1. HPLC 열의 막힘 없음
2. HPLC 열의 더 높은 감도
3. 높은 정확도
4. 거짓 양성 피크 수가 적습니다
5. 배경 소음이 적습니다
6. 침출 할 수 없다
HPLC 샘플 준비를위한 4 단계
솔루션으로 시간을 절약 할 수있는 방법과 동시에 결과의 재현성을 높이는 방법을 확신시켜 드리겠습니다.
1 단계. 수용액의 분석
빈약 한 수질은 HPLC 실행 중 문제에 가장 큰 요인 중 하나입니다. 이동상의 물 불순물은 컬럼과 상호 작용하여 일반적으로 유령 피크라고하는 크로마토 그램에서 해상도 및 감도 또는 예상치 못한 피크를 초래할 수 있습니다. 초소 수를 사용하면 유기 탄소, 미생물, 내 독소, RNases 및 DNase 로의 오염 위험이 크게 줄어 듭니다. 그러나 실험실에서 물 정제 시스템을 사용하는 초음파수를 구입할 수 있습니다. 고품질 초외 물을 보장하는 가장 쉬운 방법입니다. ASTM, NCCL, ISO 및 USP 표준을 충족하는 유형 1 시약 등급의 물이 HPLC 응용 프로그램에 가장 적합한 선택입니다.
2 단계 표준 준비
복합 식별 및 정량화를위한 표준을 준비하는 것은 지루하고 시간이 많이 걸리는 과정이 될 수 있습니다. 사전 정의 된 양의 용매가 사용될 수 있도록 고체의 무게를 정확하게 무게로 측정하는 것은 어렵고, 특히 제약 작업시 오류로 인한 폐기물은 비용이 많이들 수 있습니다. 온도와 같은 다른 요인은 표준 준비를 더욱 복잡하게 만듭니다. 온도 변동은 용매 밀도를 변경하고 농도의 극적인 차이에 기여합니다.
균형을 몇 가지 소수점까지의 계량 정확도를 가능하게하는 균형을 사용하고 균형을 솔벤트 디스펜서에 연결하여 프로세스를 자동화하면 최고 정밀도를 보장합니다. YAPP16 Dosing Q-App과 같은 소프트웨어를 사용하면 측정 된 값의 자동 계산 및 중량 측정 모니터링이 가능합니다. 용매의 온도와 밀도를 기록하면 특히 후속 일에 표준을 준비 할 때 매우 정확한 농도를 보장합니다. YAPP16 계량 응용 프로그램에서 Thermo Scientific ™ Chromeleon ™ 7.2 크로마토 그래피 데이터 시스템 (CDS) 소프트웨어로 직접 데이터 전송은 전체 데이터 무결성을 가진 종이없는 데이터 처리 옵션입니다.
3 단계. 피펫 팅이 좋은 기본으로 돌아갑니다
정확하고 정확한 피펫 팅의 중요성은 너무 자주 간과되어 당연한 것으로 간주됩니다. 사용자 기술 수준과 경험은 HPLC와 같은 민감한 분석에 중대한 영향을 미칠 수 있습니다. 올바른 피펫을 선택하면 인간의 오류와 낭비 된 용매의 관련 비용이 줄어들 수 있습니다.
볼륨 잠금 장치가 장착 된 기계 피펫은 우발적 인 볼륨 변경을 방지하기위한 간단한 솔루션을 제공하는 반면보다 정교한 전자 피펫은 사용자 변동성을 제거하여 정확한 볼륨을 지속적으로 전달합니다. 피펫 팁은 또한 HPLC 분석에 대해 고려해야 할 중요한 세부 사항입니다. 샘플 회복을 극대화하기 때문에 다른 점수의 용매로 작업 할 때 낮은 유지 팁이 가장 좋습니다. 피펫 팁에서 침출 한 결과 샘플 오염이 발생할 수 있습니다. 따라서 화학 저항성이 높은 팁은 샘플 무결성을 보존합니다.
4 단계. 정확성과 수명을위한 필터
분석 전에 필터 샘플에 추가주의를 기울이면 막힘 효과를 방지하여 신뢰성이 향상되고 HPLC 컬럼의 수명이 연장 될 수 있습니다. 주사기 필터는 컬럼 크로마토 그래피 전에 샘플을 여과하기위한 간단하고 빠른 솔루션입니다. 피펫 팁과 마찬가지로 HPLC에 사용되는 용매는 침출 및 샘플 오염을 방지하기 위해 특정 필터를 필요로합니다.
셀룰로오스 막은 디메틸 설폭 사이드 (DMSO), 아미드, 케톤, 에스테르 및 에테르 화합물에 내성이있다. 특히 가혹한 용매의 경우, 코팅되지 않은 폴리 에테르 설폰 (PTFO) 막은 침출 및 샘플 오염을 방지합니다. 샘플 수가 증가 할 때 샘플 여과는 매우 시간이 많이 걸립니다. Claristep® 여과 시스템과 같은 다중 샘플 여과 장치는 품질을 희생하지 않고 주사기 및 빠른 트랙 샘플 준비없이 샘플을 처리 할 수 있습니다.
！에주의를 기울여야하는 5 가지 문제
1. 실험실이 직면 한 가장 큰 샘플 준비 문제는 무엇입니까?
실험실은 시간과 비용 측면에서 압력을 높이고 있으며, 종종 많은 수의 샘플뿐만 아니라 다양한 본성 샘플을 다루는 경우가 많습니다. 샘플 준비는 샘플 유형 또는 샘플 준비 방법과 사용 된 재료 사이의 미묘한 차이가 얻은 결과에 영향을 줄 수있는 영역입니다. 여과 장치의 재료와 용매 사이의 호환성을 보장하는 것은 문제를 최소화 할 수 있습니다. 예를 들어, 분석 물 검출을 방해 할 수있는 추출 가능한 화합물의 수준.
2. 샘플 준비가 잘못되면 어떻게됩니까?
분석적 고성능 액체 크로마토 그래피 (HPLC) 응용 전에, 샘플은 다양한 방법에 의해 제조되며, 이들은 모두 시스템에 주입 된 샘플에 영향을 미쳐 분석 결과에 영향을 줄 수있는 잠재력을 갖는다. 비효율적 인 샘플 준비는 컬럼 수명을 줄이고, 구성 요소에 대한 서비스 요구 사항 증가, 계측 잠재적 가동 시간, 크로마토 그래피 분리 효율 및 재현성의 감소 및 기타 많은 문제로 이어질 수 있습니다.
3. 언뜻보기에 여과는 간단한 과정처럼 보입니다 ...
여과는 큰 워크 플로의 작은 부분이지만, 주어진 응용 프로그램에 대한 올바른 필터를 선택하는 영향은 상당 할 수 있습니다. 예를 들어, 충분한 미립자 물질을 제거하지 않는 방법은 열 블로킹을 초래할 수 있습니다. 샘플 준비 장치의 부적절한 선택은 특정 상황에서 추출 가능한 화합물을 샘플에 방출하거나 관심 분석 물을 바인딩하거나 샘플 손실을 통해 오류를 도입 할 수 있습니다. 모두 관찰 된 결과의 품질 및 재현성에 영향을 미칩니다. 여과 소모품이 재 작업 또는 근본 원인 조사가 필요한 오류에 기여하지 않는다고 확신한다면 돈을 절약하고 마음의 평화를 줄 것입니다.
4. 가장 일반적인 샘플 준비 '실패'는 무엇입니까?
잘못된 필터 멤브레인 선택은 우리가 많이 볼 수있는 한 가지 문제입니다. 문제는 추출물에서 외부 피크로 나타날 수 있으며, 이는 관심 분석 물의 탐지를 방해 할 수 있습니다. 화학적 저항 측면에서 샘플 또는 용매와의 필터 매체의 비 호환성은 전적으로 필터 매체의 용해 효과에만 국한되지 않습니다. 용매는 완전히 호환되지 않을 때 중합체 막 물질의 약간의 붓기를 유발할 수 있으며, 이는 여과 성능에 영향을 미쳐 샘플의 비효율적 인 청소를 초래할 수 있습니다. 이 문제를 해결하는 한 가지 방법은 수성 및 유기 용매와 크게 호환되는 막을 선택하는 것입니다. 전형적인 HPLC 샘플 준비의 경우, 재생 된 셀룰로오스 막을 함유하는 주사기 및 주사기가없는 필터는 광범위한 용매 호환성으로 인해 좋은 옵션입니다.
준비되는 부피에 필요한 것보다 큰 필터 장치를 사용하는 것은 또 다른 일반적인 함정입니다. 너무 큰 필터 장치를 사용한다는 것은 예방 조치가 가능한 한 많이 소비 된 후에도 소량의 샘플이 필터에 남아 있음을 의미합니다.
5. 여과 단계를 진지하게 수행하는 데있어 장점은 무엇입니까?
분석 테스트에 종사하는 대부분의 실험실의 기본 목표는 일관된 결과를 뒷받침하고 일관된 필터링이 필요한 일관된 프로세스를 개발하는 것입니다. 올바른 기공 크기 및 보유 특성을 갖는 여과 장치의 선택은 효과적인 미립자 제거를 보장하는 데 도움이되는 반면, 필터 유닛의 적절한 크기와 설계를 선택하면 샘플 손실을 최소화 할 수 있습니다. 우수한 여과는 또한 컬럼을 보호하는 데 도움이되고 잠재적으로 인젝터와 컬럼의 수명을 연장 할 수 있습니다.
결론
HPLC는 정확하고 재현 가능한 결과를 제공하므로 생명 과학 및 생물 제약 연구를위한 귀중한 기술입니다. 이 정확도는 HPLC 샘플의 무결성에 달려 있으며, 고품질 샘플을 보장하는 가장 좋은 방법은 최고의 도구부터 시작하는 것입니다. Ultrapure Water, 표준 준비, 피펫, 팁 및 필터 용 솔루션을 사용하여 HPLC 샘플 준비 라인은 모든 세부 사항을 설명합니다. 자동화 된 솔루션 및 소프트웨어는 또한 깨끗한 결과를 위해 깨끗한 샘플을 제공하기 위해 샘플 준비를 간소화하는 데 도움이됩니다.
HPLC 샘플 준비 솔루션에 대한 더 많은 토론이 환영됩니다!
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