Minden, amit tudnod kell a HPLC minta előkészítéséről

A minta előkészítése számos okból kritikus lépés a HPLC elemzésben.

Minimalizálja az interferenciákat:A minták gyakran tartalmaznak szennyeződéseket és mátrixkomponenseket, amelyek zavarhatják a cél analitok kimutatását. A hatékony minta előkészítési technikák elősegíthetik ezeket a nem kívánt anyagokat és javíthatják az analitikai pontosságot.

Javítsa az analit helyreállítását:A megfelelő előkészítés javítja az analit visszanyerését, és biztosítja, hogy az eredmények tükrözzék az eredeti minta tényleges koncentrációját. Ez különösen fontos a nyomelemzésnél, ahol az analitok alacsony koncentrációban vannak jelen.

Fokozott csúcsforma:A megfelelően elkészített minták elősegítik a szimmetrikus és jól definiált csúcsokat a kromatogramban. Ez elengedhetetlen a pontos mennyiségi meghatározáshoz. A nem megfelelő minta előkészítése csúcsfarkas és kibővítést eredményezhet, ami bonyolítja az adatok értelmezését.

Védje a HPLC rendszerét:A mintában lévő szennyező anyagok károsíthatják az oszlopokat és más alkatrészeket a HPLC rendszerben, ami megnövekedett karbantartási költségeket és leállást eredményez. A megfelelő minta előkészítése csökkenti a rendszer eltömődésének és kopásának kockázatát.

A minta előkészítésének első lépése a minta helyének megfelelő gyűjtése. Ez magában foglalja:

Használjon tiszta tartályokat:Mindig használjon tiszta, inert tartályokat a szennyeződés elkerülése érdekében. Üveg vagy kiváló minőségű műanyag tartályok ajánlottak.

Kerülje a szennyeződést:Használjon kesztyűt és tiszta szerszámokat a faggyú és más források szennyeződésének megakadályozására.

Megfelelő címkézés:Világosan jelölje meg a mintákat a keverés elkerülése és a nyomon követhetőség biztosítása érdekében.

A minta homogenizációja biztosítja a homogenitást, ami fontos a reprodukálható eredményekhez. A homogenizációs technikák a következők:

Mechanikus homogenizáció: A szilárd vagy félszilárd minták keverése keverővel vagy homogenizátorral.

Ultrahangos homogenizáció:Az ultrahang alkalmazása a részecskék eloszlatására egy folyékony mintában.

Az analitok várható koncentrációjától függően a mintákat hígítani vagy koncentrálni kell. Ezt el lehet érni:

Hígítás:Hígítsa meg a mintát a kívánt koncentrációhoz, ugyanolyan oldószerrel, mint a mobil fázis.

Koncentráció:Az analitokat olyan technikákkal lehet koncentrálni, mint például a párolgás vagy a szilárd fázis -extrahálás (SPE).

A szűrés elengedhetetlen a HPLC oszlopok eltömődését elzáródó részecskék eltávolításához. A szokásos szűrési módszerek között szerepel ：

Membránszűrés:Használat0,2 um vagy 0,45 um szűrőkA részecskék eltávolításához. Általában polieterszulfon (PES) vagy nylon szűrőket használunk.

Pre -szűrés:A nagy részecskék tartalmú minták esetében a nagyobb pórusméretű szűrőn keresztüli pre -szűrés megakadályozhatja az eltömődést.


50 gyakran feltett kérdéseket a fecskendőszűrőkkel kapcsolatban, feltétlenül nézd meg ezt az informatív cikket: A "fecskendőszűrő" témája 50 gyakran feltett kérdéseket

Fontolja meg a minta stabilizálását az analit lebomlásának megakadályozása érdekében.

PH beállítás:A pH beállítása elősegítheti az egyes analitok stabilizálását. Például, a savas vegyületekhez savanyítást igényelhetnek a lebomlás megelőzése érdekében.

Adalékanyagok:A stabilizátorok vagy tartósítószerek hozzáadása elősegítheti a minta integritásának fenntartását a tárolás és az elemzés során.

Fontos, hogy válassza ki a megfelelő oldószert a minta feloldásához, és biztosítsa a kompatibilitást a HPLC rendszerrel. Fontolja meg a következőket:

Oldószer polaritás:A teljes oldódás elérése érdekében az oldószernek meg kell egyeznie az analit polaritásával.

Mobil fázis kompatibilitása: Használjon olyan oldószert, amely kompatibilis a mobil fázissal, hogy minimalizálja a potenciális interferenciákat.

7. A szabványok előkészítése

A kalibrációs szabványok előkészítése elengedhetetlen az analit mintában történő számszerűsítéséhez. Ez magában foglalja:

A kalibrációs görbe előkészítése:Készítsen elő az analit ismert koncentrációinak sorozatát a kalibrációs görbe meghatározásához a mennyiségi meghatározáshoz.

Használja ugyanazt az oldószert:A konzisztencia fenntartása érdekében mindig készítse el a szabványokat ugyanazon oldószer és a minták körülményeivel.

Kövesse a szokásos működési eljárásokat (SOP):Állítsa be és tartsa be a SOP -kat a minta előkészítéséhez a következetesség és a reprodukálhatóság biztosítása érdekében.

Használjon kiváló minőségű reagenseket és oldószereket:A szennyeződés minimalizálása érdekében mindig használjon HPLC-minőségű oldószereket és nagy tisztaságú reagenseket.

Tartsa tiszta munkaterületét:Tartsa tiszta és szervezett minta előkészítő területét a szennyeződés kockázatának csökkentése érdekében.

Mindent dokumentáljon:Tartson részletes nyilvántartást a minta előkészítési eljárásairól, ideértve a szokásos protokolloktól való eltéréseket is.

A módszerek érvényesítése:Rendszeresen validálja a minta előkészítési módszereit annak biztosítása érdekében, hogy megbízható és reprodukálható eredményeket nyújtsanak.

Rossz csúcsa alak:Ha a csúcsok szélesek vagy farkúak, ez a hiányos feloldódást vagy a részecskék jelenlétét jelezheti. Győződjön meg arról, hogy a mintát alaposan összekeverik és szűrik.

Ghost Peaks:A szellemi csúcsokat az oldószer vagy a minta szennyeződései okozhatják, nagy tisztaságú oldószereket használhatnak, és biztosíthatják, hogy minden üvegáru és berendezés tiszta legyen.

Alacsony érzékenység:Ha az érzékenység alacsony, fontolja meg az extrakciós módszer optimalizálását vagy az analit koncentrációjának növelését.

Oszlop eltömődése:A gyakori eltömés azt jelezheti, hogy a minta túl sok részecskét tartalmaz, vagy nem szűrik megfelelően. Értékelje újra a szűrési folyamatát, és fontolja meg az előszűrést.

Következetlen eredmények:Az eredmények eltérése az inkonzisztens minta előkészítéséből származhat. Szabványosítsa az összes eljárást és győződjön meg arról, hogy a minta előkészítésében részt vevő személyzet megfelelő képzésben részesül.

Az analitikai igények növekedésével a laboratóriumok fejlettebb mintakészítési technikákat alkalmaznak a hatékonyság és a pontosság javítása érdekében:

Az SPE egy széles körben alkalmazott technika, amely lehetővé teszi az analitok szelektív extrahálását a komplex mátrixokból. Ez magában foglalja egy folyékony minta átadását egy szilárd adszorbens anyagon keresztül, amely megtartja a cél analitot, miközben lehetővé teszi a szennyeződések áthaladását.

Az LLE egy olyan technika, amely elválasztja az analitokat, amelyek oldhatóságuk alapján két elegyíthetetlen folyadékban vannak. Ez a módszer hatékony a különböző polaritásokkal rendelkező vegyületek elválasztásában, és gyakran használják a környezeti és gyógyszerészeti elemzésben.

A Quechers népszerű módszer az élelmiszer- és környezeti minták elkészítésére, amelyek egyesítik az extrahálási és tisztítási lépéseket egy folyamatba, hatékonyan és költséghatékonyá tegyék.

Az átmeneti és reprodukálhatóság jelentősen javítható az automatizált minta -előkészítő rendszerekkel, amelyek olyan feladatokat végezhetnek, mint például a hígítás, a szűrés és a SPE minimális emberi beavatkozással, ezáltal csökkentve a hibák kockázatát.


Szeretne többet megtudni a HPLC mintájának előkészítéséről, kérjük, ellenőrizze ezt a cikket: HPLC minta előkészítő megoldások a legjobb eredmények érdekében

A HPLC minta előkészítése egy kritikus lépés, amely jelentősen befolyásolhatja az analitikai eredmények pontosságát és megbízhatóságát. A bevált gyakorlatok követésével, a megfelelő technikák alkalmazásával és a közös problémák kezelésével a laboratóriumok optimalizálhatják a minta előkészítési folyamatát azáltal, hogy fejlett technikákat és technológiákat alkalmaznak az analitikai igények fejlődésével. Az automatizálás tovább javítja a HPLC elemzések hatékonyságát és hatékonyságát. A megfelelő minta előkészítése nemcsak javítja az eredmények minőségét, hanem védi a HPLC rendszert is, biztosítva a hosszú távú megbízhatóságot és a teljesítményt.