Utayarishaji wa mfano ni hatua muhimu katika mchakato wa kioevu cha chromatografia-molekuli (LC-MS), kushawishi usahihi na kuegemea kwa matokeo ya uchambuzi. Kusudi kuu la utayarishaji wa sampuli ni kutoa, kusafisha, na kuzingatia uchambuzi kutoka kwa matawi tata, kuhakikisha zinaendana na uchambuzi wa LC-MS. Hatua hii ni muhimu kuondoa usumbufu unaoweza kuathiri ubora wa data. Utayarishaji sahihi wa sampuli unaboresha unyeti na maalum ya uchambuzi, ambayo ni muhimu kwa matumizi katika nyanja mbali mbali kama proteni, metabolomics, uchambuzi wa dawa, na upimaji wa mazingira.

Malengo muhimu ya maandalizi ya mfano:

Kuondolewa kwa uingiliaji: kuondoa vitu ambavyo vinaweza kuingiliana na ugunduzi wa uchambuzi wa lengo.

Mkusanyiko wa uchambuzi: Ongeza mkusanyiko wa uchambuzi ili kuboresha mipaka ya kugundua.

Utangamano: Andaa sampuli kwa njia ambayo zinaweza kuchambuliwa vizuri na mifumo ya LC-MS.

Unataka kujua zaidi juu ya utayarishaji wa mfano wa HPLC, tafadhali angalia nakala hii: Suluhisho za utayarishaji wa mfano wa HPLC kwa matokeo bora

Mbinu za kawaida katika utayarishaji wa mfano wa LC-MS

Mbinu kadhaa huajiriwa kawaida katika utayarishaji wa mfano wa LC-MS. Kila njia ina faida zake mwenyewe na huchaguliwa kulingana na mahitaji maalum ya uchambuzi.

1. Mchanganyiko wa Awamu ya Awamu (SPE)

SPE hutumiwa sana kwa kuwatenga uchambuzi kutoka kwa sampuli za kioevu. Mbinu hii inajumuisha kupitisha sampuli kupitia awamu thabiti ya stationary ambayo huchagua uchanganuzi wa lengo wakati unaruhusu vifaa vingine kupita. SPE ni nzuri sana kwa matawi tata kama damu au mkojo na hutoa faida kadhaa:

Viwango vya juu vya uokoaji: SPE kawaida hutoa viwango vya juu vya uokoaji ikilinganishwa na uchimbaji wa kioevu-kioevu.

Utangamano wa automatisering: Njia inaweza kujiendesha kwa urahisi, kuongeza uboreshaji na ufanisi.

2. Protini ya protini

Protini ya protini ni njia rahisi lakini nzuri ya kuondoa protini kutoka kwa sampuli za kibaolojia. Mbinu hii ni muhimu sana wakati wa kuchambua sampuli zilizo na kiwango cha juu cha protini, kama vile plasma au seramu. Kwa kutoa protini, njia hii hurahisisha matrix na hupunguza kuingiliwa katika uchambuzi unaofuata.

Haraka na bora: Inaruhusu usindikaji wa haraka wa sampuli wakati wa kudumisha viwango nzuri vya uokoaji.

3. Mchanganyiko wa kioevu-kioevu (LLE)

LLE hutenganisha uchambuzi kulingana na umumunyifu wao katika vinywaji viwili visivyoweza kufikiwa - kawaida ni sehemu ya maji na kutengenezea kikaboni. Mbinu hii ni muhimu kwa kutoa misombo isiyo ya polar au ya wastani kutoka kwa matawi tata ya maji.

Maombi ya anuwai: LLE inaweza kubadilishwa kwa idadi na aina za sampuli, na kuifanya ifanane kwa matumizi anuwai.

4. Derivatization

Derivatization inajumuisha ubadilishaji wa kemikali ili kuongeza ugunduzi wao katika uchambuzi wa LC-MS. Utaratibu huu unaboresha mali kama vile ufanisi na ufanisi wa ionization, na kuifanya kuwa muhimu sana kwa misombo na ugunduzi wa chini wa asili.

Usikivu ulioimarishwa: derivatization inaweza kuongeza unyeti na uteuzi wa uchambuzi wa madarasa maalum ya kiwanja kama asidi ya amino au steroids.

Unataka kujua zaidi juu ya matumizi ya viini vya chromatografia, tafadhali angalia nakala hii: Maombi 15 ya viini vya chromatografia katika nyanja tofauti

Mambo yanayoshawishi uteuzi wa njia ya utayarishaji wa mfano

Kuchagua mbinu inayofaa ya kuandaa sampuli inahitaji kuzingatia mambo kadhaa:

Mchanganuo wa Kemia: Kuelewa polarity, malipo, na utulivu wa uchambuzi ni muhimu.

Kiwango cha mfano na ugumu: Vizuizi vya kiasi na ugumu wa matrix ya mfano inaweza kuamuru ni njia zipi zinazowezekana.

Mahitaji ya Sensitivity: Maombi tofauti yanaweza kuwa na mahitaji tofauti ya usikivu ambayo yanashawishi uteuzi wa njia.

Rasilimali za maabara: Upatikanaji wa vifaa vya automatisering au usindikaji wa mwongozo unaweza kuathiri uchaguzi wa mbinu.

Mazoea bora ya utayarishaji mzuri wa sampuli

Ili kufikia matokeo bora katika uchambuzi wa LC-MS, kufuata mazoea bora wakati wa utayarishaji wa sampuli ni muhimu:

Sanifu: Tengeneza itifaki sanifu ili kuhakikisha uthabiti katika uchambuzi.

Uthibitisho: Thibitisha njia za mara kwa mara za kudhibitisha kuegemea na usahihi wao.

Punguza utunzaji wa mfano: Punguza idadi ya udanganyifu ili kuzuia upotezaji au uchafu.

Tumia vitendaji vya ubora: kuajiri vitu vya hali ya juu ili kuzuia kuanzisha uchafu katika sampuli.

Taratibu za Hati: Weka rekodi za kina za taratibu zote ili kuwezesha utatuzi wa shida na utaftaji wa njia.

Hitimisho

Utayarishaji mzuri wa sampuli ni muhimu kwa uchambuzi wa mafanikio wa LC-MS. Kwa kuelewa mbinu mbali mbali kama vile SPE, protini ya protini, LLE, na derivatization, wachambuzi wanaweza kuchagua njia inayofaa zaidi kwa mahitaji yao maalum. Kwa kuongezea, kufuata mazoea bora kutaboresha ubora wa data na kuhakikisha matokeo ya kuaminika ya matumizi tofauti katika mipangilio ya utafiti na tasnia.

Kwa kumalizia, mbinu za utayarishaji wa mfano haziwezi kuboresha utendaji wa uchambuzi tu, lakini pia kutoa michango muhimu kwa maendeleo katika maeneo kama utambuzi wa kliniki, maendeleo ya dawa, na ufuatiliaji wa mazingira.

Fungua siri za maandalizi sahihi ya vial ya chromatografia kwa uchambuzi sahihi na wa kuaminika katika hatua 6 rahisi tu.Soma ili kujua mbinu! Hatua 6 za kuandaa viini vya chromatografia kwa uchambuzi

Zamani:

LCMS vs GCMS: Ni mbinu gani bora kwa utafiti wako?

Ifuatayo:

Je! Ni nini Toc na umuhimu wake katika chromatografia?