2. Veća osjetljivost vašeg HPLC stupaca
3. Veća tačnost
4. Manje lažno-pozitivnih vrhova
5. Manje pozadinske buke
6.Neno isprženja
Četiri koraka za pripremu uzorka HPLC
Ubedimo vas kako možete uštedjeti vrijeme sa našim rješenjima i istovremeno povećati reproduktivnost vaših rezultata:
1. korak. Analiza vodenih rješenja
Loša kvaliteta vode jedan je od najvećih faktora koji doprinose problemima tijekom HPLC-a. Dnejnost vode u mobilnoj fazi mogu komunicirati sa stupcem i rezultirati lošom rezolucijom i osjetljivošću ili neočekivanim vrhovima u kromatogramu, koji se obično nazivaju vrhovima duha. Korištenje ultrapurne vode značajno smanjuje rizik od kontaminacije organskim ugljenicima, mikroorganizmima, endotoksinima, rnazama i dnazama. Ultraper voda je dostupna za kupovinu, međutim, koristeći sistem za pročišćavanje vode u vašoj laboratoriji najlakši je način osiguranja visokokvalitetne ultra table. Tip 1 Voda reagensa za reagense koja ispunjava ASTM, NCCLS, ISO i USP standarde najbolji su izbor za HPLC aplikacije.
2. korak. Priprema standarda
Priprema standarda za spojnu identifikaciju i kvantifikaciju mogu biti naporni i dugotrajni proces. Precizno vaganje čvrstog tako da se može koristiti unaprijed definirani volumen otapala je težak, a otpad zbog greške može biti skupo-posebno kod rada s lijekovima. Ostali faktori kao što su temperatura dodatno kompliciraju standardna priprema. Fluktuacije temperature mijenjaju gustoću otapala i doprinose dramatičnim razlikama u koncentraciji.
Koristeći ravnotežu koja omogućava preciznost vaganja do nekoliko decimalnih mjesta i automatiziranje procesa povezivanjem saldo u raspršivač raspršivač garantuje najvišu preciznost. Upotreba softvera kao što je Q-aplikacija Yapp16 Doziranje omogućava automatsko proračune i gravimetrijsko nadgledanje izmjerenih vrijednosti. Dokumentiranje temperature i gustoće otapala osigurava i vrlo precizne koncentracije, posebno prilikom pripreme standarda u narednim danima. Direktan prijenos podataka iz aplikacije Yapp16 za vaganje na Thermo Scientific ™ Chromeleon ™ 7.2 Hromatografski sistem (CD-ovi) softver je opcija za rukovanje podacima bez papira s punim integritetom podataka.
Korak 3. Vratite se na osnove sa dobrom pipetiranjem
Važnost preciznog i preciznog pipetivanja prečesto se previđa i uzima zdravo za gotovo. Razina i iskustva korisnika mogu imati značajne implikacije na osjetljive analize poput HPLC-a. Odabir desne pipete može smanjiti ljudsku grešku i povezane troškove izgubljenih otapala.
Mehaničke pipete sa zaključavanjem glasnoće nude jednostavno rješenje za sprečavanje promjena slučajne količine, dok sofisticiraniji elektronički pipeti dišu varijabilnost korisnika da dosljedno isporučuju precizne sveske. Vrh pipete također je važan detalj za razmatranje HPLC analize. Savjeti sa niskim zadržavanjem najbolji su kada rade sa otapalima različitih viskosti, jer maksimiziraju oporavak uzoraka. Kontaminacija uzorka može se pojaviti i kao rezultat ispiranja iz vrha pipete. Kao takvi, savjeti sa visokim hemijskim otporom začuvane uzorke integriteta.
Korak 4. Filter za tačnost i dugovječnost
Uzimajući dodatnu njegu za filtriranje uzoraka prije analize poboljšava pouzdanost i može produžiti život stupca HPLC sprečavajući efekte začepljenja. Filteri sa špricem su jednostavno, brzo rješenje za filtriranje uzoraka prije kolone kromatografije. Kao i kod vrhova Pipette, otapala koji se koriste u HPLC-u zahtijevaju određene filtre kako bi se spriječilo ispiranje i kontaminaciju uzoraka.
Membrane celuloze otporne su na dimetil sulfoksid (DMSO), amide, ketone, estera i estera. Za posebno oštre otapala, neoboćena polietersona (PTFO) membrane sprječavaju ispiranje i kontaminaciju uzoraka. Uzorak filtracija postaje vrlo dugotrajno kada se broj uzorka povećava. Višestruke uzorke filtracione jedinice, poput Claristep® sistema za filtriranje, mogu obraditi uzorke bez šprica i brzog pripravka uzorka bez žrtvovanja kvalitete.
Pet problema na kojima trebate obratiti pažnju!
1. Koji su najveći uzorak pripremnih problema s kojima se suočavaju sa laboratorijama?
Laboratorije su pod sve većim pritiskom u pogledu vremena i troškova, često se bave ne samo visokim brojem uzoraka, već i uzorke različitih prirodnih priroda. Priprema uzoraka je područje u kojem suptilne razlike između vrsta uzorka ili metoda pripreme uzoraka i korištenih materijala može utjecati na dobijene rezultate. Osiguravanje kompatibilnosti materijala u uređaju za filtriranje i otapala može minimizirati probleme; Na primjer, nivoi izvanrednih spojeva koji bi mogli ometati otkrivanje analita.
2. Šta se događa kada uzorak priprema pođe po zlu?
Prije analitičke tečnosti (HPLC) visoke performanse (HPLC) primjene, uzorci se pripremaju raznim metodama, a sve imaju potencijal utjecaja na analitičke rezultate utjecajući na uzorak u uzorku u sustav. Neefikasan pripravak uzorka može dovesti do smanjenja života stupaca, povećanih službi za komponente, potencijalno parenje instrumentacije, smanjenje hromatografske odvojenosti i mnogo drugih problema.
3. Na prvi pogled, filtracija se čini kao jednostavan proces ...
Iako je filtracija naizgled mali dio velikog tihog rada, utjecaj odabira pravog filtra za određenu aplikaciju može biti značajan. Na primjer, metode koje ne uklanjaju dovoljno čestica mogu rezultirati blokiranjem stupaca. Neprimjeren izbor uređaja za pripremu uzoraka mogao bi, pod određenim okolnostima, osloboditi izvanredne jedinjete u uzorke, vezati analize interesa ili uvođenje grešaka kroz gubitak uzorka - sav utjecaj na kvalitetu i reproduktivnost promatranih rezultata. Ako ste sigurni da vaš potrošni materijal za filtriranje ne doprinose greškama koje zahtijevaju istrage o preradu ili uzroku korijena, uštedjet ćete novac i dati sebi mir.
4. Koji su najčešći uzorak priprema 'ne uspijeva'?
Neispravni izbor membrane filtra jedan je problem koji vidimo puno. Pitanja se mogu pojaviti kao vanjski vrhovi iz ekstrakta, koji mogu ometati otkrivanje analita interesa. Nekompatibilnost filternih medija sa uzorkom ili otapalom u pogledu hemijskog otpora nije isključivo ograničena na efekte raspuštanja na filter medije. Otapala mogu uzrokovati blagi oticanje polimernih membranskih materijala kada nije u potpunosti kompatibilan, što zauzvrat može utjecati na performanse filtracije, što dovodi do neefikasnog čišćenja uzoraka. Jedan od načina za rješavanje ovog problema je odabirom membrane koja je široko kompatibilna s vodenim i organskim otapalima. Za tipičnu pripremu uzorka HPLC, špric i krinseletni filtri koji sadrže regenerirane celulozne membrane su dobra opcija zbog njihove široke kompatibilnosti otapala.
Upotreba filtarskog uređaja koja je veća od potrebne za pripremu za jačinu je još jedna uobičajena zamka. Upotreba previše velikih filtarskih uređaja znači da će male količine uzorka ostati u filtru, čak i nakon što se mjere predostrožnosti uzimaju kako bi se izbacilo što više.
5. Koje su prednosti uzimati očuha filtracije ozbiljno?
Temeljni cilj većine laboratorija koji se bavi analitičkim testiranjem je razvijanje dosljednih procesa koji podudaraju dosljedne rezultate - i za koje zahtijeva konzistentno filtriranje. Odabir filtracijskog uređaja s pravom veličinom pora i karakteristikama zadržavanja pomaže u osiguravanju efikasnog uklanjanja čestica, dok izbor odgovarajuće veličine i dizajna filtarske jedinice može pomoći umanjivanju gubitka uzoraka. Dobra filtracija također pomaže u zaštiti stupca i potencijalno proširuje život i ubrizgavača i stupca.
Zaključak
HPLC je dragocjena tehnika za životnu nauku i biofarmaceutski istraživanje jer pruža precizne, reproduktivne rezultate. Ova tačnost ovisi o integritetu HPLC uzorka, a najbolji način da se osigura kvalitetni uzorci za početak sa najboljim alatima. Uz rješenja za ultrapušku vodu, standardne pripreme, pipete, savjete i filtere, HPLC Priprema za pripremu uzoraka za svaki detalj. Automatizirana rješenja i softver također pomažu u pojednostavljivanju pripreme uzorka za isporuku čistih uzoraka za čiste rezultate.
Više diskusija o HPLC uzorcima priprema rješenja su dobrodošle!
Engleski
Kineski
