ولا يزال من غير الممكن حقن بعض العينات مباشرة بعد المعالجة المسبقة. مطلوب الاشتقاق لصنع مركبات بدون امتصاص للأشعة فوق البنفسجية أو مضان يمكن اكتشافه بواسطة كاشفات الأشعة فوق البنفسجية أو الفلورسنت.

يحسن الحساسية
يعزز الفصل (تغيير الجودة)

تشمل المشكلات المحتملة فقدان العينة، أو التلوث، أو التفاعلات غير المكتملة، أو المنتجات الثانوية المتعددة، مما قد يؤثر على الدقة أو يؤدي إلى حدوث أخطاء.

ترشيح العينة

يجب أن تكون عينات LC موحدة وخالية من الجسيمات؛ قد تؤدي الجسيمات إلى إتلاف الحاقن أو انسداد العمود. تشمل الخطوات ما يلي:

هز العينة قبل الحقن وتحقق من وجود جزيئات أو تعكر أو مستحلبات
إذا تمت ملاحظة الجزيئات، قم بتصفية العينة باستخدام غشاء يمكنه الاحتفاظ بجزيئات ≥0.15μm

القضايا المحتملة: تلوث العينة، والامتصاص مما يقلل من تركيز المكونات، وتبخر المذيبات مما يسبب أخطاء.

طرق الاستخراج

يفصل الاستخلاص التحاليل عن المذيبات المشتركة أو يزيل المواد المسببة للتداخل (مثل البروتينات). يجب أن تكون المذيبات العضوية منخفضة السمية، ومتطايرة، ومنخفضة الشوائب، وتذيب العينة جيدًا.

المذيبات الشائعة: إيثر ثنائي إيثيل، أسيتات إيثيل، ثنائي كلورو ميثان، كلوروفورم، بنزين، أو مخاليط.

بعد الاستخراج، يمكن حقن العينات مباشرة أو تركيزها لزيادة تركيز الحليلة وحساسيتها.

استخراج العينات القابلة للذوبان في الماء

المكونات الحمضية والأملاح: استخلاص الشوائب باستخدام مذيب عضوي، وضبطها على الحموضة، ثم استخلاصها أو حقنها؛ أو يجفف تحت N₂ ويذوب في المذيب المناسب قبل الحقن.
المكونات الأساسية والأملاح: استخلاص الشوائب باستخدام المذيبات العضوية، وضبطها على القاعدة، ثم استخلاصها أو حقنها؛ أو يجفف تحت N₂ ويذوب في المذيب المناسب قبل الحقن.
المكونات المحايدة: يتم استخلاص الشوائب باستخدام المذيبات العضوية، ثم يتم تحليلها مباشرة بواسطة كروماتوجرافيا الطور العكسي.

استخراج العينات القابلة للذوبان في الدهون

استخرجه باستخدام مذيب عضوي أو احقنه مباشرة؛ أو يجفف تحت N₂ ويذوب في المذيب المناسب قبل الحقن.

مصادر التلوث

المصادر المحتملة للتلوث في التحليل:

نوع التلوث	المصدر	تدابير الوقاية
البيئية	الغازات الضارة والغبار والهباء الجوي	إبقاء غرفة الأدوات معزولة ونظيفة؛ تثبيت التيار المتردد التحكم في الرطوبة <70%؛ منع الرطوبة والتآكل والاهتزاز
حاويات	الزجاج والسيراميك والكوارتز وأدوات المختبرات البلاستيكية	حدد الحاويات المناسبة لكل نوع العينة؛ نظيفة تماما
الكواشف	الكواشف غير اللوني	استخدم الكواشف من الدرجة اللونية أو عالية النقاء أو من الدرجة التحليلية

إعداد الحل القياسي

قم بإعداد الحل القياسي الداخلي أولاً؛ استخدم نفس الدفعة في المعايير والعينات لتقليل الأخطاء
يجب أن تكون المواد من الدرجة الكروماتوغرافية ومستقرة
تخزين الحلول القياسية في زجاجات البني في درجة حرارة منخفضة
بالنسبة للفيتامينات، استخدم قوارير حجمية بنية اللون أو احفظها من الضوء

المشاكل الشائعة في المعالجة المسبقة للعينات والحلول

مشكلة	السبب	الحل
قمم غير ذات صلة في اللوني	تلوث الفلتر	نقع مرشح في عينة المذيبات وحقن الاختبار تغيير نوع الفلتر استخدم تقنيات التنظيف البديلة
استجابة الذروة المنخفضة (خاصة العينات منخفضة التركيز)	الامتزاز على سطح المرشح	تغيير نوع الفلتر معالجة جميع العينات في ظل نفس الظروف استخدم تقنيات التنظيف البديلة
انتعاش منخفض	استخراج غير مكتمل	زيادة وقت الاستخلاص، استخدم المذيب الساخن ضبط طريقة التنظيف
توسيع القمم، وتقصير عمر العمود	تدخل العينة والتلوث	تحسين طريقة التنظيف
دقة سيئة	التعافي غير مكتمل	تحسين أو استبدال الاشتقاق أو الفصل أو الاستخراج أو الشروط الأخرى استخدم المعالجة الآلية لتحسين الدقة

تأثيرات التعرض لدرجات الحرارة والضوء المنخفضة للغاية على استقرار العينة: النظرية والمنهجية

العودة إلى القائمة