Ki tanpon ki pi bon pou faz mobil HPLC ou a?
Chwazi tanpon an dwa pou HPLC faz mobil ou a se kritik pou reyalize separasyon optimal ak rezilta serye. Buffers jwe yon wòl enpòtan nan kontwole pH, ki dirèkteman afekte retansyon an ak elution nan analytes, espesyalman sa yo ki ionizable. Isit la ki sa ou bezwen konsidere lè chwazi pi bon zòn de defans la pou aplikasyon ou an.
1 konprann analytes ou yo
Chwa a nan tanpon lajman depann sou PKA a nan analytes ou. Idealman, pH la nan faz mobil ou yo ta dwe nan ± 1 inite nan PKA tanpon an nan asire efikas kapasite tampon. Pou egzanp, si analyte ou a gen yon PKA nan 4.5, yon tanpon fosfat ak yon PKA alantou valè sa a ta dwe apwopriye, ki pèmèt ou kenbe analyte a nan eta ionization vle li yo.
2 kalite tanpon
Buffers fosfat: lajman itilize akòz efikas ranje tampon yo (pH 2-8). Yo konpatib ak anpil analytes epi yo bay bon estabilite.
ACETATE tanpon: apwopriye pou pi ba aplikasyon pou pH, tipikman sòti nan pH 3.6 a 5.6. Yo efikas pou analytes asid.
TRIS tanpon: souvan itilize nan aplikasyon pou byolojik, patikilyèman pou pwoteyin, men li ka pa ideyal pou deteksyon UV akòz absorption yo.
3⃣ Konsidere konpatibilite
Asire ke tanpon an chwazi se konpatib ak sistèm HPLC ou ak faz nan estasyonè nan kolòn ou an. Kèk tanpon, tankou Sitrat, ka rouye konpozan asye pur sou tan, se konsa konsidere efè alontèm sou ekipman ou.
4⃣ Siveye konsantrasyon tanpon
Yon konsantrasyon nan 25-50 mM se tipikman efikas pou pifò aplikasyon pou. Pi wo konsantrasyon ka amelyore fòm pik ak rezolisyon men li ka tou mennen nan ogmante presyon ak presipitasyon potansyèl yo.
