Buruko gasa kromatografia lagina prestatzea
Lagin prestaketa egokia ezinbestekoa da emaitza zehatzak eta erreproduzitzaileak lortzeko buruko gasaren kromatografia azterketan. Hurrengo pausoak laginak prestatzeko oinarrizko gogoetak azaltzen dira, buruko espazioa aztertzeko.
1. Hautatu eskuineko lagina
Botere egokia aukeratzea ezinbestekoa da buruko espazioaren laginketa arrakastatsua lortzeko. Bihotze arruntak 6ml, 10ml eta 20ml dira, 20ml ontziak gehien erabiltzen direnak. Botokak hautatzerakoan kontuan hartu beharreko faktore nagusiak hauek dira:
Materiala: ontziak beira edo plastikoz egiten dira normalean. Beirazko ontziak hobeto egokitzen dira lagin lurrunkorretarako, lixibitate kutsatzailearengatik.
Zigilatzeko mekanismoa: ontziak crimp edo torloju txapelekin zigilatu daitezke. Crimp Vials-ek hermetikoko zigilua eskaintzen du, eta hori oso garrantzitsua da buruko espazioaren osotasuna mantentzeko.
Septum kalitatea: ontziak zigilatzeko erabiltzen den SPTAk kutsatzaileak izan ditzake kalitate eskasak badira. Bilatu septa buruko espazioetarako diseinatutako septa, buru-espazioan lixiba lixiba gutxiago baitira.
2. Laginaren bolumena eta diluzioa
Boterearen laginaren bolumena kritikoa da buruko espazioaren kontzentrazio optimoa lortzeko. Orokorrean, laginaren bolumena 1 \ / 3 eta 1 \ / 2 ingurukoa izan behar da, gas fasearentzako buru-espazioa egokia emateko.
Diluzioa: laginaren kontzentrazioa oso altua bada, buruko espazioa saturatu daiteke, kuantitatibo zehaztugabeak sorraraztea. Lagina disolbatzaile egoki batekin diluituz analisi lurrunkorren nahi den kontzentrazioa lortzen lagun dezake.
3. Tenperatura kontrolatzea
Tenperaturak buruko espazioan laginketa kritikoa du analitokien hegazkortasunari eta gasaren fasean zatitzea eragiten baitu.
EQUILIBRATION TEMPEINGE: lagineko ontziak tenperatura kontrolatu batera berotu beharko lirateke, konposatu lurrunkorrak abiadurara abiarazteko. Tenperatura optimoa aztertzen ari diren analitiko zehatzen araberakoa da eta metodoaren garapenean zehaztu beharko litzateke.
EQUILIBRATION Garaia: lagina orekara iristeko denbora nahikoa baimendu. Hau aldatu daiteke matrize laginaren eta konposatuen hegazkortasunaren arabera. Oreka tipikoen ordutegiak 30 minutu eta ordu batzuk dira.
4. Kutsadura gutxitu
Kutsadurak buruko espazioaren kromatografiaren zehaztasunean eragin dezake. Kutsatzeko arriskua minimizatzeko, egin hau:
Erabili aurrez garbitutako ontziak: erabili beti aurrez garbitutako ontziak, ontzi edo manipulazioan kutsatzaileen sarrera ekiditeko.
Metodo zuriak: exekutatu metodoa hutsuneak kutsadura-iturri potentzialak identifikatzeko. Horrek lagin huts bat aztertzea dakar prestaketa eta prozedura analitiko berdinak erabiliz, nahigabeko gailurrik ez dela kromatograman agertzen ziurtatzeko.
Ingurumen baldintzak kontrolatuak: Egin laginak prestatzea ingurune garbian, aireko kutsatzaileen esposizioa minimizatzeko.
5. Aukeratu eskuineko buruko espazioa teknika
Lehen aipatu bezala, buruko espazioa laginketa estatikoa edo dinamikoa izan daiteke. Teknika aukeratzea aplikazioaren eta laginaren izaeraren araberakoa da.
Headspace estatikoa: Metodo hau egokia da aplikazio gehienetarako eta oso erabilia da likido eta solidoetan konposatu lurrunkorrak aztertzeko. Analitek buruko espazioan modu naturalean partizioan sartzeko aukera ematen die gas osagarria sartu gabe.
Headspace dinamikoa: teknika hau hobeto egokitzen da konposatu lurrunkorrak harrapatzeko etengabeko purga behar duten laginetarako. Askotan erabiltzen da, hala nola, ingurumen-probak eta elikagaien analisia, non laginak analitoko kontzentrazio baxuak izan ditzakete.
