HPLC mobil fazası üçün hansı tampon ən yaxşısıdır?
HPLC mobil fazası üçün düzgün tampon seçmək optimal ayrılma və etibarlı nəticələr əldə etmək üçün çox vacibdir. Tamponlar, analitiklərin saxlanılmasına və ellubu, xüsusən də ionlaşan olanları birbaşa təsir edən PH-lərdə mühüm rol oynayır. Tətbiqiniz üçün ən yaxşı tampon seçərkən nəzərə alınmalı olduğunuz şey budur.
1️⃣ analitiklərinizi anlayın
Tampon seçimi əsasən analitiklərin PKA-dan asılıdır. İdeal olaraq, mobil fazanın pH, effektiv tamponlama qabiliyyətini təmin etmək üçün tamponun PKA-nın ± 1 vahidi daxilində olmalıdır. Məsələn, analitikinizdə 4.5 PKA varsa, bu dəyər ətrafında bir PKA ilə bir PKOPFAT bufonu, istədiyiniz ionlaşma vəziyyətində analizi qorumağa imkan verən bir fosfat tamponu uyğun olardı.
2º tampon növləri
Fosfat tamponları: Effektiv tamponlama diapazonuna görə geniş istifadə olunur (PH 2-8). Bir çox analitiklərə uyğundur və yaxşı sabitlik təmin edirlər.
Asetat bufterləri: Adətən PH 3.6-dan 5.6-a qədər olan aşağı pH tətbiqləri üçün uyğundur. Turşu analitikləri üçün təsirli olurlar.
TRIS tamponları: Ümumiyyətlə bioloji tətbiqlərdə, xüsusən zülallar üçün istifadə olunur, lakin absorbsiya səbəbiylə UB aşkarlanması üçün ideal olmaya bilər.
3️⃣ Uyğunluğu nəzərdən keçirin
Seçilmiş tamponun HPLC sisteminizə və sütununuzun stasionar mərhələsinə uyğun olmasını təmin edin. Sitrat kimi bəzi tamponlar, zamanla paslanmayan polad komponentləri korlaya bilər, buna görə də avadanlıqlarınıza uzunmüddətli effektləri nəzərdən keçirin.
4️⃣ Bufer konsentrasiyasına nəzarət edin
25-50 mm bir konsentrasiyası, əksər tətbiqlər üçün adətən təsirli olur. Yüksək konsentrasiyalar pik şəklini və qətnaməni artıra bilər, lakin artan ehtiyat və potensial yağıntıya səbəb ola bilər.
