Ĉio, kion vi bezonas scii pri HPLC -ekzempla preparo

Specimenpreparo estas kritika paŝo en HPLC -analizo pro kelkaj kialoj.

Minimumigi interferojn:Specimenoj ofte enhavas malpuraĵojn kaj matricajn komponentojn, kiuj povas intermiksi la detekton de celaj analitoj. Efikaj specimenaj preparaj teknikoj povas helpi forigi ĉi tiujn nedeziratajn substancojn kaj plibonigi analizan precizecon.

Plibonigi analizan resaniĝon:Ĝusta preparado plibonigas analizan reakiron kaj certigas, ke rezultoj reflektas la efektivan koncentriĝon de la originala specimeno. Ĉi tio gravas precipe por spuro -analizo, kie analizoj ĉeestas ĉe malaltaj koncentriĝoj.

Plibonigita pinta formo:Ĝuste preparitaj specimenoj helpas formi simetriajn kaj bone difinitajn pintojn en la kromatogramo. Ĉi tio estas esenca por preciza kvantigo. Malĝusta specimenpreparo povas rezultigi pintan voston kaj larĝigon, kio komplikas datuman interpreton.

Protektu vian HPLC -sistemon:Kontaminantoj en via specimeno povas damaĝi kolumnojn kaj aliajn komponentojn en via HPLC -sistemo, kaŭzante pliigitajn prizorgajn kostojn kaj malfunkcion. Ĝusta specimenpreparo reduktas la riskon de ŝtopado kaj eluziĝo de la sistemo.

La unua paŝo en specimenpreparo estas kolekti vian specimenon ĝuste. Ĉi tio inkluzivas:

Uzu purajn ujojn:Ĉiam uzu purajn, inertajn ujojn por eviti poluadon. Vitraj aŭ altkvalitaj plastaj ujoj estas rekomendindaj.

Evitu poluadon:Uzu gantojn kaj purajn ilojn por malebligi poluadon de sebo kaj aliaj fontoj.

Taŭga etikedado:Klare etiketu specimenojn por eviti miksaĵojn kaj certigi trakteblecon.

Specimeno -homogenigo certigas homogenecon, kio gravas por reprodukteblaj rezultoj. Homogenigaj teknikoj inkluzivas:

Mekanika homogenigo: miksi solidajn aŭ duon-solidajn specimenojn uzante agitilon aŭ homogenigilon.

Ultrasona homogenigo:Apliko de ultrasono por disvastigi erojn ene de likva specimeno.

Depende de la atendata koncentriĝo de analitoj, specimenoj eble bezonos esti diluitaj aŭ koncentritaj. Ĉi tio atingeblas per:

Diluo:Diluu la specimenon al la dezirata koncentriĝo per la sama solvilo kiel la movebla fazo.

Koncentriĝo:Analizoj povas esti koncentritaj uzante teknikojn kiel vaporiĝo aŭ solida fazo -eltiro (SPE).

Filtrado estas esenca por forigi partiklajn materiojn, kiuj povas ŝtopi HPLC -kolumnojn. Oftaj filtrilaj metodoj inkluzivas ：

Membrana filtrado:Uzu0,2µm aŭ 0,45µm -filtrilojforigi erojn. Tipe polietersulfone (PES) aŭ nilonaj filtriloj estas uzataj.

Prefiltrado:Por specimenoj kun alta partikla enhavo, prefiltrado tra pli granda poro -grandeco -filtrilo povas malebligi ŝtopadon.


50 Oftaj Demandoj Pri Seringaj Filtriloj, Certigu kontroli ĉi tiun informan artikolon: La temo de "Seringa Filtrilo" 50 Oftaj Demandoj

Pripensu stabiligi vian specimenon por malebligi degeneron de la analito.

PH -alĝustigo:Alĝustigi la pH povas helpi stabiligi certajn analizojn. Ekzemple, acidaj komponaĵoj povas postuli acidigon por malebligi degeneron.

Aldonaĵoj:Aldoni stabiligilojn aŭ konservilojn povas helpi konservi specimenan integrecon dum stokado kaj analizo.

Gravas elekti la ĝustan solvon por solvi vian specimenon kaj certigi kongruon kun via HPLC -sistemo. Konsideru la jenon:

Solva Polareco:Por atingi kompletan dissolvon, la solvilo devas kongrui kun la polaridad de la analito.

Mobile -fazo -kongruo: Uzu solvon kongruan kun la movebla fazo por minimumigi eblajn interferojn.

7. Preparado de Normoj

Preparo de kalibraj normoj estas esenca por kvantigi analiton en specimeno. Ĉi tio inkluzivas:

Preparo de Kalibra Kurbo:Preparu serion de konataj koncentriĝoj de la analito por establi kalibran kurbon por kvantigo.

Uzu la saman solvon:Por konservi konsekvencon, ĉiam preparu viajn normojn per la sama solvilo kaj kondiĉoj kiel viaj specimenoj.

Sekvu normajn operaciajn procedojn (SOPoj):Establi kaj aliĝi al SOP -oj por specimenpreparo por certigi konsekvencon kaj reprodukteblecon.

Uzu altkvalitajn reaktivojn kaj solvilojn:Ĉiam uzu HPLC-gradajn solvilojn kaj alt-purecajn reaktivojn por minimumigi poluadon.

Konservu vian laborspacon pura:Konservu vian specimenan preparan areon pura kaj organizita por redukti la riskon de poluado.

Dokumentu ĉion:Konservu detalajn registrojn de viaj ekzemplaj preparaj proceduroj, inkluzive de iuj devioj de normaj protokoloj.

Validigi metodojn:Validu regule preparajn metodojn por certigi, ke ili donas fidindajn kaj reprodukteblajn rezultojn.

Kompatinda pinta formo:Se pintoj estas larĝaj aŭ velantaj, tio povas indiki nekompletan dissolvon aŭ la ĉeeston de partikloj. Certigu, ke via specimeno estas ĝisfunde miksita kaj filtrita.

Fantomaj pintoj:Fantomaj pintoj povas esti kaŭzitaj de malpuraĵoj en la solvilo aŭ specimeno, uzi alt-purecajn solvilojn kaj certigi, ke ĉiuj vitraĵoj kaj ekipaĵoj estas puraj.

Malalta sentemo:Se sentiveco estas malalta, konsideru optimumigi vian eltiran metodon aŭ pliigi la koncentriĝon de via analito.

Kolumna ŝtopado:Ofta ŝtopado povas indiki, ke via specimeno enhavas tro multajn partiklojn aŭ ne estas filtrita adekvate. Re-taksi vian filtran procezon kaj pripensu antaŭfiltriĝon.

Malkonsekvencaj Rezultoj:Variado en rezultoj povas estiĝi de malkonsekvenca specimenpreparo. Normigi ĉiujn procedojn kaj certigi, ke dungitaro implikita en specimenpreparo estu ĝuste trejnita.

Ĉar analizaj postuloj pliiĝas, laboratorioj adoptas pli altnivelajn specimenajn preparajn teknikojn por plibonigi efikecon kaj precizecon:

SPE estas vaste uzata tekniko, kiu ebligas la selekteman eltiradon de analitoj el kompleksaj matricoj. Ĝi implikas pasi likvan specimenon tra solida adsorbanta materialo, kiu konservas la celan analiton dum permesado de malpuraĵoj trapasi.

LLE estas tekniko, kiu disigas analizojn bazitajn sur ilia solvebleco en du nemalhaveblaj likvaĵoj. Ĉi tiu metodo efikas por disigi komponaĵojn kun malsamaj polusoj kaj ofte estas uzata en media kaj farmacia analizo.

Quchers estas populara metodo por prepari manĝaĵojn kaj mediajn specimenojn, kiuj kombinas la eltiradon kaj purigadon de paŝoj en unu procezon, farante ĝin efika kaj kostefika.

Trafiko kaj reproduktebleco povas esti plibonigitaj signife per aŭtomataj specimenaj preparaj sistemoj, kiuj povas plenumi taskojn kiel diluo, filtrado kaj SPE kun minimuma homa interveno, tiel reduktante la riskon de eraroj.


Volas scii pli pri preparado de specimenoj de HPLC, bonvolu kontroli ĉi tiun artikolon: HPLC -specimenaj preparaj solvoj por plej bonaj rezultoj

HPLC -specimenpreparo estas kritika paŝo, kiu povas signife efiki la precizecon kaj fidindecon de analizaj rezultoj. Sekvante plej bonajn praktikojn, uzante taŭgajn teknikojn kaj traktante komunajn problemojn, laboratorioj povas optimumigi la ekzemplan preparan procezon adoptante progresintajn teknikojn kaj teknologiojn dum analizaj bezonoj evoluas. Aŭtomatigo plue plibonigos la efikecon kaj efikecon de HPLC -analizoj. Ĝusta specimenpreparo ne nur plibonigas la kvaliton de rezultoj, sed ankaŭ protektas la HPLC-sistemon, certigante longtempan fidindecon kaj rendimenton.