HPLC Mobil Fazası üçün Doğru Buferin seçilməsi, optimal ayrılma və analizi əldə etmək üçün vacibdir nümunələr. Tamponlar analitiklərin ionizasiya vəziyyətini idarə etmək üçün vacib olan bir pH-ni qorumağa kömək edir və bununla da tutma vaxtlarını və pik şəklinə təsir göstərir. Aşağıda HPLC tətbiqiniz üçün ən yaxşı tamponu necə seçmək barədə ətraflı məlumat.

HPLC nümunə hazırlığı haqqında bilirsinizmi? Daha çox məlumat üçün bu yazını vurun: "HPLC nümunə hazırlığı haqqında bilmək üçün lazım olan hər şey"

Tampon seçiminin əhəmiyyəti

Bir tampon, pH az miqdarda turşu və ya baza əlavə edildikdən sonra dəyişməyən bir həlldir. Onların tərkibinə əsasən, tamponlar ya turşu, ya da əsas kimi təsnif edilə bilər. Bir tamponun effektivliyi, optimal tamponlama qabiliyyəti üçün istədiyiniz mobil faza pH-nin ± 1 pH vahidi daxilində olması olan PKA tərəfindən müəyyən edilir.

Nəzərdən keçirmək üçün əsas amillər

1.PH aralığı: mobil fazanın pH, analitin PKA-dan ən azı 2 pH vahid olmalıdır. Bu, sütundakı tutulmalarını artırmaq, turşu və ya əsas analitiklərin ionlaşmasını yatırmağa kömək edir. Məsələn, analitiya 4.5-in PKA ilə bir PKA ilə zəif bir turşudursa, bir mobil fazadan istifadə edərək bir mobil fazadan istifadə edərək, ion olmayan bir dövlətdə saxlaya bilər, tutma qabiliyyətini artırır.

2.Buffer növü: HPLC-də istifadə olunan ümumi tamponlar daxildir:

Fosfat buferləri: 2.0 ilə 8.0 pH-də effektiv, fosfat tamponları, bir çox analitik ilə sabitliyi və uyğunluğu səbəbindən fosfat tamponları geniş istifadə olunur. Xüsusilə LC-UV tətbiqləri üçün uyğundur.

Asetat bufersləri: Bunlar LC-UB təhlilləri üçün də populyardır və bu, fosfat tamponları kimi oxşar pH aralığında istifadə edilə bilər.

Dəyişkən tamponlar: LC-MS tətbiqləri üçün, Kütləvi spektrometriya prosesi zamanı asanlıqla çıxarıla bildikləri üçün format, asetat və ammonyum bikarbonat kimi uçucu tamponlar üstünlük verilir.

3.Buffer konsentrasiyası: HPLC-də tamponlar üçün tipik bir başlanğıc konsentrasiyası 25-50 mm arasındadır. Yüksək konsentrasiyalar pik şəklini və səmərəliliyini yaxşılaşdıra bilər, lakin üzvi həlledicilərlə qarışdırıldıqda yağıntılara da səbəb ola bilər. Fəsadların qarşısını almaq üçün bufer konsentrasiyasını 25 mm-dən aşağı saxlamaq məsləhətdir.

4.Kimyəvi saflıq: çirklənməmək və etibarlı nəticələrin qarşısını almaq üçün həmişə yüksək saflıq xromatoqrafik sinif tamponlarından istifadə edin. Çirkləri tutma vaxtlarında gözlənilməz qarşılıqlı əlaqələrə və dəyişkənliyə səbəb ola bilər.

Temperatur effektləri: temperatur bufer həllərinin pH-yə təsir edə bilər. Buferləri effektivliyini qorumaq üçün buferləri ardıcıl bir temperaturda hazırlamaq və saxlamaq vacibdir.

Hplc flakonları haqqında 50 cavab bilmək istəyirsinizsə, bu məqaləni yoxlayın: HPLC flakonlarında ən çox ən çox soruşulan suallar

Tampon hazırlığı üçün praktik tövsiyələr

Hazırlıq metodu: Buferlər ekvivolar miqdarını turşu və əsas komponentlərinin və ya turşu ilə təməl həll etməklə hazırlamaqla hazırlana bilər. Üzvi həlledicilər əlavə etdikdən sonra pH-ni tənzimləməkdən çəkinin, çünki bu, uyğunsuz nəticələrə səbəb ola bilər.

Təzə həllər: Xromatoqrafik performansa təsir edə biləcək komponentlərin mikrob böyüməsini və deqradasiyasını minimuma endirmək üçün mütəmadi olaraq təzə tampon həlləri hazırlayın.

Korroziyanın qarşısını almaq: sitrat kimi müəyyən tamponlar, HPLC sistemlərinin paslanmayan polad komponentlərini korlaya bilər. Zərərin qarşısını almaq üçün bu tamponlardan istifadə etdikdən sonra sistemin hərtərəfli çırpılmasını təmin edin.

Rəy

HPLC mobil fazası üçün düzgün tampon seçmək etibarlı və çoxalmaya səbəb olmaq üçün vacibdir. Seçərkən pH, tampon növü, konsentrasiyanı və saflığı nəzərdən keçirin. Bu təlimatları izləyərək, nümunələrinizi effektiv şəkildə ayırmaq və təhlil etmək üçün HPLC metodunuzu optimallaşdıra bilərsiniz.

HPLC flakonlarının qiymətini bilmək istəyirsiniz, bu məqaləni yoxlayın: Hplc flaks qiyməti: 50 ən çox verilən suallar

Əvvəlki:

Suyun keyfiyyətinin sınağı üçün COD test borularını necə düzgün istifadə etmək olar?

Sonrakı:

Şpris filtrlərində filtr irəliləməsinin qarşısını necə almaq olar