HPLC dhidi ya LCMS: Unapaswa kuchagua ipi? Pointi 5

Kanuni ya operesheni

HPLC

HPLC ni mbinu ya chromatographic ambayo hutenganisha misombo kulingana na mwingiliano wao na awamu za stationary na za rununu. Katika HPLC, sehemu ya simu ya kioevu hupigwa kupitia safu iliyojazwa na sehemu ya stationary, ambayo kawaida huundwa na chembe ndogo za silika au polima. Wakati mchanganyiko wa sampuli unapoanzishwa kwenye mfumo, vifaa vinatengwa kulingana na ushirika wao kwa awamu ya stationary. Viwanja ambavyo vinaingiliana kwa nguvu zaidi na awamu ya stationary polepole zaidi, wakati misombo ambayo huingiliana kidogo haraka haraka. Misombo iliyotengwa hugunduliwa kwa kutumia aina ya vifaa vya kugundua, kama vile UV-vis, fluorescence, au upelelezi wa index ya kuakisi.

Unataka kujua zaidi juu ya matumizi ya viini vya chromatografia, tafadhali angalia nakala hii:Maombi 15 ya viini vya chromatografia katika nyanja tofauti

LCMS

LCMS inachanganya uwezo wa kujitenga wa HPLC na uwezo wa uchambuzi wa wingi wa taswira ya molekuli. Katika LCMS, sampuli hutengwa kwanza kwa kutumia HPLC, kama tu katika HPLC ya kawaida. Walakini, badala ya kugunduliwa na kichungi cha kawaida, misombo iliyoangaziwa huletwa ndani ya picha ya watu wengi. Spectrometer ya molekuli hutengeneza misombo na hupima uwiano wao wa malipo, kutoa habari ya kina juu ya uzito wa Masi na muundo wa mchambuzi. Mchanganyiko huu wa utenganisho na taswira ya molekuli hutoa unyeti mkubwa na maalum kuliko HPLC pekee.

Utaratibu wa kujitenga

HPLC:HPLC hutumia shinikizo kubwa kushinikiza sehemu ya simu ya kioevu kupitia safu iliyojaa iliyo na sehemu ya stationary. Misombo hutengwa kulingana na mwingiliano wao wa kutofautisha na awamu ya stationary, na kusababisha utengano sahihi na mzuri.

LCMS:LCMS inachanganya uwezo wa kujitenga wa mwili wa HPLC na uwezo wa kuona wa molekuli ya watu wengi (MS). Sehemu ya chromatografia ya kioevu hutenganisha misombo, wakati skirini ya watu wengi hupima uwiano wa malipo ya spishi ya ionized.

Usikivu na uteuzi

HPLC:HPLC ina unyeti mzuri na uteuzi, haswa ikiwa imejumuishwa na upelelezi wa hali ya juu kama vile UV-vis, fluorescence, au vifaa vya diode safu. Walakini, HPLC pekee haiwezi kutoa maalum ya kutosha kwa sampuli ngumu.

LCMS:LCMS ina unyeti bora na uteuzi ikilinganishwa na HPLC. Vipimo vya misa inaweza kutambua kwa usahihi na kumaliza misombo kulingana na uwiano wao wa kipekee wa malipo, hata katika matawi tata. Hii inafanya LCMs kuwa muhimu sana kwa kuchambua misombo ya kuwaeleza na kudhibitisha utambulisho wa vitu visivyojulikana.

HPLC:Maandalizi ya mfano kwa HPLC kawaida hujumuisha dilution, kuchuja, au mbinu rahisi za uchimbaji. Sampuli hazihitaji kuyeyushwa, kwa hivyo HPLC inafaa kwa anuwai ya misombo, pamoja na vitu vya polar na visivyo vya kawaida.

LCMS:Utayarishaji wa mfano kwa LCMS ni sawa na ile kwa HPLC, lakini hatua za ziada zinaweza kuhitajika ili kuhakikisha utangamano na spectrometer ya misa. Kwa mfano, buffers tete au viongezeo vinaweza kuhitajika ili kuongeza ionization na kuzuia kukandamiza ion.

Maombi

HPLC:HPLC hutumiwa sana kwa uchambuzi wa dawa, vyakula, na sampuli za mazingira. Ni bora sana kwa kutenganisha na kukagua misombo katika mchanganyiko tata, kama vile uchafu wa dawa, viongezeo vya chakula, na mabaki ya wadudu.

LCMS:LCMS ina anuwai ya matumizi, pamoja na:

Uchambuzi wa dawa: Inatumika katika ugunduzi wa dawa, maendeleo, na udhibiti wa ubora.

Proteomics na Metabolomics: Inatumika kutambua na kumaliza protini na metabolites katika sampuli za kibaolojia.

Uchambuzi wa Mazingira: Inatumika kugundua uchafu katika maji, mchanga, na sampuli za hewa.

Unavutiwa na jukumu la viini vya HPLC vilivyothibitishwa katika kuhakikisha uchambuzi sahihi wa sampuli? Soma nakala hii: Umuhimu wa viini vilivyothibitishwa vya HPLC kwa uchambuzi sahihi wa sampuli

Hitimisho

HPLC na LCMs zote ni mbinu zenye nguvu za uchambuzi na nguvu zao wenyewe na mapungufu. Chaguo kati ya hizi mbili inategemea mahitaji maalum ya uchambuzi, kama vile usikivu, uteuzi, ugumu wa mfano, na rasilimali zinazopatikana.

HPLC ni chaguo nzuri kwa uchambuzi wa kawaida wa misombo inayojulikana katika matawi rahisi, ambapo gharama na urahisi wa matumizi ni mambo muhimu. LCMS, kwa upande mwingine, ni mbinu inayopendelea ya kuchambua sampuli ngumu, kubaini misombo isiyojulikana, na kufikia ugunduzi wa kiwango cha Ultra-Trace.

Teknolojia inapoendelea kuendeleza, ujumuishaji wa HPLC na LCMS utachukua jukumu muhimu zaidi katika kukidhi mahitaji ya kubadilika ya kemia ya uchambuzi na kuhakikisha matokeo ya hali ya juu katika matumizi anuwai.