Nümunə hazırlığı analitik nəticələrin dəqiqliyinə və etibarlılığına təsir edən maye xromatoqrafiya-kütləvi spektrometriya (LC-MS) prosesində kritik bir addımdır. Nümunə hazırlığının əsas məqsədi, lc-ms analizinə uyğun olduqlarını təmin edərək, təhlil etmək, saflaşdırmaq və cəmləşdirmək, mürəkkəb matrislərdən cəmləşdirməkdir. Bu addım, məlumat keyfiyyətinə təsir edə biləcək potensial müdaxilələrin aradan qaldırılması üçün vacibdir. Düzgün nümunə hazırlığı, proteomika, metabolomiklər, əczaçılıq analizi və ekoloji test kimi müxtəlif sahələrdə tətbiqlər üçün vacib olan analizin həssaslığını və spesifikliyini artırır.

Nümunə hazırlığının əsas vəzifələri:

Müdaxilələrin çıxarılması: Hədəf analitiklərinin aşkarlanmasına mane ola biləcək maddələri aradan qaldırın.

Analtyatların konsentrasiyası: aşkar məhdudiyyətlərini yaxşılaşdırmaq üçün analitiklərin konsentrasiyasını artırın.

Uyğunluq: Nümunələri LC-MS sistemləri tərəfindən effektiv şəkildə təhlil edə biləcək şəkildə hazırlayın.

HPLC nümunəsi hazırlığı haqqında daha çox bilmək istəyirsinizsə, bu məqaləni yoxlayın: Ən yaxşı nəticələr üçün hplc nümunə hazırlıq həlləri

LC-MS Nümunə hazırlığında ümumi üsullar

LC-MS Nümunə hazırlığında bir neçə üsul tez-tez işləyir. Hər metodun öz üstünlükləri var və analizin müəyyən tələblərinə əsasən seçilir.

1. Bərk faza çıxarılması (spe)

SPE, maye nümunələrdən analitikləri təcrid etmək üçün geniş istifadə olunur. Bu texnika, digər komponentlərin keçməsinə imkan verərkən hədəf analitikləri seçən möhkəm bir stasionar mərhələ vasitəsilə bir nümunə keçməyi əhatə edir. SPE, qan və ya sidik kimi mürəkkəb matrislər üçün xüsusilə effektivdir və bir neçə faydası təklif edir:

Yüksək bərpa dərəcələri: SPE, adətən maye maye hasilatı ilə müqayisədə daha yüksək bərpa dərəcələri verir.

Avtomatlaşdırma uyğunluğu: metod asanlıqla avtomatlaşdırıla bilər, ötürmə və səmərəliliyi artıra bilər.

2. Zülal yağışı

Protein Yağışları, zülalların bioloji nümunələrdən çıxarılması üçün sadə, lakin effektiv bir üsuldur. Bu üsul, plazma və ya serum kimi yüksək protein məzmunu olan nümunələri təhlil edərkən xüsusilə vacibdir. Çökmə zülalları ilə bu üsul matrisini asanlaşdırır və sonrakı təhlillərə müdaxiləni azaldır.

Tez və səmərəli: Yaxşı bərpa dərəcələrini qoruyarkən nümunələrin sürətli işlənməsinə imkan verir.

3. Maye-maye hasilatı (lle)

LLE, iki imiscilable maye içərisində, adətən sulu bir mərhələdə və üzvi bir həllediciyə əsaslanan analitləri ayırır. Bu texnika qütb qeyri-qütb və ya orta dərəcədə polar birləşmələri kompleks sulu matrislərdən çıxarmaq üçün faydalıdır.

Çox yönlü tətbiq: LLE, müxtəlif nümunə həcmləri və növləri üçün uyğunlaşdırıla bilər, geniş tətbiq üçün uyğunlaşdırır.

4. Derivatizasiya

Derivatization, LC-MS analizində onların aşkarlanmasını artırmaq üçün kimyəvi cəhətdən dəyişən analitikləri əhatə edir. Bu proses dəyişkənlik və ionlaşma səmərəliliyi kimi xüsusiyyətləri yaxşılaşdırır, onu aşağı xasiyyət aşkarlanması ilə birləşmələr üçün xüsusilə faydalı hala gətirir.

Genişləndirilmiş həssaslıq: Derivatizasiya, amin turşuları və steroid kimi xüsusi bir mürəkkəb siniflər üçün analizlərin həssaslığını və seçiciliyini əhəmiyyətli dərəcədə artıra bilər.

Xromatoqrafiya flakonlarının tətbiqləri haqqında daha çox bilmək istəyirsinizsə, xahiş edirəm bu məqaləni yoxlayın: Müxtəlif sahələrdə xromatoqrafiya flakonlarının 15 müraciəti

Nümunə hazırlıq metodu seçimi təsir edən amillər

Müvafiq nümunə hazırlıq texnikasını seçmək bir neçə amilin nəzərə alınmasını tələb edir:

Təhlil edən kimya: polarite, şarj və analitiklərin sabitliyini başa düşmək çox vacibdir.

Nümunə həcmi və mürəkkəbliyi: Nümunə matrisinin həcmi məhdudiyyəti və mürəkkəbliyi hansı metodların mümkün olduğunu diktə edə bilər.

Həssaslıq tələbləri: Fərqli tətbiqlər metod seçiminə təsir göstərən müxtəlif həssaslıq ehtiyacı ola bilər.

Laboratoriya mənbələri: Avtomatlaşdırma və ya əl ilə işləmə üçün avadanlıqların mövcudluğu texnikanın seçiminə təsir göstərə bilər.

Effektiv nümunə hazırlığı üçün ən yaxşı təcrübələr

LC-MS analizində optimal nəticələr əldə etmək üçün, nümunə hazırlığı zamanı ən yaxşı təcrübələrə riayət etmək vacibdir:

Standartlaşdırma: Təhlillərdə ardıcıllığı təmin etmək üçün standart protokolları inkişaf etdirin.

Doğrulama: etibarlılıqlarını və dəqiqliyini təsdiqləmək üçün mütəmadi olaraq metodları təsdiqləyin.

Nümunə işini minimuma endirin: itkinin və ya çirklənmənin qarşısını almaq üçün manipulyasiyaların sayını azaldın.

Keyfiyyətli reagentlərdən istifadə edin: Çirkləri nümunələrə təqdim etməmək üçün yüksək keyfiyyətli reagentlər tətbiq edin.

Sənəd prosedurları: Problemlərin aradan qaldırılması və metodun optimallaşdırılmasını asanlaşdırmaq üçün bütün prosedurların ətraflı qeydlərini aparın.

Rəy

Effektiv nümunə hazırlığı müvəffəqiyyətli LC-MS təhlili üçün əsasdır. SPE, protein yağıntıları, lle və derivatizasiya kimi müxtəlif üsulları başa düşməklə analitiklər öz xüsusi tələbləri üçün ən uyğun üsulu seçə bilərlər. Bundan əlavə, ən yaxşı təcrübələr aşağıdakı məlumatların keyfiyyətini yaxşılaşdıracaq və tədqiqat və sənaye şəraitində fərqli tətbiqlərin etibarlı nəticələrini təmin edəcəkdir.

Sonda nümunə hazırlıq üsullarını mənimsəmək yalnız analitik performansını yaxşılaşdıra bilməz, həm də klinik diaqnostika, narkotik inkişafı və ekoloji monitorinq kimi ərazilərdə irəliləyişlərə də əhəmiyyətli töhfələr verir.

Yalnız 6 sadə addımda dəqiq və etibarlı təhlil üçün düzgün xromatoqrafiya flakonunun sirlərini açın.Texnikanı mənimsəmək üçün oxuyun! Təhlil üçün xromatoqrafiya flakonlarını hazırlamaq üçün 6 addım

Əvvəlki:

LCMS vs GCMS: Tədqiqat üçün hansı texnika ən yaxşısıdır?

Sonrakı:

Bir tok flakonu və xromatoqrafiyada əhəmiyyəti nədir?