Све што је потребно да знате о припреми ХПЛЦ узорака

Припрема узорака је критични корак у ХПЛЦ анализи из више разлога.

Смањите интерференције:Узорци често садрже нечистоће и матричне компоненте које могу ометати детекцију циљних аналитика. Ефикасне технике припреме узорака могу помоћи у уклањању ових нежељених супстанци и побољшању аналитичке тачности.

Побољшајте опоравак аналитичара:Правилна припрема побољшава опоравак аналитичара и осигурава да резултати одражавају стварну концентрацију оригиналног узорка. Ово је посебно важно за анализу у траговима где су аналитике присутни при малим концентрацијама.

Побољшани вршни облик:Правилно припремљени узорци помажу у форми симетричних и добро дефинисаних врхова у хроматограму. Ово је неопходно за тачну квантификацију. Неправилна припрема узорака може резултирати вршним репом и ширењем, што комплицира интерпретацију података.

Заштитите свој ХПЛЦ систем:Контаминанти у вашем узорку могу оштетити ступце и друге компоненте у вашем ХПЛЦ систему, што доводи до повећаних трошкова одржавања и време застоја. Правилна припрема узорка смањује ризик од зачепљења и хабања система.

Први корак у припреми узорка је да правилно прикупите узорак. Ово укључује:

Користите чисте контејнере:Увек користите ЦЛЕАН, инертне контејнере како бисте избегли контаминацију. Препоручују се стаклене или висококвалитетне пластичне посуде.

Избегавајте контаминацију:Користите рукавице и чисте алате за спречавање контаминације од себума и других извора.

Правилно означавање:Јасно налепнице на етикете да бисте избегли мешање и осигуравају сљедивост.

Хомогенизација узорка осигурава хомогеност, што је важно за поновне резултате. Технике хомогенизације укључују:

Механичка хомогенизација: мешање чврстих или получврсте узорака помоћу мешалице или хомогенизатора.

Ултразвучна хомогенизација:Наношење ултразвука за распршивање честица унутар течног узорка.

У зависности од очекиване концентрације аналитета, узорци ће можда требати разблажити или концентрисати. То се може постићи:

Разблаживање:Разблажите узорак жељеној концентрацији користећи исти растварач као и мобилна фаза.

Концентрација:Анализе се могу концентрисати коришћењем техника као што су испаравање или екстракција чврстог фазе (СПЕ).

Филтрација је од суштинског значаја за уклањање честица која може да зачепи ХПЛЦ колоне. Уобичајени методи филтрирања укључују:

Мембранска филтрација:Употреба0.2μм или 0,45 уМ филтераза уклањање честица. Користи се обично полиехерулфон (ПЕС) или најлонски филтери.

Префилтрација:За узорке са садржајем високог честица, префилтрација кроз већи филтер величине пора могу спречити зачепљење.


50 Често постављана питања о филтрима шприца, обавезно погледајте овај информативни чланак: Тема "Филтер шприца" 50 често постављана питања

Размислите о стабилизујући узорак да бисте спречили деградацију аналита.

ПХ подешавање:Подешавање пХ може помоћи у стабилизацији одређених аналитика. На пример, кисела једињења могу захтевати закисељење како би се спречило разградња.

Адитиви:Додавање стабилизатора или конзерванса може помоћи у одржавању интегритета узорка током складиштења и анализе.

Важно је одабрати исправан растварач да бисте растворили узорак и осигурали компатибилност са својим ХПЛЦ системом. Размотрите следеће:

Поларитет растварача:Да би се постигло потпуно растварање, растварач мора да одговара поларитету аналите.

Компатибилност мобилне фазе: Користите растварач који је компатибилан са мобилном фазом како би се минимизирала потенцијална сметња.

7. Припрема стандарда

Припрема стандарда калибрације од суштинског је значаја за квантификацију аналитичара у узорку. Ово укључује:

Припрема кривуље калибрације:Припремите низ познатих концентрација аналита за успостављање калибрационе кривуље за квантификацију.

Користите исти растварач:За одржавање доследности, увек припремите своје стандарде користећи исти растварач и услови као узорак.

Слиједите стандардне оперативне процедуре (СОП):Успоставите и придржавајте се СОП-а за припрему узорка како би се осигурала доследност и обновљивост.

Користите висококвалитетне реагенсе и раствараче:Увек користите раствараче ХПЛЦ-а и реагенсе високе чистоће да бисте смањили контаминацију.

Држите свој радни простор чистом:Држите се подручје припреме узорака чисто и организовано да бисте смањили ризик од контаминације.

Документирајте све:Држите детаљне евиденције о поступцима припреме узорка, укључујући било каква одступања од стандардних протокола.

Потврђивање метода:Редовно потврђују методе припреме узорка како би се осигурало да пружају поуздане и репродуциране резултате.

СИСТЕР СХАЛИ СХАЛИ:Ако су врхови широки или репни, то може указивати на непотпуно распуштање или присуство честица. Уверите се да је ваш узорак темељно мешан и филтриран.

Гхост Пеакс:Гхост Врхови могу бити узроковани нечистоћима у растварачу или узорку, користите раствараче са високим чистоћима и осигурајте да су сви стаклени софтвер и опрема чисти.

Ниска осетљивост:Ако је осетљивост ниска, размислите о оптимизацији методе екстракције или повећање концентрације вашег аналита.

Зачепљење колоне:Често зачепљење може указивати на то да ваш узорак садржи превише честица или се не може адекватно филтрирати. Поновно процијените свој процес филтрације и размислите о пре филтрирању.

Недоследни резултати:Варијација у резултатима може да произведе од недоследног припрема узорка. Стандардизирајте све процедуре и осигурајте да се особље укључено у припрему узорка правилно обучено.

Како се повећавају аналитички захтеви, лабораторије усвајају напредније технике припреме узорака за побољшање ефикасности и тачности:

СПЕ је широко коришћена техника која омогућава селективно вађење аналитика од сложених матрица. То укључује пролазак течног узорка кроз чврсти адсорбентни материјал који задржава циљни аналитичар током омогућавања нечистоће да прође кроз.

ЛЛЕ је техника која раздваја аналете на основу њихове растворљивости у две непомичне течности. Ова метода је ефикасна у раздвајању једињења са различитим поларитетима и често се користи у еколошкој и фармацеутској анализи.

Куецхерс је популарна метода за припрему узорака хране и заштите животне средине која комбинују екстракцију и чишћење корака у један процес, чинећи га ефикасним и економичним.

Пропусност и репродуктивност могу се значајно побољшати аутоматизованим системима припреме узорка који могу обављати задатке као што су разблаживање, филтрацију и СПЕ са минималном људском интервенцијом, смањујући на тај начин ризик од грешака.


Желите да знате више о припреми за ХПЛЦ узорак, молимо вас да проверите овај чланак: ХПЛЦ решења за припрему узорка за најбоље резултате

Припрема узорка ХПЛЦ је критични корак који значајно може утицати на тачност и поузданост аналитичких резултата. Следећим најбољим праксама, користећи одговарајуће технике и решавање заједничких проблема, лабораторије могу оптимизирати процес припреме узорка усвајањем напредних техника и технологија као што се еволуирају аналитичке потребе. Аутоматизација ће даље побољшати ефикасност и ефикасност ХПЛЦ анализа. Правилна припрема узорка не само да побољшава квалитет резултата, већ и штити ХПЛЦ систем, обезбеђујући дугорочну поузданост и перформансе.