Chagua buffer inayofaa kwa awamu yako ya rununu ya HPLC ni muhimu kufikia utenganisho mzuri na uchambuzi wa yako sampuli. Buffers husaidia kudumisha pH thabiti, ambayo ni muhimu kwa kudhibiti hali ya ionization ya uchambuzi wako, na hivyo kuathiri wakati wao wa kutunza na sura ya kilele. Chini ni muhtasari wa kina wa jinsi ya kuchagua buffer bora kwa programu yako ya HPLC.

Je! Unajua juu ya utayarishaji wa mfano wa HPLC? Bonyeza nakala hii ili ujifunze zaidi: "Kila kitu unahitaji kujua kuhusu maandalizi ya mfano wa HPLC"

Umuhimu wa uteuzi wa buffer

Buffer ni suluhisho ambalo pH haibadilika baada ya kuongeza kiwango kidogo cha asidi au msingi. Kulingana na muundo wao, buffers zinaweza kuainishwa kama asidi au ya msingi. Ufanisi wa buffer imedhamiriwa na PKA yake, ambayo kwa kweli inapaswa kuwa ndani ya ± 1 pH ya pH ya pH ya awamu ya simu inayotaka kwa uwezo mzuri wa buffering.

Sababu muhimu za kuzingatia

1.ph anuwai: pH ya awamu ya rununu inapaswa kuwa angalau vitengo 2 vya pH mbali na PKA ya mchambuzi. Hii husaidia kukandamiza ionization ya uchambuzi wa asidi au ya msingi, kuongeza utunzaji wao kwenye safu. Kwa mfano, ikiwa mchambuzi ni asidi dhaifu na PKA ya 4.5, kwa kutumia awamu ya rununu na pH karibu 2.0 ingeiweka katika hali isiyo ya ionized, kuongeza uhifadhi.

Aina ya 2.Buffer: Buffers za kawaida zinazotumiwa katika HPLC ni pamoja na:

Buffers ya Phosphate: Ufanisi katika safu ya pH ya 2.0 hadi 8.0, buffers ya phosphate hutumiwa sana kwa sababu ya utulivu wao na utangamano na uchambuzi mwingi. Zinafaa sana kwa programu za LC-UV.

Buffers ya Acetate: Hizi pia ni maarufu kwa uelekezaji wa LC-UV na zinaweza kutumika katika safu sawa za pH kama buffers ya phosphate.

Buffers tete: Kwa matumizi ya LC-MS, buffers tete kama fomu, acetate, na bicarbonate ya amonia hupendelea kwa sababu zinaweza kuondolewa kwa urahisi wakati wa mchakato wa taswira ya watu wengi.

3.Buffer mkusanyiko: Mkusanyiko wa kawaida wa kuanzia kwa buffers katika HPLC ni kati ya 25-50 mM. Viwango vya juu vinaweza kuboresha sura ya kilele na ufanisi lakini pia inaweza kusababisha mvua wakati inachanganywa na vimumunyisho vya kikaboni. Inashauriwa kuweka mkusanyiko wa buffer chini ya 25 mM ili kuzuia shida.

Usafi wa 4.Chemical: Daima tumia buffers ya kiwango cha juu cha chromatographic-daraja kuzuia uchafu na kuhakikisha matokeo ya kuaminika. Uchafu unaweza kusababisha mwingiliano usiotarajiwa na kutofautisha katika nyakati za kutunza.

Athari za joto: Joto linaweza kushawishi pH ya suluhisho la buffer. Ni muhimu kuandaa na kuhifadhi buffers kwa joto thabiti ili kudumisha ufanisi wao.

Unataka kujua majibu 50 juu ya viini vya HPLC, tafadhali angalia nakala hii: 50 Maswali yanayoulizwa mara kwa mara kwenye viini vya HPLC

Vidokezo vya vitendo vya maandalizi ya buffer

Njia ya maandalizi: Buffers inaweza kutayarishwa kwa kuchanganya viwango vya usawa vya vifaa vyao vya asidi na msingi au kwa kuweka suluhisho la msingi na asidi. Epuka kurekebisha pH baada ya kuongeza vimumunyisho vya kikaboni, kwani hii inaweza kusababisha matokeo yasiyolingana.

Suluhisho safi: Andaa suluhisho mpya za buffer mara kwa mara ili kupunguza ukuaji wa microbial na uharibifu wa vifaa, ambavyo vinaweza kuathiri utendaji wa chromatographic.

Kuepuka kutu: Buffers fulani, kama vile citrate, inaweza kurekebisha vifaa vya chuma vya mifumo ya HPLC. Hakikisha kufurika kabisa kwa mfumo baada ya kutumia buffers kama hizo kuzuia uharibifu.

Hitimisho

Chagua buffer inayofaa kwa awamu yako ya simu ya HPLC ni muhimu kufikia matokeo ya kuaminika na ya kuzaa. Fikiria pH, aina ya buffer, mkusanyiko, na usafi wakati wa kuchagua. Kwa kufuata miongozo hii, unaweza kuongeza njia yako ya HPLC ili kutenganisha na kuchambua sampuli zako.

Unataka kujua bei ya viini vya HPLC, tafadhali angalia nakala hii: Bei ya HPLC: 50 maswali yanayoulizwa mara kwa mara

Zamani:

Jinsi ya kutumia vizuri zilizopo za mtihani wa COD kwa upimaji wa ubora wa maji?

Ifuatayo:

Jinsi ya kuzuia kufanikiwa kwa vichungi katika vichungi vya sindano