Milline puhver sobib teie HPLC mobiilse etapi jaoks kõige paremini?

Optimaalse eraldamise ja usaldusväärsete tulemuste saavutamiseks on ülioluline oma HPLC mobiilse faasi jaoks õige puhvri valimine. Puhvritel mängib olulist rolli pH kontrollimisel, mis mõjutab otseselt analüütide, eriti ioniseeritavate analüütide säilitamist ja elueerimist. Siit leiate, mida peate oma rakenduse jaoks parima puhvri valimisel arvestama.

1️⃣ Saage aru oma analüütidest

Puhvri valik sõltub suuresti teie analüütide PKA -st. Ideaalis peaks teie liikuva faasi pH olema puhvri PKA -st ± 1 ühiku piires, et tagada efektiivne puhverdusvõime. Näiteks kui teie analüüdi PKA on 4,5, sobiks selle väärtuse ümber PKA -ga fosfaatpuhver, mis võimaldab teil säilitada analüüti soovitud ionisatsiooni olekus.

2️⃣ Puhveritüübid

Fosfaatpuhvrid: laialdaselt kasutatud nende efektiivse puhverdamise vahemiku (pH 2-8) tõttu. Need ühilduvad paljude analüütidega ja pakuvad head stabiilsust.
Atsetaatpuhvrid: sobivad madalamate pH -rakenduste jaoks, tavaliselt vahemikus pH 3,6 kuni 5,6. Need on efektiivsed happeliste analüütide jaoks.
Tris -puhvrid: tavaliselt kasutatakse bioloogilistes rakendustes, eriti valkudes, kuid ei pruugi olla ideaalne ultraviolettkiirguse tuvastamiseks nende neeldumise tõttu.

3️⃣ kaaluge ühilduvust

Veenduge, et valitud puhver ühilduks teie HPLC süsteemi ja veeru statsionaarse faasiga. Mõned puhvrid, näiteks tsitraat, võivad aja jooksul roostevabast terasest komponente söövitada, nii et kaaluge oma seadme pikaajalist mõju.

4️⃣ Monitori puhvri kontsentratsioon

Kontsentratsioon 25-50 mm on enamiku rakenduste jaoks tavaliselt efektiivne. Kõrgemad kontsentratsioonid võivad suurendada maksimaalset kuju ja eraldusvõimet, kuid võib põhjustada ka suurenenud tagasirõhku ja potentsiaalset sademeid.