Voorbeeldvoorbereiding en filtrasie: om kwaliteit in chromatografie te verseker

Behoorlike monstervoorbereiding - skoonhouers, verwyder deeltjies, verryk analiete en, indien nodig, afgeleide derivatize - uitskakel meer as 90% van die basislyngeluid en druk -anomalieë, wat skerp pieke en stabiele basislyne verseker. As u hier misluk, lei dit tot 'n piekstert, dryfbasislyne of kolomblokkering.

1. Besoedeling en matriksinmenging

Probleem

• Basislyndrywing en stygende geraas obscure geringe pieke.

• Onverwagte pieke kom uit uitgeligte onsuiwerhede.

• Swak reproduceerbaarheid tussen inspuitings.
  

  

Oorsaak

• Residues in glasware: onvolledige suurspoelde blare silikate; Plastiekware kan weekmakers loog.

• Skoonmaakmiddels: Spoororganics in spoeloplosmiddels bly geadsorbeer.

• Omgewingsdeeltjies: Lab Air Dust and VOCS Adsorb op oop monsters.
  

  

Oplossing

1. Streng skoonmaak SOP: Suur week → ultrasoniese suiwer water spoel → stikstof droog vir glasware; toegewyde skoonmaakmiddel vir plastiek.

2. Voorverfiltrasie: Sentrifuge by 3000 rpm vir 10min of gebruik 'n 5μm voorgereg voor die finale 0,22 µm filtrasie.

3. Beheerde omgewing: Voer voorbereidings uit in 'n laminêre vloei om die lugbesoedeling te verminder.
   
   

2. filter verstopping van onversoenbare filters

Probleem

• Autosampler -drukalarms en gereelde naaldvervangings.

• Verlaagde vloeitempo, inkonsekwente piekareas.

• Verhoogde terugdruk en kolominlaatblokkering.
  

  

Oorsaak

• Membraan -wanaanpassing: nylon swel in organiese oplosmiddels; PVDF kruip by verhoogde temperatuur.

• Verkeerde poriegrootte: 0,22 µm filters val fyn deeltjies, maar verminder die vloei; 0,45 µm filters kan nog steeds met mikrokristalle verstop word.

Oplossing

1. Membraan -oplosmiddelmatriks: Gebruik hidrofiliese PES \ / MCE vir waterige (pH4–8), hidrofobiese ptfe \ / pvdf vir organiese fases; Vermy sellulose -asetaat in sterk sure.

2. Kies behoorlike poriegrootte: Gebruik 0,45 μm vir roetine HPLC, 0,22 μm vir UHPLC of spoorwerk; Prefilter hoë -viskositeitsmonsters deur 5μm.

3. Monitor ΔP: Spoor drukverhoging; Vervang die filter wanneer die rugdruk> 15%toeneem.
   
   

   

3. oplosmiddel - membraan chemiese onverenigbaarheid

Probleem

• Gefiltreerde monster lyk bewolk of dra deeltjies.

• Nuwe basislyngeluid of spookpieke na filtrasie.

• Verminderde analietherstel.
  

  

Oorsaak

• Swelling van oplosmiddel: THF swel ptfe, verander poriegrootte en vloei.

• Membraan -loogbare produkte: nylon in miersuur stel oligomere vry wat op 214 nm absorbeer.

Oplossing

1. Verenigbaarheidstoets: Week filter in beoogde oplosmiddel vir 24 uur by 25 ° C; Inspekteer vir swelling of gewigsverandering.

2. Pilot LC -MS -toets: Vergelyk die totale ioonchromatogramme van gefiltreerde en ongefilterde monster.

3. Gebruik lae -loogfilters: Ultrasoniese gesweisde PTFE of PES sonder kleefmiddels.
   
   

Kwaliteitstelsel: Verdediging - monitering - korreksie

Verdediging

Standaardiseer SOP's vir skoonmaak, filtrasie en membraankeuse om foute te voorkom.

Monitering

Teken die vloeitempo, rugdruk en basis -monster basislyne op om drywing op te spoor.

Korreksie

Handhaaf 'n foutboomanalise vir vinnige wortel -oorsaak -identifikasie en regstellende werking.

'Analitiese presisie begin met die onderskep van die kleinste deeltjie.'