Að velja réttan stuðpúða fyrir HPLC farsíma þinn er mikilvægt til að ná hámarks aðskilnaði og greiningu á þínum sýni. Buffarar hjálpa til við að viðhalda stöðugu sýrustigi, sem er nauðsynlegt til að stjórna jónunarástandi greindanna þinna og hafa þannig áhrif á varðveislutíma þeirra og hámarksform. Hér að neðan er ítarlegt yfirlit yfir hvernig á að velja besta biðminni fyrir HPLC forritið þitt.

Veistu um undirbúning HPLC sýnisins? Smelltu á þessa grein til að læra meira: „Allt sem þú þarft að vita um undirbúning HPLC sýnisins“

Mikilvægi val á biðminni

Buffer er lausn þar sem pH breytist ekki eftir að hafa bætt við litlu magni af sýru eða basa. Byggt á samsetningu þeirra er hægt að flokka stuðpúða sem annað hvort súrt eða grunn. Árangur stuðpúða ræðst af PKA þess, sem helst ætti að vera innan ± 1 pH einingar frá æskilegu farsíma pH fyrir ákjósanlegasta jafnvægisgetu.

Lykilþættir sem þarf að huga að

1.PH svið: Sýrustig farsímafasans ætti að vera að minnsta kosti 2 pH einingar frá PKA greiniefnisins. Þetta hjálpar til við að bæla jónun á súrum eða grunngreiningum og hámarka varðveislu þeirra á súlunni. Til dæmis, ef greiniefnið er veik sýra með PKA 4,5, myndi nota farsíma með pH í kringum 2,0 að halda því í ójónuðu ástandi og auka varðveislu.

2. Tegund Buffer: Algengir stuðpúðar sem notaðir eru í HPLC eru:

Fosfatjafnalausir: Árangursrík á pH sviðinu 2,0 til 8,0, fosfatjafnalausir eru mikið notaðir vegna stöðugleika þeirra og eindrægni við margar greiningar. Þau eru sérstaklega hentug fyrir LC-UV forrit.

Acetate stuðpúðar: Þetta eru einnig vinsælar fyrir LC-UV próf og hægt er að nota þær í svipuðum pH sviðum og fosfatjafnalausir.

Rokgjörn stuðpúðar: Fyrir LC-MS forrit eru rokgjörn jafnalausn eins og format, asetat og ammoníum bíkarbónat valið vegna þess að auðvelt er að fjarlægja þau meðan á massagreiningarferlinu stendur.

3. Buffer styrkur: Dæmigerður upphafsstyrkur fyrir stuðpúða í HPLC er á bilinu 25-50 mM. Hærri styrkur getur bætt hámarksform og skilvirkni en getur einnig leitt til úrkomu þegar blandað er saman við lífræn leysiefni. Það er ráðlegt að halda stuðpúðaþéttni undir 25 mm til að forðast fylgikvilla.

4. Kefnafræðilegur hreinleiki: Notaðu alltaf hágildan litskiljunargráðu stuðpúða til að koma í veg fyrir mengun og tryggja áreiðanlegar niðurstöður. Óhreinindi geta leitt til óvæntra samskipta og breytileika á varðveislutímum.

Hitastigáhrif: Hitastigið getur haft áhrif á sýrustig jafnalausna. Það er mikilvægt að undirbúa og geyma stuðpúða við stöðugt hitastig til að viðhalda virkni þeirra.

Langar að vita 50 svör um hettuglös HPLC, vinsamlegast athugaðu þessa grein: 50 Algengustu spurningarnar um hettuglös HPLC

Hagnýt ráð til að undirbúa biðminni

Undirbúningsaðferð: Hægt er að útbúa stuðpúða með því að blanda jafnmiklum magni af súrum og grunnþáttum þeirra eða með því að títrun grunnlausn með sýru. Forðastu að stilla sýrustigið eftir að lífrænum leysum er bætt við, þar sem það getur leitt til ósamræmra niðurstaðna.

Ferskar lausnir: Undirbúðu ferskar stuðpúða lausnir reglulega til að lágmarka örveruvöxt og niðurbrot íhluta, sem geta haft áhrif á litskiljun.

Forðast tæringu: Ákveðnar stuðpúðar, svo sem sítrat, geta tært ryðfríu stáli íhluta HPLC kerfa. Tryggja ítarlega skolun á kerfinu eftir að hafa notað slíka stuðpúða til að koma í veg fyrir skemmdir.

Niðurstaða

Það er mikilvægt að velja réttan biðminni fyrir HPLC farsíma þinn til að ná áreiðanlegum og endurtakanlegum árangri. Hugleiddu pH, gerð jafnalausn, einbeitingu og hreinleika þegar þú velur. Með því að fylgja þessum leiðbeiningum geturðu hagrætt HPLC aðferðinni þinni til að aðgreina og greina sýnin þín á áhrifaríkan hátt.

Langar að vita verð á hettuglösum HPLC, vinsamlegast athugaðu þessa grein: HPLC hettuglös Verð: 50 Algengustu spurningarnar

Fyrri:

Hvernig á að nota þorskprófunarrör almennilega til prófunar á vatnsgæðum?

Næst:

Hvernig á að forðast síu bylting í sprautusíum