Která vyrovnávací paměť je nejlepší pro vaši mobilní fázi HPLC?

Výběr správné vyrovnávací paměti pro mobilní fázi HPLC je zásadní pro dosažení optimálního separace a spolehlivých výsledků. Pufry hrají významnou roli při kontrole pH, které přímo ovlivňuje retenci a eluce analytů, zejména těch, které jsou ionizovatelné. Zde je to, co musíte zvážit při výběru nejlepší vyrovnávací paměti pro vaši aplikaci.

1⃣ Pochopte své analyty

Výběr vyrovnávací paměti do značné míry závisí na PKA vašich analytů. V ideálním případě by pH vaší mobilní fáze mělo být v rámci ± 1 jednotky PKA pufru, aby se zajistila účinná vyrovnávací kapacita. Pokud má například váš analyt PKA 4,5, byl by vhodný fosfátový pufr s PKA kolem této hodnoty, což vám umožní udržovat analyt v požadovaném stavu ionizace.

2⃣ typy vyrovnávací paměti

Fosfátové pufry: široce používané díky jejich efektivnímu rozsahu pufrování (pH 2-8). Jsou kompatibilní s mnoha analyty a poskytují dobrou stabilitu.
Acetátové pufry: Vhodné pro nižší aplikace pH, obvykle v rozmezí od pH 3,6 do 5,6. Jsou účinné pro kyselé analyty.
Tris pufry: běžně se používají v biologických aplikacích, zejména u proteinů, ale nemusí být ideální pro detekci UV záření kvůli jejich absorbanci.

3⃣ Zvažte kompatibilitu

Ujistěte se, že vybraná vyrovnávací paměť je kompatibilní s systémem HPLC a stacionární fází vašeho sloupce. Některé pufry, jako Citrát, mohou v průběhu času korodovat komponenty z nerezové oceli, takže zvažte dlouhodobé účinky na vaše zařízení.

4⃣ Koncentrace vyrovnávací paměti monitoru

Koncentrace 25-50 mm je obvykle účinná pro většinu aplikací. Vyšší koncentrace mohou zvýšit tvar a rozlišení píku, ale mohou také vést ke zvýšenému stlačení a potenciálnímu srážení.