HPLC 모바일 단계에 가장 적합한 버퍼는 무엇입니까?
최적의 분리 및 신뢰할 수있는 결과를 달성하는 데 HPLC 모바일 단계에 대한 올바른 버퍼를 선택하는 것이 중요합니다. 버퍼는 pH를 제어하는 데 중요한 역할을하며, 이는 분석 물, 특히 이온화 가능한 분석 물의 보유 및 용리에 직접적인 영향을 미칩니다. 애플리케이션에 가장 적합한 버퍼를 선택할 때 고려해야 할 사항은 다음과 같습니다.
1 19 년 분석 물을 이해합니다
버퍼의 선택은 주로 분석 물의 PKA에 따라 다릅니다. 이상적으로는 이동 단계의 pH가 효과적인 버퍼링 용량을 보장하기 위해 버퍼의 PKA의 ± 1 단위 내에 있어야합니다. 예를 들어, 분석 물의 PKA가 4.5 인 경우이 값 주위에 PKA를 갖는 포스페이트 완충액이 적합하여 원하는 이온화 상태에서 분석 물을 유지할 수 있습니다.
2ø 버퍼 유형
인산 완충제 : 유효 완충 범위 (pH 2-8)로 인해 널리 사용됩니다. 그것들은 많은 분석 물과 호환되며 우수한 안정성을 제공합니다.
아세테이트 완충제 : 일반적으로 pH 3.6 내지 5.6 범위의 낮은 pH 응용에 적합합니다. 그것들은 산성 분석 물에 효과적입니다.
트리스 버퍼 : 생물학적 응용, 특히 단백질에 일반적으로 사용되지만 흡광도로 인한 UV 검출에는 이상적이지 않을 수 있습니다.
3️. 호환성을 고려하십시오
선택한 버퍼가 HPLC 시스템 및 열의 고정 단계와 호환되는지 확인하십시오. 구연산염과 같은 일부 완충제는 시간이 지남에 따라 스테인레스 스틸 구성 요소를 부식시킬 수 있으므로 장비에 장기적인 영향을 고려하십시오.
4️ation 모니터 버퍼 농도
25-50mm의 농도는 일반적으로 대부분의 응용 분야에서 효과적입니다. 더 높은 농도는 피크 모양과 해상도를 향상시킬 수 있지만 배압 및 잠재적 강수량을 증가시킬 수도 있습니다.
