Příprava a filtrace vzorku: zajištění kvality v chromatografii

Správné přípravy vzorku - čisté kontejnery, odstraňují částice, obohacují analyty a v případě potřeby derivatizují - vyvolává více než 90% výchozích anomálií, což zajišťuje ostré píky a stabilní základní linie. Porucha zde má za následek špičkové ocasy, unášení základních linií nebo blokování sloupců.

1. Kontaminace a rušení matice

Problém

• Základní drift a stoupající hluk temné drobné vrcholy.

• Neočekávané vrcholy se objevují z vyluhovaných nečistot.

• Špatná reprodukovatelnost mezi injekcemi.
  

  

Příčina

• Zbytky ve skleněném nádobí: Neúplné křemičitany pro vymývání kyseliny; Plasticware může vyluhovat změkčovače.

• Čisticí prostředky: Trace Organics in Opláchnutí rozpouštědel zůstávají adsorbovány.

• Environmentální částice: Laboratorní vzduchový prach a VOC se adsorbují na otevřené vzorky.
  

  

Řešení

1. Přísné čištění SOP: Kyselina namočte → ultrazvukové čistotě vody → dusík suché pro sklo; Vyhrazený detergent pro plasty.

2. Předběžná filtrace: Odstřeďová při 3000 ot / min pro 10 minut nebo použijte 5 uM prefiltru před konečnou filtrací 0,22 um.

3. Kontrolované prostředí: Proveďte přípravu v kapotě laminárního toku a minimalizujte kontaminaci ve vzduchu.
   
   

2. Filtr ucpávání z nekompatibilních filtrů

Problém

• Autosamplerovy tlakové alarmy a časté výměny jehly.

• Snížený průtok, nekonzistentní oblasti píku.

• Zvýšené zablokování tlaku a vstupního sloupce.
  

  

Příčina

• Neshoda membrány: Nylon bobtná v organických rozpouštědlech; PVDF se plíží při zvýšené teplotě.

• Nesprávná velikost pórů: Filtry 0,22 µm zachycují jemné částice, ale snižují tok; Filtry 0,45 µm se mohou stále ucpat s mikrokrystaly.

Řešení

1. Membránová a rozpouštěcí matice: Použijte hydrofilní PES \ / MCE pro vodnou (pH4–8), hydrofobní PTFE \ / PVDF pro organické fáze; Vyvarujte se acetátu celulózy u silných kyselin.

2. Vyberte správnou velikost pórů: Použijte 0,45 µm pro rutinní HPLC, 0,22 µm pro uHPLC nebo stopové práce; Předfilterové vzorky s vysokou viscozitou přes 5 um.

3. Monitor Ap: Sledování tlaku; Vyměňte filtr, když se zvětšuje back -stressure> 15%.
   
   

   

3. chemická nekompatibilita rozpouštědla - membrána

Problém

• Filtrovaný vzorek se jeví jako zataženo nebo nese částice.

• Nový základní hluk nebo duchové vrcholy po filtraci.

• Snížené zotavení analytu.
  

  

Příčina

• Otok rozpouštědla: THF bobtná PTFE, mění velikost pórů a tok.

• Vyluhovatelné membrány: Nylon v kyselině mravenčí uvolňuje oligomery, které absorbují při 214 nm.

Řešení

1. Test kompatibility: Namočte filtr v zamýšleném rozpouštědle po dobu 24 hodin při 25 ° C; zkontrolujte změnu otoku nebo hmotnosti.

2. Pilotní test LC -MS: Porovnejte celkové iontové chromatogramy filtrovaného vs. nefiltrovaného vzorku.

3. Použijte filtry s nízkým nálevem: Ultrazvukově zbarvené PTFE nebo PES bez lepidel.
   
   

Systém kvality: Obrana - monitoring - korekce

Obrana

Standardizujte SOP pro čištění, filtraci a výběr membrány, aby se zabránilo chybám.

Monitorování

Zaznamenejte průtok, back -stlačení a základní základní linie pro detekci driftu.

Oprava

Udržujte analýzu stromu poruch pro rychlou identifikaci a nápravné opatření.

"Analytická přesnost začíná zachycením nejmenší částice."