niðurstöðum getur stafað af ósamræmi sýnishorns. Staðlað öllum verklagsreglum og tryggðu að starfsfólk sem tekur þátt í undirbúningi sýnisins sé rétt þjálfað.

Eftir því sem greiningarkröfur aukast eru rannsóknarstofur að nota fullkomnari undirbúningstækni til að bæta skilvirkni og nákvæmni:

SPE er víða notuð tækni sem gerir kleift að velja greiningar frá flóknum fylkjum. Það felur í sér að fara með fljótandi sýni í gegnum fast adsorbent efni sem heldur markgreiningunni á meðan það leyfir óhreinindum að fara í gegnum.

LLE er tækni sem skilur greiniefni út frá leysni þeirra í tveimur ómerkilegum vökva. Þessi aðferð er árangursrík til að aðgreina efnasambönd með mismunandi skautun og er oft notuð í umhverfis- og lyfjagreiningu.

Quechers er vinsæl aðferð til að útbúa mat og umhverfissýni sem sameinar útdrátt og hreinsunarþrep í eitt ferli, sem gerir það skilvirkt og hagkvæm.

Afköst og fjölföldun er hægt að bæta verulega með sjálfvirkum undirbúningskerfi sýnisins, sem geta framkvæmt verkefni eins og þynningu, síun og SPE með lágmarks íhlutun manna og dregur þannig úr hættu á villum.


Viltu vita meira um undirbúning HPLC sýnishorn, vinsamlegast athugaðu þessa grein: HPLC sýnishorn af undirbúningi fyrir besta árangur

Undirbúningur HPLC er mikilvægt skref sem getur haft veruleg áhrif á nákvæmni og áreiðanleika greiningarárangurs. Með því að fylgja bestu starfsháttum, nota viðeigandi tækni og taka á algengum vandamálum geta rannsóknarstofur hagrætt undirbúningsferli sýnisins með því að nota háþróaða tækni og tækni þegar greiningarþörf þróast. Sjálfvirkni mun bæta skilvirkni og skilvirkni HPLC greininga. Rétt sýnishornsundirbúningur bætir ekki aðeins gæði niðurstaðna, heldur verndar einnig HPLC kerfið, sem tryggir langtíma áreiðanleika og afköst.