Рашэнні для падрыхтоўкі ўзору HPLC для дасягнення найлепшых вынікаў

Чатыры крокі для падрыхтоўкі ўзору HPLC

Крок 1. Аналіз водных раствораў

Крок 2. Падрыхтоўка стандартаў

Падрыхтоўка стандартаў для злучэння ідэнтыфікацыі і колькаснай ацэнкі можа стаць стомным і працаёмкім працэсам. Дакладна важыць цвёрдае рэчыва, так што загадзя вызначаны аб'ём растваральніка можа быць складаны, а адходы з -за памылкі могуць быць дарагімі - асабліва пры працы з фармацэўтычнымі прэпаратамі. Іншыя фактары, такія як тэмпература, яшчэ больш ускладняюць стандартную падрыхтоўку. Ваганні тэмпературы змяняюць шчыльнасць растваральніка і спрыяюць драматычным адрозненнем у канцэнтрацыі.



Выкарыстоўваючы баланс, які дазваляе ўзважванне да некалькіх дзесятковых знакаў і аўтаматызацыя працэсу, звязваючы баланс з дазавальнікам растваральніка, гарантуе найбольшую дакладнасць. Выкарыстанне такога праграмнага забеспячэння, як дазаванне Q-App, дазваляе аўтаматычна разлікаць і гравіметрычны маніторынг вымяраных значэнняў. Дакументаванне тэмпературы і шчыльнасці растваральніка таксама забяспечвае высока дакладныя канцэнтрацыі, асабліва пры падрыхтоўцы стандартаў у наступныя дні. Прамая перадача дадзеных з прыкладання ўзважвання YAPP16 да праграмнага забеспячэння дадзеных Thermo Scientific ™ Chromeleon ™ 7.2 (CDS) з'яўляецца варыянтам для апрацоўкі дадзеных без папяровых дадзеных з поўнай цэласнасці дадзеных.

Крок 3. Вярніцеся да асноў з добрым піпетам

Важнасць дакладнага і дакладнага піпета занадта часта ігнаруецца і прымаецца як належнае. Узровень навыкаў карыстальніка і вопыт могуць мець значныя наступствы для адчувальных аналізаў, такіх як HPLC. Выбар правільнай піпеткі можа паменшыць памылку чалавека і звязаныя з гэтым выдаткі на марнатраўныя растваральнікі.



Механічныя піпеткі з блакіроўкай гучнасці прапануюць простае рашэнне для прадухілення выпадковых змяненняў аб'ёму, у той час як больш складаныя электронныя піпеткі ліквідуюць зменлівасць карыстальнікаў, каб паслядоўна забяспечваць дакладныя аб'ёмы. Савет Pipette таксама з'яўляецца важнай дэталлю, якую трэба ўлічваць для аналізу ВЭЖХ. Парады з нізкім узроўнем утрымання лепш пры працы з растваральнікамі розных глейкасцей, паколькі яны максімальна павялічваюць аднаўленне ўзораў. Забруджванне ўзору таксама можа адбыцца ў выніку вымывання з наканечніка піпеткі. Такім чынам, парады з высокай хімічнай рэзістэнтнасцю захоўваюць цэласнасць узору.

Крок 4. Фільтр для дакладнасці і даўгалецця

Дадатковая асцярожнасць для фільтрацыі ўзораў перад аналізам паляпшае надзейнасць і можа падоўжыць тэрмін службы слупка ВЭЖХ, прадухіляючы заступныя эфекты. Шпрыцы -фільтры - гэта простае, хуткае рашэнне для фільтрацыі ўзораў перад калоннай храматаграфіяй. Як і ў Pipette Conce, растваральнікі, якія выкарыстоўваюцца ў ВЭЖХ, патрабуюць пэўных фільтраў для прадухілення вылугавання і забруджвання выбаркі.

Мембраны цэлюлозы ўстойлівыя да диметилсульфоксида (DMSO), амідаў, кетонаў, эфіру і эфірных злучэнняў. Асабліва суровыя растваральнікі мембраны без пакрыцця поліэтсулсульфона (PTFO) прадухіляюць вылугаванне і забруджванне ўзораў. Пры ўзоры фільтрацыі ўзору становіцца вельмі працаёмкім, калі колькасць узору павялічваецца. Мульты-ўзоры фільтрацыі, такія як сістэма фільтрацыі Claristep®, могуць апрацоўваць узоры без шпрыцаў і хуткай падрыхтоўкі ўзораў, не прыносячы шкоды якасці.

Пяць праблем, на якія трэба звярнуць увагу！

1. Якія самыя вялікія праблемы з падрыхтоўкай узору, якія стаяць перад лабараторыямі?

Лабараторыі ўзрастаюць ціск з пункту гледжання часу і кошту, часта маюць справу не толькі з вялікай колькасцю узораў, але і ўзорамі рознай прыроды. Падрыхтоўка ўзору - гэта вобласць, у якой тонкія адрозненні паміж тыпамі ўзораў або метадамі падрыхтоўкі ўзораў і выкарыстанымі матэрыяламі могуць паўплываць на атрыманыя вынікі. Забеспячэнне сумяшчальнасці паміж матэрыяламі ў прыладзе фільтрацыі і растваральнікам можа мінімізаваць праблемы; Напрыклад, узровень здабычых злучэнняў, якія могуць перашкаджаць выяўленню аналіту.

2. Што адбываецца, калі падрыхтоўка ўзору ідзе не так?

Перад аналітычнай высокапрадукцыйнай вадкаснай храматаграфіяй (ВЭЖХ) узоры рыхтуюцца рознымі метадамі, якія могуць уздзейнічаць на аналітычныя вынікі, уплываючы на ​​ўзор, які ўводзіцца ў сістэму. Неэфектыўная падрыхтоўка ўзораў можа прывесці да зніжэння тэрміну службы слупкоў, павышэння патрабаванняў да паслуг для кампанентаў, патэнцыялу прастою прыбораў, зніжэння эфектыўнасці і ўзнаўляльнасці храматаграфічнага падзелу і многіх іншых праблем.

3. На першы погляд, фільтрацыя здаецца простым працэсам ...

Хоць фільтрацыя - гэта, здавалася б, невялікая частка вялікага працоўнага працэсу, уплыў выбару правільнага фільтра для дадзенага прыкладання можа быць істотным. Напрыклад, метады, якія не выдаляюць дастатковую колькасць часціц, могуць прывесці да блакавання слупкоў. Пры пэўных абставінах пры пэўных абставінах можа вылучыць здабычы злучэнні ў выбарку, звязваючы аналітыкі, якія прадстаўляюць цікавасць альбо ўвядуць памылкі праз страту ўзору - усё гэта ўплывае на якасць і ўзнаўляльнасць назіраных вынікаў. Калі вы ўпэўненыя, што вашыя фільтрацыйныя расходныя матэрыялы не спрыяюць памылак, якія патрабуюць пераробкі або расследавання каранёў, вы зэканоміце грошы і дасце сабе душэўны спакой.

4. Якія найбольш распаўсюджаныя падрыхтоўкі ўзору "не атрымаюцца"?

Няправільны выбар мембраны фільтра - гэта адна праблема, якую мы шмат бачым. Праблемы могуць выглядаць як староннія вяршыні ад здабычы, якія могуць перашкаджаць выяўленню аналітыкаў, якія прадстаўляюць цікавасць. Несумяшчальнасць фільтруе асяроддзя з узорам або растваральнікам з пункту гледжання хімічнай рэзістэнтнасці не абмяжоўваецца толькі эфектам растварэння на фільтруе асяроддзе. Растваральнікі могуць выклікаць нязначны ацёк палімерных мембранных матэрыялаў, калі не сумяшчальна, што, у сваю чаргу, можа паўплываць на эфектыўнасць фільтрацыі, што прывядзе да неэфектыўнай ачысткі ўзораў. Адзін са спосабаў вырашэння гэтага пытання - гэта выбар мембраны, якая шырока сумяшчальная як з воднымі, так і з арганічнымі растваральнікамі. Для тыповай падрыхтоўкі ўзору ВЭЖХ шпрыц і без шпрыцкіх фільтраў, якія змяшчаюць рэгенераваныя мембраны цэлюлозы, з'яўляюцца добрым варыянтам з -за іх шырокай сумяшчальнасці растваральнікаў.

Выкарыстанне фільтравага прылады большага, чым трэба для падрыхтоўкі аб'ёму, з'яўляецца яшчэ адным распаўсюджаным падводкам. Выкарыстанне занадта вялікіх прылад фільтра азначае, што ў фільтры застанецца невялікая колькасць узору, нават пасля таго, як будуць прыняты меры засцярогі, каб максімальна выгнаць.

5. Якія перавагі сур'ёзна ставяцца да этапу фільтрацыі?

Асноўнай мэтай большасці лабараторый, якія займаюцца аналітычным тэставаннем, з'яўляецца распрацоўка паслядоўных працэсаў, якія ляжаць у аснове паслядоўных вынікаў - і якія патрабуюць паслядоўнай фільтрацыі. Выбар прылады фільтрацыі з правільным памерам часу і характарыстыкамі ўтрымання дапамагае забяспечыць эфектыўнае выдаленне часціц, у той час як выбар адпаведнага памеру і канструкцыі фільтравага блока можа дапамагчы мінімізаваць страту ўзору. Добрая фільтрацыя таксама дапамагае абараніць слупок і патэнцыйна пашырае тэрмін службы як інжэктара, так і слупка.

Выснова

HPLC - гэта каштоўная тэхніка навукі аб жыцці і біяфармацэўтычныя даследаванні, паколькі ён дае дакладныя, узнаўляльныя вынікі. Гэтая дакладнасць залежыць ад цэласнасці ўзору HPLC, і лепшы спосаб забяспечыць якасныя ўзоры-пачаць з лепшых інструментаў. З рашэннямі для ультрачыстай вады, стандартнай падрыхтоўкі, піпет, парады і фільтраў, для кожнай дэталі ўлічваецца лінія падрыхтоўкі ўзору HPLC. Аўтаматызаваныя рашэнні і праграмнае забеспячэнне таксама дапамагаюць упарадкаваць падрыхтоўку ўзораў для дастаўкі чыстых узораў для чыстых вынікаў.

Больш дыскусій пра рашэнні для падрыхтоўкі ўзораў HPLC вітаюцца!