Подготовка и филтриране на проби: Осигуряване на качество в хроматографията

Правилната подготовка на пробата - пречистване на контейнери, премахване на прахови частици, обогатяване на анализи и, ако е необходимо, дериватизира - елиминира над 90% от аномалиите на базовия шум и налягането, осигурявайки остри пикове и стабилни базови линии. Неуспехът тук води до пиково опашка, плаващи базови линии или блокиране на колони.

1. Замърсяване и матрични смущения

Проблем

• Изходният дрейф и нарастващия шум неясни незначителни върхове.

• Неочаквани върхове се появяват от примеси от излугване.

• Лоша възпроизводимост между инжекциите.
  

  

Причина

• Остатъци в стъклените съдове: непълни киселини листа от силикати; Пластмасовите изделия могат да издуват пластификатори.

• Почистващи агенти: Проследяването на органиката в разтворителите за изплакване остават адсорбирани.

• Частици от околната среда: Лабораторният въздушен прах и VOCS адсорб върху отворени проби.
  

  

Решение

1. Строго почистване SOP: Киселинно накисване → ултразвуково изплакване с чисто вода → сухо за азот за стъклени съдове; Специализиран препарат за пластмаси.

2. Предварително филтрация: Центрофугиране при 3000 об / мин за 10 минути или използвайте 5 µm предварителна филтрация преди окончателната 0,22 µm филтрация.

3. Контролирана среда: Извършете подготовка в качулка ламинарен поток, за да сведете до минимум замърсяването с въздуха.
   
   

2. Филтър запушването от несъвместими филтри

Проблем

• Аларми за автоматично налягане и чести подмяна на иглата.

• Намален дебит, непоследователни пикови зони.

• Повишено запушване на обратно налягане и колона.
  

  

Причина

• Мембранно несъответствие: Найлон набъбва в органични разтворители; PVDF пълзи при повишена температура.

• Неправилен размер на порите: 0,22 µm филтри улавят фини частици, но намаляват потока; 0,45 µm филтри все още могат да се запушат с микрокристали.

Решение

1. Матрица за мембрана - разтворител: Използвайте хидрофилен PES \ / MCE за водна (pH4–8), хидрофобна PTFE \ / PVDF за органични фази; Избягвайте целулозния ацетат при силни киселини.

2. Изберете подходящ размер на порите: Използвайте 0,45 µm за рутинна HPLC, 0,22 µm за UHPLC или проследяване; Предварителни проби с висока вискозитет през 5 µm.

3. Монитор ΔP: Повишаване на налягането на пистата; Сменете филтъра, когато обратно налягането се увеличава> 15%.
   
   

   

3. Разтворител -мембранна химическа несъвместимост

Проблем

• Филтрираната проба изглежда облачно или носи частици.

• Нов базов шум или призрачни пикове след филтрация.

• Намалено възстановяване на аналита.
  

  

Причина

• Подуване на разтворител: THF набъбва PTFE, променя размера и потока на порите.

• Мембранни извличащи се: Найлонът в мравчената киселина отделя олигомери, които абсорбират при 214 nm.

Решение

1. Тест за съвместимост: Накиснете филтъра в предназначен разтворител за 24 часа при 25 ° С; Проверете за подуване или промяна на теглото.

2. Пилотен LC -MS тест: Сравнете общите йонни хроматограми на филтрирана спрямо нефилтрирана проба.

3. Използвайте филтри с ниска скорост: Ултразвуково PTFE или PES без лепила.
   
   

Качествена система: отбрана -мониторинг - корекция

Защита

Стандартизирайте SOP за почистване, филтриране и избор на мембрана, за да се предотвратят грешки.

Мониторинг

Запишете дебита, обратно налягане и базови линии за пробиване на проби за откриване на дрейф.

Корекция

Поддържайте анализ на дървото на разлома за бързо идентифициране на кореновите и коригиращи действия.

„Аналитичната точност започва с прихващане на най -малката частица.“