Znate li za papirna hromatografiju?

Papirna hromatografija je široko korištena analitička tehnika koja razdvaja i identificira mješavine tvari na osnovu njihovih različitih afiniteta za stacionarnu fazu (papir) i mobilnu fazu (otapalo). Posebno je korisno u hemiji i biohemiji za analizu malih količina tvari poput pigmenata, aminokiselina i drugih organskih spojeva.

Šta je papirna hromatografija?

Papirna hromatografija je vrsta tečne kromatografije u kojoj je stacionarna faza list filter papira i mobilna faza je otapalo koje teče kroz filter papir. Tehnika se oslanja na diferencijalnu particiju spojeva između stacionarne faze (filter papira) i mobilne faze (otapala). Kako se otapalo pomiče filtarskim papirom kapilarnim akcijama, on nosi komponente smjese u različitim stopama na temelju njihovog afiniteta za dvije faze.

Osnovni principi iza papirne kromatografije mogu se shvatiti kroz dva glavna koncepta: pregradne kromatografije i adsorpcijsku hromatografiju.

Pregradična kromatografija: U ovom se vrstu supstance distribuiraju između dvije tekuće faze. Stacionarna faza sastoji se od vode u porama filtarskog papira, dok je mobilna faza otapalo koje se kreće kroz ove pore. Odvajanje se događa jer različiti spojevi imaju različite afinitete za stacionarne i mobilne faze.

Adsorpcijska hromatografija: Ovdje čvrsta površina rada djeluje kao stacionarnu fazu i tečni rastvarljivi akti kao mobilna faza. Komponente u smjesi odvojene su na osnovu njihovog adsorpcije na čvrstu površinu i njihovu rastvorljivost u tečnoj fazi.

Komponente

Stacionarna faza: hromatografski papir, obično izrađen od celuloze. Pruža površinu za komponente da se pridržavaju.

Mobilna faza: otapalo ili mješavina otapala koji se premješta na papir kapilarna akcija. Izbor otapala može značajno utjecati na proces razdvajanja.

Uzorak: smjesa koja se može analizirati, obično uočena na određenoj polazištu na papiru.

Želite znati više o pripremi za HPLC uzorak, provjerite ovaj članak: HPLC Primjena priprema za najbolje rezultate za najbolje rezultate

Proces papirnog kromatografije

Priprema: Odaberite visokokvalitetni filter papir sa određenom poroznošću kako biste osigurali efikasno odvajanje. Nanesite mali dio smjese uzorka na osnovnu liniju hromatografske papire.

Priprema uzorka: Rastvorite smjesu uzorka u odgovarajućem otapalu kao dijelu mobilne faze.

Spotting: Koristite kapilar ili mikropipet da biste ispustili malu količinu otopine uzorka na osnovnoj liniji na filter papiru.

Razvoj: Umočite donji rub testnog papira u razvijanje rastvarača (mobilna faza). Kako se pojavljuje kapilarna radnja, otapala se izdiže kroz ispitni papir, noseći uzorke komponente s njim.

Odvajanje: Kao što se otapalovodi, različite komponente uzorka kreću se po različitim stopama zbog svoje interakcije sa stacionarnom fazom i različitom rastvorljivošću u mobilnoj fazi.

Vizualizacija: Nakon što je protok otapala premjestio dovoljnu udaljenost, papir se uklanja iz otapala i lijevo da se osuši. Komponente se mogu vizualizirati pomoću UV svjetla, hemijskih reagensa ili promatranjem promjena boje.

Analiza: Udaljenost koju svaka komponenta pređe u odnosu na spriječenje otapala mjeri se za izračunavanje RF vrijednosti (faktor zadržavanja) za identifikaciju.

Primjene papirne hromatografije

Papirna hromatografija ima širok spektar primjene u različitim poljima:

Biohemija: Analiza aminokiselina, šećera i drugih biomolekula.

Farmaceuti: Identifikacija aktivnih sastojaka i nečistoća u formulacijama droga. Koristi se za identifikaciju aktivnih spojeva i nečistoća u formulacijama droga tokom razvoja i kontrole kvaliteta.

Nauka o životnoj sredini: papirnah hromatografija koristi se za otkrivanje nečistoća u uzorcima vode i analiziraju kontaminante u ekstraktima tla.

Prehrambena industrija: Tehnika pomaže u analizi aditiva, kontaminanata i boja u hrani kako bi se osiguralo poštivanje sigurnosnih propisa.

Prednosti papirne hromatografije

Za efikasnost troškova: zahtijeva minimalnu opremu i materijale u odnosu na druge kromatografske tehnike poput HPLC (tečna hromatografija visoke performanse). Jednostavnost: Proces je vrlo jednostavan i može se izvesti sa osnovnim laboratorijskim alatima, tako da se može koristiti u obrazovne svrhe.

Zahtev za nizak uzorak: Za analizu je potrebna samo mala količina uzorka, čineći ga idealnim za dragocjene ili ograničene uzorke.

Svestranost: Može odvojiti širok spektar tvari na osnovu hemijskih svojstava, uključujući polarne i ne-polarne spojeve

Ograničenja papirne hromatografije

Uprkos svojim prednostima, papirnah kromatografija ima određena ograničenja:

Ograničeni kapacitet: općenito pogodan za male količine uzorka.

Rezolucija: Rezolucija možda nije toliko velika kao što je postignuta naprednijim tehnikama kao što su HPLC ili plinska kromatografija (GC).

Konzumiranje vremena: Zbog sporih stopa migracije, proces može trajati duže u odnosu na druge kromatografske metode.

Ograničena kvantitativna analiza: Iako se kvalitativni rezultati mogu lako dobiti, mogu se odrediti dodatne načine kalibracije za kvantifikaciju koncentracija.

Papirna hromatografija ostaje vrijedna tehnika za razdvajanje i analizu smjesa u raznim naučnim poljima. Njegova jednostavnost, ekonomičnost i sposobnost pružanja intuitivnih rezultata čine je bitnim alatom za hemičare i istraživače. Uprkos ograničenjima u odnosu na naprednije hromatografske tehnike, još uvijek se široko koristi u obrazovne svrhe i preliminarnu analizu u laboratorijama.

Želite znati 50 odgovora na HPLC boila, provjerite ovaj članak: 50 najčešće postavljana pitanja o HPLC boilama