Komprehensibo nga Giya sa HPLC Sample Peratement - Pag-filter, Pagkuha, ug Derivatization
Balita
Mga kategoriya
Usik

HPLC Sample Peratement - Step-by-Lakang Giya

Oktubre 21, 2025
Tags:

Sampol nga pagpunting sa pagtan-aw

Ang sampol nga getarment naglakip sa tanan nga mga operasyon sa wala pa indeyksiyon. Gawas gawas sa pagtimbang-timbang, pagkahan-ay, ug lusl, naglangkit usab kini sa mga mosunod nga mga lakang:

  • Pagsumpaki
  • Pagkalatian
  • Derivatization (pre-kolum nga derivatization)
  • Likido nga chromatography (ubos nga presyur nga kolum chromatography)

Ang pagpakaaron-ingnon mahimong mano-mano o awtomatiko. Pamilyar ka ba sa sampol nga gereta?


Derevatization

Ang pila ka mga sample dili gihapon direkta nga gi-injection pagkahuman sa pagpukaw. Gikinahanglan ang Derivatization nga maghimo mga compound nga wala'y pag-abusar sa UV o fluorescence nga makit-an sa mga detektor sa UV o Fluorescence.

  • Nagpauswag sa pagkasensitibo
  • Pagpalambo sa Pagbulag (Pagbag-o sa kalidad)

Ang posibleng mga isyu naglakip sa sample nga pagkawala, kontaminasyon, dili kompleto nga mga reaksyon, o daghang mga produkto, nga mahimong makaapekto sa katukma o magpaila sa mga sayup.

Sample nga pagsala

Ang mga sample sa LC kinahanglan nga managsama ug libre nga tipik; Ang mga partikulo mahimong makadaot sa injector o pag-block sa kolum. Ang mga lakang naglakip sa:

  • Pag-uyog sa sampol sa wala pa ang pag-injection ug pagsusi alang sa mga partikulo, turbidity, o emulsyon
  • Kung ang mga partikulo naobserbahan, i-filter ang sample gamit ang usa ka membrane nga makapadayon sa ≥0.15μm nga mga partikulo

Potensyal nga mga Isyu: Mga sample nga kontaminasyon, pag-angkon nga konsentrasyon sa sangkap sa adsorption, ug solvent nga evaporation hinungdan sa mga sayup.

Mga pamaagi sa pagkuha

Ang pagkuha nagbulag sa mga analista gikan sa mga co-solvents o pagtangtang sa mga sayup nga sangkap (e.g., protina). Ang mga organikong solvent kinahanglan nga mubu, dili maayo, ubos sa mga hugaw, ug matunaw ang sample nga maayo.

Kasagaran nga mga Solvents: Diethyl Ether, Ethyl Acetate, Dichloromethane, Chloroform, Benzene, o mga sagol.

Pagkahuman sa pagkuha, ang mga sampol mahimong i-injected direkta o mag-concentrate aron madugangan ang pag-analisar sa konsentrasyon ug pagkasensitibo.

Ang Sample nga Turo sa Tubig

  1. Mga sangkap nga asido ug asin: pagkuha mga hugaw nga adunay organikong solvent, pag-adjust sa acidic, unya pagkuha o pag-inject; o uga sa ilalum sa n₂ ug matunaw sa angay nga lapalapa sa wala pa injection.
  2. Mga batakang mga sangkap ug salts: pagkuha mga hugaw nga adunay organikong solvent, pag-adjust sa sukaranan, unya pagkuha o pag-inject; o uga sa ilalum sa n₂ ug matunaw sa angay nga lapalapa sa wala pa injection.
  3. Neutral nga mga sangkap: pagkuha mga hugaw nga adunay organikong solvent, unya pag-analisar direkta sa nabalik-balik nga bahin sa chromatographyography.


Tambok nga tambok nga matunaw nga sample

Pagkuha sa organikong lapalapa o pag-inject direkta; o uga sa ilalum sa n₂ ug matunaw sa angay nga lapalapa sa wala pa injection.


Mga Tinubdan sa Overtasyon

Potensyal nga mga gigikanan sa kontaminasyon sa pag-analisar:

Tipo sa kontaminasyon

Tinubdan

Mga lakang sa paglikay

Sa kinaiyahan

Makadaot nga mga gas, abug, aerosols

Tipigi ang usa ka sulud sa instrumento, limpyo; I-install ang AC; pagpugong sa kaumon <70%; Paglikay sa kaumog, corrosion, vibration

Sudlanan

Glass, Ceramic, Quartz, plastic labware

Pilia ang angay nga mga sulud sa matag sample nga tipo; Limpyohan pag-ayo

Mga reagents

Non-Chromatography-Grade Reagents

Gamita ang chromatography-grade, high-kaputli, o mga reagent sa grado


Pag-andam sa Sulud nga Solusyon

  • Pag-andam una sa sumbanan sa sulud; Paggamit parehas nga batch sa mga sumbanan ug sampol aron makunhuran ang mga sayup
  • Mga sangkap kinahanglan nga chromatography-grade ug malig-on
  • Pagtipig sa mga sumbanan nga solusyon sa mga brown nga botelya sa ubos nga temperatura
  • Alang sa mga bitamina, paggamit brown volumertric flasks o pagpanalipod gikan sa kahayag


Kasagaran nga mga problema sa sampol nga pagpatik ug mga solusyon

Problema

Hinungdan

Tubag

Wala'y kalabutan nga mga taluktok sa chromatogram

Pagsumpaki nga kontaminasyon

  1. SOUK Filter sa sample solvent ug indeyksiyon sa pagsulay

  2. Pag-usab sa tipo sa filter

  3. Paggamit us aka mga pamaagi sa paglimpiyo sa paghinlo

Ubos nga Tubag sa Peak (labi na ang mga sample nga ubos-konsentrasyon)

Adsorption sa filter ibabaw

  1. Pag-usab sa tipo sa filter

  2. Iproseso ang tanan nga mga sample sa ilalum sa parehas nga mga kondisyon

  3. Paggamit us aka mga pamaagi sa paglimpiyo sa paghinlo

Ubos nga Pag-ayo

Dili kompleto nga pagkuha

  1. Pagdugang sa oras sa pagkuha, gamita ang mainit nga lapalapa

  2. Pag-adjust sa pamaagi sa paglimpiyo

Ang mga gipalapad nga mga taluktok, gipamubu nga koleksyon sa kolum

Sample nga pagpanghilabot ug kontaminasyon

Pagpalambo sa pamaagi sa paglimpiyo

Kabus nga katukma

Dili kompleto nga pagkaayo

  1. Pag-optimize o pag-ilis sa dervatization, panagbulag, pagkuha, o uban pang mga kondisyon

  2. Paggamit awtomatikong pagdumala aron mapaayo ang katukma

Pangutana