Знаете ли за хартиена хроматография?

Хартиената хроматография е широко използвана аналитична техника, която разделя и идентифицира смеси от вещества въз основа на различните им афинитети за стационарна фаза (хартия) и подвижна фаза (разтворител). Той е особено полезен в химията и биохимията за анализ на малки количества вещества като пигменти, аминокиселини и други органични съединения.

Какво е хартиена хроматография?

Хартиената хроматография е вид течна хроматография, при която стационарната фаза е лист филтърна хартия, а подвижната фаза е разтворителят, който тече през филтърната хартия. Техниката разчита на диференциалното разделяне на съединения между стационарната фаза (филтърна хартия) и подвижната фаза (разтворител). Докато разтворителят се движи нагоре по филтърната хартия чрез капилярно действие, той носи компонентите на сместа с различни скорости въз основа на афинитета им към двете фази.

Основните принципи, които стоят зад хартиената хроматография, могат да бъдат разбрани чрез две основни понятия: хроматография на дяла и адсорбционна хроматография.

Хроматография на дяла: При този тип веществата се разпределят между две течни фази. Стационарната фаза се състои от вода в порите на филтърната хартия, докато подвижната фаза е разтворителят, който се движи през тези пори. Разделянето възниква, тъй като различните съединения имат различни афинитети към стационарната и мобилната фаза.

Адсорбционна хроматография: Тук твърдата повърхност на хартията действа като неподвижна фаза, а течният разтворител действа като подвижна фаза. Компонентите в сместа се разделят въз основа на тяхната адсорбция към твърдата повърхност и разтворимостта им в течната фаза.

Компоненти

Стационарна фаза: хроматографска хартия, обикновено изработена от целулоза. Той осигурява повърхност за компонентите, които да се придържат.

Мобилна фаза: разтворителят или сместа от разтворители, които се движат върху хартията чрез капилярно действие. Изборът на разтворител може значително да повлияе на процеса на разделяне.

Проба: Сместа, която трябва да бъде анализирана, обикновено забелязана в определена отправна точка на хартията.

Искате ли да знаете повече за подготовката на пробата на HPLC, моля, проверете тази статия: HPLC Решения за подготовка на проби за най -добри резултати

Процес на хартиена хроматография

Подготовка: Изберете висококачествена филтърна хартия с определена порьозност, за да осигурите ефективно разделяне. Нанесете малка част от пробата смес върху основната линия на хроматографската хартия.

Подготовка на пробата: Разтворете сместа от пробата в подходящ разтворител като част от подвижната фаза.

Забелязване: Използвайте капилярна или микропипета, за да изпуснете малко количество от разтвора на пробата на изходното ниво на филтърната хартия.

Разработка: Потопете долния ръб на тестовата хартия в развиващия се разтворител (подвижна фаза). С възникването на капилярното действие разтворителят се издига през тестовата хартия, носейки компонентите на пробата със себе си.

Разделяне: Докато разтворителят се движи, различните компоненти на пробата ще се движат с различни скорости поради взаимодействието им със стационарната фаза и различната разтворимост в подвижната фаза.

Визуализация: След като предният разтворител е преместил достатъчно разстояние, хартията се отстранява от разтворителя и се оставя да изсъхне. Компонентите могат да бъдат визуализирани с помощта на UV светлина, химически реагенти или чрез наблюдение на промените в цвета.

Анализ: Разстоянието, изминато от всеки компонент спрямо предната част на разтворителя, се измерва за изчисляване на стойността на RF (фактор на задържане) за идентификация.

Приложения на хартиена хроматография

Хартиената хроматография има широк спектър от приложения в различни области:

Биохимия: Анализ на аминокиселини, захари и други биомолекули.

Фармацевтични продукти: Идентифициране на активни съставки и примеси в лекарствените състави. Използва се за идентифициране на активни съединения и примеси в лекарствените състави по време на развитието и контрола на качеството.

Наука за околната среда: Хартиената хроматография се използва за откриване на замърсители във водни проби и анализ на замърсители в почвените екстракти.

Хранителната индустрия: Техниката помага за анализиране на добавки, замърсители и оцветители в храната, за да се гарантира спазването на правилата за безопасност.

Предимства на хартиената хроматография

Ефективност на разходите: Изисква минимално оборудване и материали в сравнение с други хроматографски техники като HPLC (високоефективна течна хроматография). Простота: Процесът е много прост и може да се извърши с основни лабораторни инструменти, така че може да се използва за образователни цели.

Изискване за нисък обем на пробата: За анализ е необходимо само малко количество проба, което го прави идеален за ценни или ограничени проби.

Универсалност: Тя може да отдели широк спектър от вещества въз основа на химични свойства, включително полярни и неполярни съединения

Ограничения на хартиената хроматография

Въпреки предимствата си, хартиената хроматография има някои ограничения:

Ограничен капацитет: Като цяло подходящ за малки обеми на пробата.

Резолюция: Разделителната способност може да не е толкова висока, колкото тази, постигната от по -усъвършенствани техники като HPLC или газова хроматография (GC).

Повторно време: Поради по -бавната скорост на миграция, процесът може да отнеме повече време в сравнение с други хроматографски методи.

Ограничен количествен анализ: Въпреки че могат лесно да се получат качествени резултати, за количествено определяне на концентрациите могат да се изискват допълнителни методи за калибриране.

Хартиената хроматография остава ценна техника за разделяне и анализ на смеси в различни научни области. Неговата простота, рентабилност и способност за осигуряване на интуитивни резултати го правят основен инструмент за химици и изследователи. Въпреки ограниченията си в сравнение с по -усъвършенстваните хроматографски техники, той все още се използва широко за образователни цели и предварителен анализ в лабораториите.

Искате да знаете 50 отговора за флаконите HPLC, моля, проверете тази статия: 50 най -често задавани въпроси относно флаконите HPLC