कुन बफर तपाईको HPLC मोबाइल चरणको लागि उत्तम हो?
तपाईंको HPLC मोबाइल चरणको लागि सही बफर छनौट गर्दै इष्टतम छुट्टै परिणामहरू र भरपर्दो परिणामहरू प्राप्त गर्नका लागि महत्त्वपूर्ण छ। बफरहरू नियन्त्रण गर्न को लागी एक महत्वपूर्ण भूमिका खेल्छ, जसले विश्लेषणको अवधारण र सावधानीलाई प्रत्यक्ष रूपमा प्रभाव पार्दछ, विशेष गरी आयम जो आईएनपीआईज योग्य छन्। यहाँ तपाईंको अनुप्रयोगको लागि उत्तम बफर चयन गर्दा तपाईंले विचार गर्नुपर्ने हुन्छ।
1️⃣ तपाईंको विश्लेषणहरू बुझ्नुहोस्
बफरको छनौट मुख्यतया तपाइँको विश्लेषणको पुकामा निर्भर गर्दछ। आदर्श रूपमा, तपाईंको मोबाइल चरणको पीएचपीको पीएचरको पीएचरको PKA मा प्रभावी बफरिंग क्षमता सुनिश्चित गर्नको लागि ± 1 एकाई भित्र हुनुपर्दछ। उदाहरण को लागी, यदि तपाइँको विश्लेषण छ, यो मानको एक pkopate बफर छ, यो मानको एक phophat बफर उपयुक्त छ, तपाइँले यसको इच्छित आयनलीकरण राज्यमा विश्लेषण गर्न अनुमति दिनुहुन्छ।
2️⃣ बफर प्रकारहरू
फास्फेट बफरहरू: उनीहरूको प्रभावी बफरिंग दायरा (PH 2-8) को कारण व्यापक प्रयोग गरियो। तिनीहरू धेरै विश्लेषकहरूसँग मिल्दछन् र राम्रो स्थिरता प्रदान गर्छन्।
एसिट बफरहरू: तल्लो PH अनुप्रयोगहरूको लागि उपयुक्त, सामान्यतया PH 6.6 देखि .6..6 देखि ph .6 .6 को बज्यो। तिनीहरू अम्लीय विश्लेषकहरूको लागि प्रभावकारी छन्।
ट्ररिज बफरहरू: जैविक अनुप्रयोगहरूमा सामान्यतया प्रयोग, खास गरी प्रोटीनको लागि, तर उनीहरूको शोषणको कारण UV पहिचानको लागि उपयुक्त नहुन सक्छ।
3️⃣ अनुकूलतालाई विचार गर्नुहोस्
सुनिश्चित गर्नुहोस् कि चयनित बफर तपाईको HPLC प्रणाली र तपाईंको स्तम्भको स्थिर चरणसँग मिल्दो छ। Citrate केहि बफरहरू, जस्तै citrate स्टेनलेस स्टेनलेस स्टील इस्पात कम्पोनेन्टहरू समय बित्दछ, त्यसैले तपाईंको उपकरणमा दीर्घकालीन प्रभावहरू विचार गर्नुहोस्।
4 ️⃣ मोनिटर बफर एकाग्रता
2--500 मिलको एकाग्रता धेरै अनुप्रयोगहरूको लागि सामान्यतया प्रभावकारी हुन्छ। उच्च सांद्रताहरूले शिखर आकार र रिजोलुसन वृद्धि गर्न सक्दछ तर ब्याकप्रेसरी र सम्भावित वर्षा पनि हुन सक्छ।