HPLC -Probenvorbereitungslösungen für die besten Ergebnisse

Vier Schritte für die HPLC -Probenvorbereitung

Schritt 1. Analyse wässriger Lösungen

Schritt 2. Vorbereitung von Standards

Die Vorbereitung von Standards für die Identifizierung und Quantifizierung von Verbindungen kann ein mühsamer und zeitaufwändiger Prozess sein. Das genaue Gewicht eines Feststoffs, so dass ein vordefiniertes Volumen an Lösungsmitteln verwendet werden kann, ist schwierig, und der Fehler kann kostspielig sein - insbesondere bei der Arbeit mit Arzneimitteln. Andere Faktoren wie Temperatur komplizieren die Standardvorbereitung weiter. Temperaturschwankungen verändern die Lösungsmitteldichte und tragen zu dramatischen Konzentrationsunterschieden bei.



Verwenden eines Gleichgewichts, der eine Gewichtgenauigkeit bis zu mehreren Dezimalstellen ermöglicht, und die Automatisierung des Prozesses durch Verknüpfung des Gleichgewichts mit einem Lösungsmittelspender garantiert die höchste Präzision. Mithilfe von Software wie der YAPP16-Dosierung Q-App ermöglicht automatische Berechnungen und gravimetrische Überwachung der gemessenen Werte. Die Dokumentation der Temperatur und Dichte des Lösungsmittels gewährleistet auch hoch genaue Konzentrationen, insbesondere bei der Vorbereitung von Standards an den folgenden Tagen. Direkte Datenübertragung von der YAPP16 -Wiege -Anwendung auf die Thermo Scientific ™ Chromeleon ™ 7.2 Chromatographie -Datensystem -Software (CDS) ist eine Option für die papierlose Datenbehandlung mit vollem Datenintegrität.

Schritt 3. Kehren Sie zu den Grundlagen mit guter Pipettierung zurück

Die Bedeutung eines genauen und präzisen Pipettierens wird zu oft übersehen und als selbstverständlich angesehen. Das Nutzer -Fähigkeitsniveau und die Benutzererfahrung können erhebliche Auswirkungen auf sensible Analysen wie HPLC haben. Durch die Auswahl der richtigen Pipette kann das menschliche Fehler und die damit verbundenen Kosten von verschwendeten Lösungsmitteln reduziert werden.



Mechanische Pipetten mit einer Volumenschloss bieten eine einfache Lösung zur Verhinderung von Verhandlungsvolumenänderungen, während ausgefeiltere elektronische Pipetten die Variabilität der Benutzer beseitigen, um konsequent präzise Volumina zu liefern. Die Pipettenspitze ist auch ein wichtiges Detail für HPLC -Analysen. Tipps für niedrige Retention sind am besten bei der Arbeit mit Lösungsmitteln verschiedener Viskositäten, da sie die Probenwiederherstellung maximieren. Die Probenverschmutzung kann auch infolge des Auslaugens von der Pipettenspitze auftreten. Tipps mit hoher chemischer Resistenz bewahren die Probenintegrität bei.

Schritt 4. Filter für Genauigkeit und Langlebigkeit

Wenn Sie zusätzliche Sorgfalt zur Filterung der Proben vor der Analyse machen, verbessert sie die Zuverlässigkeit und kann die Lebensdauer der HPLC -Säule durch Verhinderung von Verstopfungseffekten verlängern. Spritzenfilter sind eine einfache, schnelle Lösung zum Filtern von Proben vor der Säulenchromatographie. Wie bei Pipette -Spitzen müssen die in HPLC verwendeten Lösungsmittel bestimmte Filter benötigen, um das Auslaugen und eine Probenkontamination zu verhindern.

Cellulosemembranen sind gegen Dimethylsulfoxid (DMSO), Amide, Ketone, Ester und Etherverbindungen resistent. Für besonders harte Lösungsmittel verhindern unbeschichtete Polyethersulfon (PTFO) -Membranen das Auslaugen und eine Probenkontamination. Die Probenfiltration wird sehr zeitaufwändig, wenn die Stichprobenzahl zunimmt. Filtrationseinheiten mit mehreren Stichproben, wie das Claristep®-Filtrationssystem, können Proben ohne Spritzen und Schnellspurprobenvorbereitung verarbeiten, ohne die Qualität zu beeinträchtigen.

Fünf Probleme, die Sie auf！ achten müssen

1. Was sind die größten Probleme mit der Vorbereitung von Labors?

Die Laboratorien werden in Bezug auf Zeit und Kosten zunehmend unter Druck stehen, und es handelt sich häufig nicht nur um eine hohe Anzahl von Proben, sondern auch mit Proben unterschiedlicher Natur. Die Probenvorbereitung ist ein Bereich, in dem subtile Unterschiede zwischen Probentypen oder den verwendeten Probenvorbereitungsmethoden und -materialien die erhaltenen Ergebnisse beeinflussen können. Sicherstellung der Kompatibilität zwischen den Materialien im Filtrationsgerät und dem Lösungsmittel kann Probleme minimieren. Zum Beispiel die Ebenen extrahierbarer Verbindungen, die die Analyterkennung beeinträchtigen könnten.

2. Was passiert, wenn die Probevorbereitung schief geht?

Vor der analytischen Hochleistungs-Flüssigchromatographie (HPLC) -Anwendungen werden Proben mit einer Vielzahl von Methoden hergestellt, die alle das Potenzial haben, die analytischen Ergebnisse zu beeinflussen, indem die in das System injizierte Probe beeinflusst wird. Eine ineffektive Probenvorbereitung kann zu einer Verringerung der Säulenlebensdauer, zu erhöhten Serviceanforderungen für Komponenten, mögliche Ausfallzeiten der Instrumentierung, Verringerung der chromatographischen Trennungseffizienz und Reproduzierbarkeit sowie vielen anderen Problemen führen.

3. Auf den ersten Blick scheint die Filtration ein einfacher Prozess zu sein ...

Obwohl die Filtration ein scheinbar kleiner Teil eines großen Workflows ist, kann die Auswirkungen der Auswahl des richtigen Filters für einen bestimmten Antrag erheblich sein. Beispielsweise können Methoden, die keine ausreichende Partikel entfernen, zu einer Säulenblockierung führen. Unangemessene Auswahl der Probenvorbereitungsgeräte könnten unter bestimmten Umständen extrahierbare Verbindungen in die Probe freisetzen, Analyten von Interesse binden oder Fehler durch Probenverlust einführen - alle beeinflussen die Qualität und Reproduzierbarkeit der beobachteten Ergebnisse. Wenn Sie zuversichtlich sind, dass Ihre Filtration Verbrauchsmaterialien nicht zu Fehlern beitragen, bei denen Nachforschungen oder Root-Cause-Ermittlungen erforderlich sind, sparen Sie Geld und geben sich beruhigend.

V.

Falsche Filtermembranauswahl ist ein Problem, das wir viel sehen. Probleme können als fremde Peaks aus extrahierbaren Nachlächen auftreten, die die Erkennung der interessierenden Analyten beeinträchtigen können. Die Inkompatibilität von Filtermedien mit einer Stichprobe oder einem Lösungsmittel in Bezug auf chemische Resistenz ist nicht ausschließlich auf die Auflösungseffekte auf das Filtermedium beschränkt. Lösungsmittel können eine leichte Schwellung von Polymermembranmaterialien verursachen, wenn sie nicht vollständig kompatibel ist, was wiederum die Filtrationsleistung beeinflussen kann, was zu einer ineffektiven Reinigung von Proben führt. Eine Möglichkeit, dieses Problem anzugehen, besteht darin, eine Membran auszuwählen, die sowohl mit wässrigen als auch mit organischen Lösungsmitteln kompatibel ist. Für die typische HPLC -Probenvorbereitung sind Spritzen- und Sehnruslose Filter, die regenerierte Cellulosemembranen enthalten, aufgrund ihrer breiten Kompatibilität für Lösungsmittel eine gute Option.

Die Verwendung eines Filtergeräts, das größer als benötigt für das zubereitete Volumen ist, ist ein weiterer häufiger Fallstrick. Die Verwendung von zu großen Filtergeräten bedeutet, dass kleine Mengen der Stichprobe im Filter verbleiben, auch nachdem Vorsichtsmaßnahmen getroffen werden, um so weit wie möglich auszusteigen.

5. Was sind die Vorteile, den Filtrationsschritt ernst zu nehmen?

Ein grundlegendes Ziel der meisten Laboratorien, die an analytischen Tests beteiligt sind, besteht darin, konsistente Prozesse zu entwickeln, die konsistente Ergebnisse stützen - und die eine konsistente Filterung erfordern. Die Auswahl eines Filtrationsgeräts mit der richtigen Porengröße und der Retentionseigenschaften trägt zur Gewährleistung einer effektiven Partikelentfernung bei, während die Auswahl der angemessenen Größe und des Designs der Filtereinheit dazu beitragen kann, den Probenverlust zu minimieren. Eine gute Filtration hilft auch beim Schutz der Säule und erweitert möglicherweise die Lebensdauer sowohl des Injektors als auch der Säule.

Abschluss

HPLC ist eine wertvolle Technik für Lebenswissenschaft und biopharmazeutische Forschung, da sie genaue, reproduzierbare Ergebnisse liefert. Diese Genauigkeit hängt von der Integrität der HPLC-Probe ab, und der beste Weg, um hochwertige Proben sicherzustellen, besteht darin, mit den besten Werkzeugen zu beginnen. Mit Lösungen für ultrales Wasser, Standardvorbereitung, Pipetten, Tipps und Filter berichten die HPLC -Probenvorbereitungslinie für jedes Detail. Automatisierte Lösungen und Software tragen auch dazu bei, die Vorbereitung der Probe zu optimieren, um saubere Proben für saubere Ergebnisse zu liefern.

Weitere Diskussionen über HPLC -Probenvorbereitungslösungen sind begrüßt!