Kateri medpomnilnik je najboljši za vašo mobilno fazo HPLC?

Izbira pravega medpomnilnika za vašo mobilno fazo HPLC je ključnega pomena za doseganje optimalne ločitve in zanesljivih rezultatov. Medpomnilniki igrajo pomembno vlogo pri nadzoru pH, kar neposredno vpliva na zadrževanje in elucijo analitov, zlasti tiste, ki so ionizabilne. Tukaj je, kaj morate upoštevati pri izbiri najboljšega medpomnilnika za svojo aplikacijo.

1️⃣ Razumevanje svojih analitov

Izbira medpomnilnika je v veliki meri odvisna od PKA vaših analitov. V idealnem primeru bi moral biti pH vaše mobilne faze znotraj ± 1 enote PKA medpomnilnika, da se zagotovi učinkovita zmogljivost varovanja. Na primer, če ima vaš analit PKA 4,5, bi bil primeren fosfatni pufer s PKA okoli te vrednosti, ki vam omogoča vzdrževanje analita v želenem stanju ionizacije.

2️⃣ Vrste medpomnilnikov

Fosfatni puferji: pogosto se uporabljajo zaradi učinkovitega območja pufra (pH 2-8). Združljivi so s številnimi analiti in zagotavljajo dobro stabilnost.
Acetatni puferji: primerni za nižje pH aplikacije, običajno od pH 3,6 do 5,6. Učinkoviti so za kisle analize.
TRIS puferji: Običajno se uporabljajo v bioloških aplikacijah, zlasti za beljakovine, vendar zaradi njihove absorpcije morda niso idealni za odkrivanje UV.

3️⃣ Razmislite o združljivosti

Prepričajte se, da je izbrani medpomnilnik združljiv s sistemom HPLC in stacionarno fazo vašega stolpca. Nekateri puferji, kot je citrat, lahko sčasoma korudirajo komponente iz nerjavečega jekla, zato razmislite o dolgoročnih učinkih na vašo opremo.

4️⃣ Spremljajte koncentracijo pufra

Koncentracija 25-50 mm je običajno učinkovita za večino aplikacij. Višje koncentracije lahko povečajo vrhunsko obliko in ločljivost, lahko pa tudi privedejo do povečanega hrbtnega pritiska in potencialnih padavin.