Pa byffer sydd orau ar gyfer eich cam symudol HPLC?

Mae dewis y byffer cywir ar gyfer eich cam symudol HPLC yn hanfodol ar gyfer sicrhau'r gwahaniad gorau posibl a chanlyniadau dibynadwy. Mae byfferau yn chwarae rhan sylweddol wrth reoli pH, sy'n effeithio'n uniongyrchol ar gadw ac echdynnu dadansoddiadau, yn enwedig y rhai sy'n ionizable. Dyma beth sydd angen i chi ei ystyried wrth ddewis y byffer gorau ar gyfer eich cais.

1️⃣ deall eich dadansoddiadau

Mae'r dewis o byffer yn dibynnu i raddau helaeth ar PKA eich dadansoddiadau. Yn ddelfrydol, dylai pH eich cyfnod symudol fod o fewn ± 1 uned i PKA y byffer i sicrhau gallu byffro effeithiol. Er enghraifft, os oes gan eich dadansoddwr PKA o 4.5, byddai byffer ffosffad gyda PKA o amgylch y gwerth hwn yn addas, gan ganiatáu ichi gynnal y dadansoddwr yn ei gyflwr ionization a ddymunir.

2️⃣ Mathau Clustogi

Byfferau ffosffad: a ddefnyddir yn helaeth oherwydd eu hystod byffro effeithiol (pH 2-8). Maent yn gydnaws â llawer o ddadansoddiadau ac yn darparu sefydlogrwydd da.
Byfferau asetad: Yn addas ar gyfer cymwysiadau pH is, yn nodweddiadol yn amrywio o pH 3.6 i 5.6. Maent yn effeithiol ar gyfer dadansoddiadau asidig.
Buffers Tris: Fe'i defnyddir yn gyffredin mewn cymwysiadau biolegol, yn enwedig ar gyfer proteinau, ond efallai na fyddant yn ddelfrydol ar gyfer canfod UV oherwydd eu hamsugno.

3️⃣ Ystyriwch gydnawsedd

Sicrhewch fod y byffer a ddewiswyd yn gydnaws â'ch system HPLC a chyfnod llonydd eich colofn. Gall rhai byfferau, fel sitrad, gyrydu cydrannau dur gwrthstaen dros amser, felly ystyriwch yr effeithiau tymor hir ar eich offer.

4️⃣ monitro crynodiad byffer

Mae crynodiad o 25-50 mm yn nodweddiadol effeithiol ar gyfer y mwyafrif o gymwysiadau. Gall crynodiadau uwch wella siâp a datrysiad brig ond gallant hefyd arwain at fwy o ôl -bwysedd a dyodiad posibl.