HPLC vs. LCMS: Hver ættir þú að velja? 5 stig

Meginregla um rekstur

HPLC

HPLC er litskiljun sem skilur efnasambönd byggð á samskiptum þeirra við kyrrstæða og farsíma. Í HPLC er fljótandi hreyfanlegur fasi dælt í gegnum súlu fyllt með kyrrstæðum fasa, sem samanstendur venjulega af litlum agnum af kísil eða fjölliðum. Þegar sýniblanda er sett inn í kerfið eru íhlutirnir aðskildir út frá skyldleika þeirra í kyrrstæðan áfanga. Efnasambönd sem hafa samskipti sterkari við kyrrstæðan fasa skolar hægar, meðan efnasambönd sem hafa samskipti minna af skolum hraðar. Aðskildu efnasamböndin eru síðan greind með því að nota ýmsa skynjara, svo sem UV-VIS, flúrljómun eða ljósbrotsvísitölu.

Langar að vita meira um forrit litskiljunar hettuglös, vinsamlegast athugaðu þessa grein:15 Notkun litskiljunar hettuglös á mismunandi sviðum

LCM

LCMS sameinar aðskilnaðarmöguleika HPLC við massagreiningargetu massagreiningar. Í LCM eru sýni fyrst aðskilin með HPLC, rétt eins og í hefðbundnum HPLC. Í stað þess að greina af hefðbundnum skynjari í stað þess að vera greindur af hefðbundnum skynjara, eru skoluðu efnasamböndin sett inn í massagreining. Massagreiningin jónar efnasamböndunum og mælir massa-til-hleðsluhlutfall þeirra, sem gefur ítarlegar upplýsingar um mólmassa og uppbyggingu greiniefnisins. Þessi samsetning aðskilnaðar og massagreiningar veitir meiri næmi og sértækni en HPLC eitt og sér.

Aðskilnaðarbúnaður

HPLC:HPLC notar háan þrýsting til að ýta fljótandi farsíma í gegnum pakkaðan dálk sem inniheldur kyrrstæðan áfanga. Efnasambönd eru aðskilin út frá mismunadrifum samskiptum þeirra við kyrrstæða áfanga, sem leiðir til nákvæmra og skilvirkra aðskilnaðar.

LCM:LCMS sameinar líkamlega aðskilnað getu HPLC og massagreiningargetu massagreiningar (MS). Vökvaskiljunarhlutinn skilur efnasamböndin en massagreiningin mælir massa-til-hleðsluhlutfall jónuðu tegunda.

Næmi og sértækni

HPLC:HPLC hefur góða næmi og sértækni, sérstaklega þegar það er sameinað háþróuðum skynjara eins og UV-Vis, flúrljómun eða díóða fylkisskynjara. Hins vegar gæti HPLC eitt og sér ekki veitt fullnægjandi sérstöðu fyrir flókin sýni.

LCM:LCMS hefur yfirburða næmi og sértækni miðað við HPLC. Massagreiningar geta greint og magnað efnasambönd nákvæmlega út frá einstökum massa-til-hleðsluhlutföllum þeirra, jafnvel í flóknum fylkjum. Þetta gerir LCM sérstaklega gagnlegt til að greina snefilefnasambönd og staðfesta hver óþekkt efni.

HPLC:Undirbúningur sýnishorns fyrir HPLC felur venjulega í sér þynningu, síun eða einfalda útdráttartækni. Ekki þarf að gufa upp sýni, þannig að HPLC hentar fyrir breitt svið efnasambanda, þar með talið skautað og óstöðug efni.

LCM:Undirbúningur sýnisins fyrir LCM er svipaður og fyrir HPLC, en viðbótarskref geta verið nauðsynleg til að tryggja eindrægni við massagreininguna. Sem dæmi má nefna að sveiflukennd stuðpúðar eða aukefni geta verið nauðsynleg til að auka jónun og koma í veg fyrir jónbælingu.

Forrit

HPLC:HPLC er mikið notað til greiningar á lyfjum, matvælum og umhverfissýnum. Það er sérstaklega áhrifaríkt til að aðgreina og mæla efnasambönd í flóknum blöndu, svo sem lyfjahöggum, aukefnum í matvælum og skordýraeiturleifum.

LCM:LCMS hefur mikið úrval af forritum, þar á meðal:

Lyfjagreining: Notað við uppgötvun lyfja, þróun og gæðaeftirlit.

Proteomics og umbrotsefni: Notað til að bera kennsl á og mæla prótein og umbrotsefni í líffræðilegum sýnum.

Umhverfisgreining: Notað til að greina snefil mengunarefni í vatni, jarðvegi og loftsýni.

Forvitinn um hlutverk löggiltra HPLC hettuglös til að tryggja nákvæma sýnishornagreiningu? Lestu þessa grein: Mikilvægi löggiltra hettuglöss fyrir nákvæma greiningar á sýnishorni

Niðurstaða

HPLC og LCM eru bæði öflug greiningaraðferðir með eigin styrkleika og takmarkanir. Valið á milli þessara tveggja fer eftir sérstökum kröfum greiningarinnar, svo sem næmi, sértækni, flækjustig sýnisins og tiltækra auðlinda.

HPLC er góður kostur fyrir venjubundna greiningu á þekktum efnasamböndum í tiltölulega einföldum fylkjum, þar sem kostnaður og auðveldur notkun eru mikilvægir þættir. LCMS er aftur á móti ákjósanlegasta aðferðin til að greina flókin sýni, bera kennsl á óþekkt efnasambönd og ná fram öflugri mælingu á völdum.

Þegar tæknin heldur áfram að komast áfram mun samþætting HPLC og LCMs gegna sífellt mikilvægara hlutverki við að mæta þróandi þörfum greiningarefnafræði og tryggja hágæða niðurstöður í ýmsum forritum.