1. لا يوجد انسداد عمود HPLC الخاص بك
2. الحساسية العليا لعمود HPLC الخاص بك
3. دقة أعلى
4. عدد أقل من الذروة الإيجابية
5. ضوضاء أقل خلفية
6. لا يمكن ترشيحها
أربع خطوات لإعداد عينة HPLC
دعنا نقنعك كيف يمكنك توفير الوقت مع حلولنا وفي الوقت نفسه زيادة استنساخ نتائجك:
الخطوة 1. تحليل الحلول المائية
تعتبر جودة المياه رديئة واحدة من أكبر العوامل المساهمة في المشكلات أثناء تشغيل HPLC. يمكن أن تتفاعل شوائب المياه في المرحلة المتنقلة مع العمود وتؤدي إلى ضعف الدقة والحساسية أو قمم غير متوقعة في الكروماتوجراف ، والتي يشار إليها عادة باسم قمم الأشباح. إن استخدام المياه الفائقة يقلل بشكل كبير من خطر التلوث مع الكربونات العضوية والكائنات الحية الدقيقة والسموم الداخلية والرنزال و DNAse. ومع ذلك ، فإن المياه الفائقة متاحة للشراء ، فإن استخدام نظام تنقية المياه في المختبر الخاص بك هو أسهل طريقة لضمان المياه الفائقة عالية الجودة. تعتبر مياه النوع 1 من الدرجة التي تلبي معايير ASTM و NCCLS و ISO و USP الخيار الأفضل لتطبيقات HPLC.
الخطوة 2. إعداد المعايير
يمكن أن يكون إعداد معايير تحديد المركب وتقديره عملية مملة وتستغرق وقتًا طويلاً. من الصعب وزنه للصلبة الصلبة بحيث يمكن استخدام حجم محدد مسبقًا من المذيبات ، ويمكن أن تكون النفايات بسبب الخطأ مكلفة - خاصة عند العمل مع الأدوية. عوامل أخرى مثل درجة الحرارة تزيد من تعقيد التحضير القياسي. تقلبات درجة الحرارة تغير كثافة المذيبات والمساهمة في الاختلافات الدرامية في التركيز.
باستخدام توازن يمكّن من دقة الوزن حتى عدة أماكن عشرية وأتمتة العملية عن طريق ربط الرصيد بمستو موزع المذيبات ، يضمن أعلى الدقة. يتيح استخدام البرامج مثل YAPP16 الجرعات Q-APP الحسابات التلقائية والمراقبة الجاذبية للقيم المقاسة. يضمن توثيق درجة حرارة وكثافة المذيب أيضًا تركيزات دقيقة للغاية ، خاصة عند إعداد المعايير في الأيام اللاحقة. يعد نقل البيانات المباشر من تطبيق Thermo Scientific ™ ™ Chromeleon ™ 7.2 نظام بيانات اللوني (CDS) خيارًا للتعامل مع البيانات غير الورقية مع سلامة البيانات الكاملة.
الخطوة 3. العودة إلى الأساسيات مع ماصة جيدة
غالبًا ما يتم تجاهل أهمية الأنابيب الدقيقة والدقيقة واتخاذها كأمر مسلم به. يمكن أن يكون لمستوى مهارة المستخدم والخبرة آثار كبيرة على التحليلات الحساسة مثل HPLC. يمكن أن يؤدي اختيار الماصة الصحيحة إلى تقليل الخطأ البشري والتكاليف المرتبطة بالمذيبات المهدرة.
توفر الأنابيب الميكانيكية ذات قفل وحدة التخزين حلاً بسيطًا لمنع تغييرات الحجم العرضي ، في حين أن الأنابيب الإلكترونية الأكثر تطوراً تقضي على تقلبات المستخدم لتقديم وحدات التخزين الدقيقة باستمرار. طرف ماصة هو أيضًا تفاصيل مهمة يجب مراعاتها في تحليلات HPLC. تكون نصائح الاستبقاء المنخفضة أفضل عند العمل مع المذيبات من اللزوجة المختلفة ، حيث تزيد من استعادة العينة. يمكن أن يحدث تلوث العينة أيضًا نتيجة للترشيح من طرف ماصة. على هذا النحو ، فإن نصائح مع مقاومة كيميائية عالية تحافظ على سلامة العينة.
الخطوة 4. تصفية الدقة وطول العمر
إن الاهتمام الإضافي بتصفية العينات قبل التحليل يحسن الموثوقية ويمكن أن يطيل عمر عمود HPLC عن طريق منع تأثيرات الانسداد. مرشحات المحقنة هي حل بسيط وسريع لتصفية العينات قبل كروماتوجرافيا العمود. كما هو الحال مع نصائح الأنابيب ، تتطلب المذيبات المستخدمة في HPLC مرشحات محددة لمنع الترشيح وتلوث العينة.
أغشية السليلوز مقاومة لسيمثيل سلفوكسيد (DMSO) ، الأميدات ، الكيتونات ، الإستر ، ومركبات الأثير. بالنسبة للمذيبات القاسية بشكل خاص ، تمنع أغشية polyethersulfone غير المطلية (PTFO) الترشيح وتلوث العينة. يصبح ترشيح العينة يستغرق وقتًا طويلاً عند زيادة عدد العينة. يمكن وحدات الترشيح متعددة العينة ، مثل نظام ترشيح Claristep® ، معالجة العينات دون محاقن وإعداد عينة سريع المسار دون التضحية بالجودة.
خمس مشاكل تحتاج إلى الانتباه إلى！
1. ما هي أكبر عينة من المشكلات الإعدادية التي تواجه المختبرات؟
تتعرض المختبرات لضغوط متزايدة من حيث الوقت والتكلفة ، وغالبًا ما تتعامل ليس فقط مع أعداد كبيرة من العينات ولكن أيضًا عينات من الطبيعة المختلفة. إعداد العينة هو مجال حيث يمكن أن تؤثر الاختلافات الدقيقة بين أنواع العينات أو طرق إعداد العينة والمواد المستخدمة على النتائج التي تم الحصول عليها. يمكن لضمان التوافق بين المواد في جهاز الترشيح والمذيب تقليل المشكلات ؛ على سبيل المثال ، فإن مستويات المركبات القابلة للاستخراج التي قد تتداخل مع اكتشاف التحليل.
2. ماذا يحدث عندما يخطئ عينة الإعدادية؟
قبل تطبيقات الكروماتوجرافيا السائلة عالية الأداء (HPLC) ، يتم إعداد العينات من خلال مجموعة متنوعة من الطرق ، وكلها لديها القدرة على التأثير على النتائج التحليلية من خلال التأثير على العينة التي يتم حقنها في النظام. يمكن أن يؤدي تحضير العينة غير الفعال إلى انخفاض في عمر العمود ، ومتطلبات الخدمة المتزايدة للمكونات ، والتعطل المحتمل للأجهزة ، وتقليل كفاءة فصل الكروماتوغرافيا والتكاثر ، والعديد من المشكلات الأخرى.
3. للوهلة الأولى ، يبدو الترشيح وكأنه عملية بسيطة ...
على الرغم من أن الترشيح هو جزء صغير على ما يبدو من سير عمل كبير ، إلا أن تأثير اختيار المرشح الصحيح لتطبيق معين يمكن أن يكون كبيرًا. على سبيل المثال ، يمكن أن تؤدي الطرق التي لا تزيل المادة الجسيمية الكافية إلى حظر العمود. يمكن للاختيار غير المناسب لأجهزة إعداد العينة ، في ظل ظروف معينة ، إطلاق مركبات قابلة للاستخراج في العينة ، أو ربط تحليلات الاهتمام أو إدخال أخطاء من خلال فقدان العينة - كل ذلك يؤثر على جودة وإعادة إنتاج النتائج التي تمت ملاحظتها. إذا كنت واثقًا من أن المواد الاستهلاكية للترشيح الخاصة بك لا تساهم في الأخطاء التي تتطلب إجراء تحقيقات إعادة صياغة أو تحقيقات جذر ، فستوفر المال وتمنح نفسك راحة البال.
4. ما هي "عينة الإعدادية" الأكثر شيوعًا "فشل"؟
اختيار غشاء المرشح غير الصحيح هو مشكلة واحدة نرى الكثير. يمكن أن تظهر المشكلات كقمم غريبة من المستخلصات ، والتي يمكن أن تتداخل مع اكتشاف تحليلات الاهتمام. لا يقتصر عدم توافق وسائط المرشح مع عينة أو مذيب من حيث المقاومة الكيميائية فقط على آثار الذوبان على وسائط المرشح. يمكن أن تسبب المذيبات تورمًا طفيفًا لمواد الغشاء البوليمري عندما لا تكون متوافقة تمامًا ، والتي بدورها يمكن أن تؤثر على أداء الترشيح ، مما يؤدي إلى تنظيف العينات غير الفعال. تتمثل إحدى طرق معالجة هذه المشكلة في اختيار غشاء متوافق على نطاق واسع مع كل من المذيبات المائية والعضوية. بالنسبة لإعداد عينة HPLC النموذجي ، تعد المرشحات المحقنة والحرارة التي تحتوي على أغشية السليلوز المجددة خيارًا جيدًا بسبب توافقها في المذيبات الواسع.
يعد استخدام جهاز مرشح أكبر من الحاجة إلى مستوى التحضير هو مأزق شائع آخر. يعني استخدام أجهزة تصفية الحركية للغاية أن كميات صغيرة من العينة ستبقى في المرشح ، حتى بعد اتخاذ الاحتياطات لطرد قدر الإمكان.
5. ما هي مزايا اتخاذ خطوة الترشيح على محمل الجد؟
الهدف الأساسي لمعظم المختبرات المشاركة في الاختبارات التحليلية هو تطوير عمليات متسقة تدعم نتائج متسقة - والتي تتطلب تصفية متسقة. يساعد اختيار جهاز ترشيح مع حجم المسام الأيمن وخصائص الاحتفاظ في ضمان إزالة الجسيمات الفعالة ، في حين أن اختيار الحجم والتصميم المناسبين لوحدة المرشح يمكن أن يساعد في تقليل فقدان العينة. يساعد الترشيح الجيد أيضًا على حماية العمود وربما يمتد عمر كل من الحاقن والعمود.
خاتمة
HPLC هي تقنية قيمة لعلوم الحياة والبحوث الصيدلانية الحيوية لأنها توفر نتائج دقيقة وقابلة للتكرار. تعتمد هذه الدقة على سلامة عينة HPLC ، وأفضل طريقة لضمان عينات عالية الجودة هي البدء بأفضل الأدوات. من خلال حلول للمياه الفائقة ، والإعداد القياسي ، والأنابيب ، والنصائح ، والمرشحات ، فإن خط تحضير عينة HPLC لكل التفاصيل. تساعد الحلول الآلية والبرامج أيضًا في تبسيط إعداد العينات لتقديم عينات نظيفة لتحقيق نتائج نظيفة.
يتم الترحيب بمزيد من المناقشات حول حلول إعداد عينة HPLC!
إنجليزي
الصينية
