Решения для приготовления образца ВЭЖХ для достижения наилучших результатов
Новости
категории
Запрос

Решения для приготовления образца ВЭЖХ для достижения наилучших результатов

26 июля, 2022
ВЭЖХ является одним из наиболее распространенных аналитических методов. Его основная цель: предоставить воспроизводимые и конкретные результаты. Образец должен быть оптимально подготовлен для того, чтобы ввести его непосредственно в столбец ВЭЖХ.
Чтобы сделать это, ваш образец не только должен растворить в соответствующем растворителе. Еще более важно, что также должно быть свободным от частиц, чтобы исключить помехи наилучшим образом во время обнаружения и предотвратить блокировку вашего столбца. Эта трудоемкая подготовка к образцу часто является утомительной рутинной работой, которая занимает много времени.

Раствор подготовки образца ВЭЖХ

Подготовка образца является неотъемлемой частью хроматографического и спектроскопического анализа. Процесс предназначен для предоставления репрезентативного, воспроизводимого и однородного раствора, которое подходит для инъекции в колонку для хроматографического анализа, в ICP-MS \ / Источник атомной адсорбции или в трубку кюветы или ЯМР для дальнейшей характеристики. Целью подготовки образца является предоставление аликвоты образца, которая (а) относительно свободна от помех, (b) не повредит столбец или прибор и (c) совместим с предполагаемым аналитическим методом.

По сравнению с оптимизированной выборкой и не оптимизированным

Неоптимизированная выборка

Хроматограмма с выраженным фоновым шумом и пиковым хвостом
Раствор подготовки образца ВЭЖХ

В анализе ВЭЖХ могут возникнуть проблемы, возникающие в результате подготовки образца.
1. Возможная блокировка столбца ВЭЖХ
2. Более низкая чувствительность вашего столбца ВЭЖХ
3. Пик хвоста
4. Больше ложноположительных пиков
5. Более высокий фоновый шум
6. Leachables

Оптимизированный образец подготовка

Хроматограмма со стабильной базовой и симметричной пиками

Раствор подготовки образца ВЭЖХ

Использование продуктов Sartorius для подготовки образцов для ВЭЖХ предотвращает возникновение обычных проблем и допускает более высокую аналитическую точность.
1. НЕТ блокировки столбца ВЭЖХ
2. Более высокая чувствительность вашего столбца ВЭЖХ
3. Более высокая точность
4. меньше ложноположительных пиков
5. меньше фонового шума
6. Не выщелачивается

Четыре шага для приготовления образца ВЭЖХ

Давайте убедить вас, как вы можете сэкономить время с нашими решениями и в то же время увеличить воспроизводимость ваших результатов:

Шаг 1. Анализ водных решений

Плохое качество воды является одним из крупнейших факторов, способствующих проблемам во время прогонов ВЭЖХ. Примеси воды в подвижной фазе могут взаимодействовать с колонкой и привести к плохому разрешению и чувствительности или неожиданным пикам на хроматограмме, обычно называемых пиками -призраками. Использование ультрапирной воды существенно снижает риск загрязнения органическими углеродами, микроорганизмом, эндотоксинами, РНКазами и ДНКазами. Ультрапирная вода доступна для покупки, однако, используя систему очистки воды в вашей лаборатории, является самым простым способом обеспечения высококачественной ультрапирной воды. Вода реагента типа 1, которая соответствует стандартам ASTM, NCCLS, ISO и USP, является лучшим выбором для применений ВЭЖХ.

Шаг 2. Подготовка стандартов

Подготовка стандартов для идентификации соединений и количественной оценки может быть утомительным и трудоемким процессом. Точное взвешивание твердого вещества, так что можно использовать предопределенный объем растворителя, сложно, и отходы из -за ошибки могут быть дорогостоящими, особенно при работе с фармацевтическими препаратами. Другие факторы, такие как температура, еще больше усложняют стандартную подготовку. Флуктуации температуры изменяют плотность растворителя и способствуют драматическим различиям в концентрации.

Раствор подготовки образца ВЭЖХ

Использование баланса, которое обеспечивает точность взвешивания до нескольких десятичных знаков и автоматизация процесса, связывая баланс с дозатором растворителя, гарантирует самую высокую точность. Использование программного обеспечения, такого как дозирование Q-APP YAPP16, позволяет автоматическим расчетам и гравиметрическому мониторингу измеренных значений. Документирование температуры и плотности растворителя также обеспечивает высокие точные концентрации, особенно при приготовлении стандартов в последующие дни. Прямая передача данных из приложения взвешивания YAPP16 в программное обеспечение Thermo Scientific ™ Chromeleon ™ 7.2 Хроматография (CDS) - это опция для безбумажной обработки данных с полной целостностью данных.

Шаг 3. Вернитесь к основам с хорошей пипетией

Важность точного и точного пипетирования слишком часто упускается из виду и воспринимается как должное. Уровень и опыт пользователя могут иметь значительные последствия для чувствительных анализов, таких как ВЭЖХ. Выбор правильной пипетки может уменьшить человеческую ошибку и связанные с ними затраты на потраченные впустую растворители.

Раствор подготовки образца ВЭЖХ

Механические пипетки с объемной блокировкой предлагают простое решение для предотвращения случайных изменений объема, в то время как более сложные электронные пипетки устраняют изменчивость пользователей, чтобы последовательно доставлять точные объемы. Кончик пипетки также является важной детализацией для анализа ВЭЖХ. Низкие советы по удержанию лучше всего подходят при работе с растворителями различной вязкости, поскольку они максимизируют восстановление выборки. Загрязнение образца также может происходить в результате выщелачивания с наконечника пипетки. Таким образом, кончики с высокой химической устойчивостью сохраняют целостность образца.

Шаг 4. Фильтр для точности и долголетия

Занятие дополнительной помощи для фильтрации образцов до анализа повышает надежность и может продлить срок службы колонки ВЭЖХ, предотвращая эффекты засорения. Сипризкие фильтры - это простое, быстрое решение для фильтрации образцов перед колонной хроматографии. Как и в случае с кончиками пипетки, растворители, используемые в ВЭЖХ, требуют конкретных фильтров для предотвращения выщелачивания и загрязнения образца.

Раствор подготовки образца ВЭЖХ

Целлюлозные мембраны устойчивы к диметилсульфоксиду (ДМСО), амидам, кетонам, сложным и эфирным соединениям. Для особенно суровых растворителей мембраны без покрытия полиэфирсульфоновой (PTFO) предотвращают выщелачивание и загрязнение образца. Образец фильтрации становится очень трудоемкой, когда число выборки увеличивается. Многоэлементные фильтрационные единицы, такие как система фильтрации Claristep®, могут обрабатывать образцы без шприцев и быстрого приготовления образцов без пожертвования качества.

Пять проблем, которые вам нужно обратить внимание на!

1. Какие самые большие проблемы с подготовкой образца сталкиваются с лабораториями?

Лаборатории находятся под растущим давлением с точки зрения времени и затрат, часто имея дело не только с большим количеством образцов, но и образцами различной природы. Подготовка образца - это область, где тонкие различия между типами выборки или методами подготовки образца и используемыми материалами могут повлиять на полученные результаты. Обеспечение совместимости между материалами в устройстве фильтрации и растворителем может минимизировать проблемы; Например, уровни экстрагируемых соединений, которые могут мешать обнаружению аналита.

Раствор подготовки образца ВЭЖХ

2. Что происходит, когда образец приготовлен не так?

Перед аналитическим применением высокопроизводительной жидкой хроматографии (ВЭЖХ) образцы готовятся различными методами, все из которых могут влиять на аналитические результаты, затрагивая образец, введенный в систему. Неэффективная подготовка образцов может привести к снижению срока службы столбцов, увеличению требований к обслуживанию для компонентов, потенциальному времени простоя инструментации, снижению эффективности и воспроизводимости хроматографического разделения, а также многим другим проблемам.

3. На первый взгляд, фильтрация кажется простым процессом ...

Хотя фильтрация является, казалось бы, небольшой частью большого рабочего процесса, влияние выбора правильного фильтра для данного приложения может быть существенным. Например, методы, которые не удаляют достаточное количество твердых частиц, могут привести к блокировке колонны. Неуместный выбор устройств подготовки образцов может при определенных обстоятельствах, высвобождать экстрагируемые соединения в выборку, привязывать аналиты, представляющие интерес или вводить ошибки посредством потери выборки - все это влияет на качество и воспроизводимость наблюдаемых результатов. Если вы уверены в том, что ваши расходные материалы для фильтрации не способствуют ошибкам, которые требуют переработки или расследований основных причин, вы сэкономите деньги и дадите себе душевное спокойствие.

Раствор подготовки образца ВЭЖХ

4. Какова наиболее распространенная образец Prep «не удается»?

Неправильный выбор мембраны фильтра - одна из проблем, которую мы часто видим. Проблемы могут показаться посторонними пиками из экстрагируемых, которые могут мешать обнаружению интересующих аналитов. Несовместимость фильтрованной среды с образцом или растворителем с точки зрения химической устойчивости не ограничивается исключительно воздействием растворения на фильтровательную среду. Растворители могут вызвать небольшой отеки материалов полимерных мембран, когда они не совместимы, что, в свою очередь, может повлиять на производительность фильтрации, что приводит к неэффективной очистке образцов. Один из способов решения этой проблемы - выбор мембраны, которая широко совместима как с водными, так и с органическими растворителями. Для типичной подготовки образца ВЭЖХ, шприц и бесконечные фильтры, содержащие регенерированные целлюлозные мембраны, являются хорошим вариантом из -за их широкой совместимости растворителя.

Использование фильтрационного устройства, которое больше, чем необходимо для подготовленного объема, является еще одной распространенной ловушкой. Использование слишком большого фильтрационного устройства означает, что небольшие количества образца останутся в фильтре, даже после того, как будут приняты меры предосторожности, чтобы выгнать как можно больше.

Раствор подготовки образца ВЭЖХ

5. Каковы преимущества серьезного восприятия шага фильтрации?

Основной целью большинства лабораторий, участвующих в аналитическом тестировании, является разработка последовательных процессов, которые лежат в основе постоянных результатов, и которые требуют последовательной фильтрации. Выбор фильтрационного устройства с правильным размером пор и характеристиками удержания помогает обеспечить эффективное удаление частиц, в то время как выбор соответствующего размера и конструкции блока фильтра может помочь минимизировать потерю выборки. Хорошая фильтрация также помогает защитить колонку и потенциально расширяет срок службы как инжектора, так и колонны.

Заключение

ВЭЖХ является ценным методом для науки о жизни и биофармацевтических исследованиях, поскольку он обеспечивает точные, воспроизводимые результаты. Эта точность зависит от целостности образца ВЭЖХ и лучшего способа обеспечения высококачественных образцов-начать с лучших инструментов. С решениями для ультрапирной воды, стандартной подготовки, пипетков, кончиков и фильтров, линия приготовления образцов ВЭЖХ учитывает каждую деталь. Автоматизированные решения и программное обеспечение также помогают оптимизировать подготовку образцов для получения чистых образцов для чистых результатов.

Более подробные дискуссии о растворах для приготовления образцов ВЭЖХ приветствуются!


Расследование