Você sabe sobre cromatografia em papel?

A cromatografia em papel é uma técnica analítica amplamente usada que separa e identifica misturas de substâncias com base em suas diferentes afinidades para uma fase estacionária (papel) e uma fase móvel (solvente). É particularmente útil em química e bioquímica para analisar pequenas quantidades de substâncias como pigmentos, aminoácidos e outros compostos orgânicos.

O que é cromatografia em papel?

A cromatografia em papel é um tipo de cromatografia líquida na qual a fase estacionária é uma folha de papel de filtro e a fase móvel é o solvente que flui através do papel de filtro. A técnica baseia -se no particionamento diferencial de compostos entre a fase estacionária (papel de filtro) e a fase móvel (solvente). À medida que o solvente move o papel de filtro por ação capilar, ele carrega os componentes da mistura a taxas diferentes com base em sua afinidade pelas duas fases.

Os princípios básicos por trás da cromatografia em papel podem ser entendidos através de dois conceitos principais: cromatografia de partição e cromatografia de adsorção.

Cromatografia de partição: Neste tipo, as substâncias são distribuídas entre duas fases líquidas. A fase estacionária consiste em água nos poros do papel de filtro, enquanto a fase móvel é o solvente que se move através desses poros. A separação ocorre porque diferentes compostos têm afinidades diferentes para as fases estacionárias e móveis.

Cromatografia de adsorção: Aqui, a superfície sólida do papel atua como a fase estacionária e o solvente líquido atua como a fase móvel. Os componentes da mistura são separados com base em sua adsorção na superfície sólida e em sua solubilidade na fase líquida.

Componentes

Fase estacionária: papel cromatográfico, geralmente feito de celulose. Ele fornece uma superfície para os componentes aderirem.

Fase móvel: o solvente ou a mistura de solventes que se movem no papel por ação capilar. A escolha do solvente pode afetar significativamente o processo de separação.

Amostra: a mistura a ser analisada, geralmente vista em um ponto de partida designado no papel.

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Processo de cromatografia em papel

Preparação: Escolha um papel de filtro de alta qualidade com uma certa porosidade para garantir uma separação eficaz. Aplique uma pequena porção da mistura de amostra na linha de base do papel da cromatografia.

Preparação da amostra: dissolva a mistura de amostra em um solvente apropriado como parte da fase móvel.

Spotting: Use um capilar ou micropipeta para soltar uma pequena quantidade da solução de amostra na linha de base no papel de filtro.

Desenvolvimento: Mergulhe a borda inferior do papel de teste no solvente em desenvolvimento (fase móvel). À medida que a ação capilar ocorre, o solvente sobe no papel de teste, transportando os componentes da amostra.

Separação: À medida que o solvente se move, diferentes componentes da amostra se moverão a taxas diferentes devido à sua interação com a fase estacionária e a solubilidade diferente na fase móvel.

Visualização: Depois que a frente do solvente move uma distância suficiente, o papel é removido do solvente e para a esquerda para secar. Os componentes podem ser visualizados usando luz UV, reagentes químicos ou alterações de cores.

Análise: A distância percorrida por cada componente em relação à frente do solvente é medida para calcular o valor de RF (fator de retenção) para identificação.

Aplicações de cromatografia em papel

A cromatografia em papel tem uma ampla gama de aplicações em vários campos:

Bioquímica: Análise de aminoácidos, açúcares e outras biomoléculas.

Farmacêuticos: Identificação de ingredientes ativos e impurezas nas formulações de medicamentos. Usado para identificar compostos e impurezas ativos nas formulações de medicamentos durante o desenvolvimento e controle da qualidade.

Ciência Ambiental: A cromatografia em papel é usada para detectar contaminantes em amostras de água e analisar contaminantes em extratos de solo.

Indústria de alimentos: A técnica ajuda a analisar aditivos, contaminantes e corantes em alimentos para garantir a conformidade com os regulamentos de segurança.

Vantagens da cromatografia em papel

Custo -efetividade: requer equipamentos e materiais mínimos em comparação com outras técnicas cromatográficas, como HPLC (cromatografia líquida de alto desempenho). Simplicidade: o processo é muito simples e pode ser realizado com ferramentas de laboratório básicas, para que possa ser usado para fins educacionais.

Requisito de baixo volume da amostra: apenas uma pequena quantidade de amostra é necessária para análise, tornando -a ideal para amostras preciosas ou limitadas.

Versatilidade: pode separar uma ampla gama de substâncias baseadas em propriedades químicas, incluindo compostos polares e não polares

Limitações de cromatografia em papel

Apesar de suas vantagens, a cromatografia em papel tem algumas limitações:

Capacidade limitada: geralmente adequada para pequenos volumes de amostra.

Resolução: A resolução pode não ser tão alta quanto a alcançada por técnicas mais avançadas, como HPLC ou cromatografia gasosa (GC).

Consumidor de tempo: devido à taxa de migração mais lenta, o processo pode levar mais tempo em comparação com outros métodos cromatográficos.

Análise quantitativa limitada: Embora os resultados qualitativos possam ser facilmente obtidos, métodos de calibração adicionais podem ser necessários para quantificar as concentrações.

A cromatografia em papel continua sendo uma técnica valiosa para separar e analisar misturas em uma variedade de campos científicos. Sua simplicidade, custo-efetividade e capacidade de fornecer resultados intuitivos o tornam uma ferramenta essencial para químicos e pesquisadores. Apesar de suas limitações em comparação com técnicas cromatográficas mais avançadas, ela ainda é amplamente utilizada para fins educacionais e análise preliminar em laboratórios.

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