Sommige monsters kan steeds nie direk na voorbehandeling ingespuit word nie. Derivatisering is nodig om verbindings sonder UV-absorpsie of fluoressensie waarneembaar deur UV- of fluoressensie-detektors te maak.

Verbeter sensitiwiteit
Verbeter skeiding (kwaliteitverandering)

Moontlike probleme sluit in monsterverlies, kontaminasie, onvolledige reaksies of veelvuldige neweprodukte, wat akkuraatheid kan beïnvloed of foute kan veroorsaak.

Monster filtrasie

LC-monsters moet eenvormig en deeltjievry wees; deeltjies kan die inspuiter beskadig of die kolom blokkeer. Stappe sluit in:

Skud die monster voor inspuiting en kyk vir deeltjies, troebelheid of emulsies
As deeltjies waargeneem word, filtreer die monster met 'n membraan wat ≥0.15μm deeltjies kan behou

Potensiële probleme: monsterbesoedeling, adsorpsie wat komponentkonsentrasie verminder, en oplosmiddelverdamping wat foute veroorsaak.

Onttrekking Metodes

Ekstraksie skei analiete van mede-oplosmiddels of verwyder interfererende stowwe (bv. proteïene). Organiese oplosmiddels moet lae toksisiteit, vlugtig, laag in onsuiwerhede wees, en die monster goed oplos.

Algemene oplosmiddels: diëtieleter, etielasetaat, dichloormetaan, chloroform, benseen of mengsels.

Na ekstraksie kan monsters direk ingespuit of gekonsentreer word om analietkonsentrasie en sensitiwiteit te verhoog.

Wateroplosbare monsterekstraksie

Suur komponente en soute: onttrek onsuiwerhede met organiese oplosmiddel, verstel tot suur, onttrek of spuit dan uit; of droog onder N₂ en los op in toepaslike oplosmiddel voor inspuiting.
Basiese komponente en soute: onttrek onsuiwerhede met organiese oplosmiddel, pas by basies aan, onttrek of spuit dan uit; of droog onder N₂ en los op in toepaslike oplosmiddel voor inspuiting.
Neutrale komponente: onttrek onsuiwerhede met organiese oplosmiddel, ontleed dan direk deur omgekeerde-fase chromatografie.

Vetoplosbare monsterekstraksie

Onttrek met organiese oplosmiddel of spuit direk; of droog onder N₂ en los op in toepaslike oplosmiddel voor inspuiting.

Bronne van kontaminasie

Potensiële bronne van kontaminasie in ontleding:

Soort besoedeling	Bron	Voorkomingsmaatreëls
Omgewing	Skadelike gasse, stof, aërosols	Hou instrumentkamer geïsoleer, skoon; installeer AC; beheer humiditeit <70%; voorkom vog, korrosie, vibrasie
Houers	Glas, keramiek, kwarts, plastiek laboratoriumware	Kies toepaslike houers per monstertipe; maak deeglik skoon
Reagense	Nie-chromatografie-graad reagense	Gebruik chromatografie-graad, hoë-suiwerheid, of analitiese-graad reagense

Standaard Oplossing Voorbereiding

Berei eers interne standaardoplossing voor; gebruik dieselfde bondel in standaarde en monsters om foute te verminder
Stowwe moet chromatografie-graad en stabiel wees
Bêre standaardoplossings in bruin bottels by lae temperatuur
Vir vitamiene, gebruik bruin volumetriese flesse of beskerm teen lig

Algemene probleme in monstervoorbehandeling en oplossings

Probleem	Oorsaak	Oplossing
Onverwante pieke in chromatogram	Filter besoedeling	Week filter in monster oplosmiddel en toets inspuiting Verander filtertipe Gebruik alternatiewe skoonmaaktegnieke
Lae piek reaksie (veral lae-konsentrasie monsters)	Adsorpsie op filteroppervlak	Verander filtertipe Verwerk alle monsters onder dieselfde toestande Gebruik alternatiewe skoonmaaktegnieke
Lae herstel	Onvolledige onttrekking	Verhoog ekstraksie tyd, gebruik warm oplosmiddel Pas die skoonmaakmetode aan
Verruimde pieke, verkorte kolomleeftyd	Monsterinterferensie en kontaminasie	Verbeter skoonmaakmetode
Swak presisie	Onvolledige herstel	Optimaliseer of vervang derivatisering, skeiding, onttrekking of ander toestande Gebruik outomatiese hantering om akkuraatheid te verbeter

Uiters hoë\/lae temperatuur en ligblootstelling-effekte op monsterstabiliteit: teorie en metodologie

Terug na lys