تحضير العينة والترشيح: ضمان الجودة في الكروماتوغرافيا

العينة المناسبة الإعدادية - الحاويات الشهيرة ، وإزالة الجسيمات ، وإثراء التحليلات ، وإذا لزم الأمر ، فإن اشتقاقها - تزيد عن 90 ٪ من الضوضاء الأساسية وشذوذ الضغط ، وضمان قمم حادة وخطوط الأساس المستقرة. يؤدي الفشل هنا إلى ذروة خلق الأساس أو الانجراف أو انسداد العمود.

1. التلوث والتداخل المصفوفة

مشكلة

• خط الأساس الانجراف وارتفاع الضوضاء غموض قمم بسيطة.

• تظهر القمم غير المتوقعة من الشوائب التي تم تربيتها.

• سوء التكاثر بين الحقن.
  

  

سبب

• بقايا في الأواني الزجاجية: يترك الغسيل الحمضي غير المكتمل السيليكات. يمكن للبلاستيك أن يفسد الملدنات.

• عوامل التنظيف: تتبع المواد العضوية في المذيبات الشحنة.

• الجسيمات البيئية: غبار الهواء المختبري و ADSOSSOSS على عينات مفتوحة.
  

  

حل

1. تنظيف صارم SOP: حمض نقع ← شطف بالموجات فوق الصوتية النقية → النيتروجين جاف للأواني الزجاجية ؛ منظفات مخصصة للبلاستيك.

2. ما قبل الترشيح: الطرد المركزي عند 3000 دورة في الدقيقة لمدة 10 دقائق أو استخدم مسبقًا مسبقًا 5µm قبل الترشيح النهائي 0.22µm.

3. بيئة خاضعة للرقابة: أداء الإعدادية في غطاء محرك الصفيحة لتقليل التلوث المحمول جوا.
   
   

2. ترشيح الانسداد من المرشحات غير المتوافقة

مشكلة

• إنذارات الضغط التلقائي وبدائل الإبرة المتكررة.

• انخفاض معدل التدفق ، مناطق الذروة غير المتسقة.

• ارتفاع الضغط على الخلفية والانسداد مدخل العمود.
  

  

سبب

• عدم تطابق الغشاء: يتضخم النايلون في المذيبات العضوية ؛ PVDF زحف في درجة حرارة مرتفعة.

• حجم المسام غير الصحيح: عوامل تصفية 0.222 ميكرومتر ، قم بتقليل الجسيمات الدقيقة ولكنها تقلل من التدفق ؛ قد لا تزال مرشحات 0.45µm تسد مع البلورات الدقيقة.

حل

1. مصفوفة الغشاء - مئوية: استخدام pes \ / mce للمائي (ph4–8) ، ptfe مسعور \ / pvdf للمراحل العضوية ؛ تجنب خلات السليلوز في الأحماض القوية.

2. حدد حجم المسام المناسب: استخدم 0.45µm لـ HPLC الروتيني ، 0.22µm لأعمل UHPLC أو النزرة ؛ مرفيات مسبقة الساحة عالية السمنة من خلال 5µm.

3. مراقبة ΔP: ارتفاع ضغط ارتفاع. استبدال المرشح عندما يزيد ضغط الخلفية> 15 ٪.
   
   

   

3. عدم توافق المواد الكيميائية للغشاء

مشكلة

• العينة المصفاة تبدو غائمة أو تحمل جزيئات.

• ضوضاء أساسية جديدة أو أشباح قمم ما بعد الترشيح.

• انخفاض الانتعاش التحليل.
  

  

سبب

• تورم المذيبات: THF Swells PTFE ، تغيير حجم المسام وتدفق.

• مواد الغشاء: النايلون في حمض الفورميك يطلق القلة التي تمتص عند 214 نانومتر.

حل

1. اختبار التوافق: مرشح نقع في المذيب المقصود لمدة 24 ساعة عند 25 درجة مئوية ؛ فحص التورم أو تغيير الوزن.

2. اختبار التجريبي LC - MS: قارن اللوني الإجمالي الأيوني من عينة تصفيتها مقابل عينة غير مفيدة.

3. استخدام المرشحات المنخفضة: PTFE بالموجات فوق الصوتية أو PTFE أو PES بدون مواد لاصقة.
   
   

نظام الجودة: التصحيح الدفاعي - مراقبة

الدفاع

توحيد SOPs للتنظيف والترشيح واختيار الغشاء لمنع الأخطاء.

يراقب

معدل تدفق السجل ، والضغط الخلفي ، وخطوط الأساس الفارغة للكشف عن الانجراف.

تصحيح

الحفاظ على تحليل شجرة الصدع لتحديد الجذر السريع والعمل التصحيحي.

"تبدأ الدقة التحليلية مع اعتراض أصغر جسيم."