1. Neniu blokado de via HPLC -kolumno
2. La pli alta sentiveco de via HPLC -kolumno
3. Pli alta precizeco
4. Malpli da falsaj pozitivaj pintoj
5. Malpli da fona bruo
6. Ne legebla
Kvar paŝoj por HPLC -specimenpreparo
Ni konvinku vin, kiel vi povas ŝpari tempon per niaj solvoj kaj samtempe pliigi la reprodukteblecon de viaj rezultoj:
Paŝo 1. Analizo de akvaj solvoj
Malriĉa akvokvalito estas unu el la plej grandaj kontribuantaj faktoroj al problemoj dum HPLC -kuroj. Akvaj malpuraĵoj en la movebla fazo povas interagi kun la kolumno kaj rezultigi malbonan rezolucion kaj sentivecon aŭ neatenditajn pintojn en la kromatogramo, kutime nomataj fantomaj pintoj. Uzi Ultrapure -akvon substance reduktas la riskon de poluado kun organikaj karbonoj, mikroorganismoj, endotoksinoj, RNAoj kaj DNAoj. Ultrapure-akvo estas aĉetebla, tamen uzi akvan purigan sistemon en via laboratorio estas la plej facila maniero por certigi altkvalitan ultrapuran akvon. Akvo de Reagento-Grado de Tipo 1, kiu plenumas ASTM, NCCLS, ISO, kaj USP-normojn, estas la plej bona elekto por HPLC-aplikoj.
Paŝo 2. Preparado de Normoj
Prepari normojn por kunmeta identigo kaj kvantigo povas esti teda kaj multekosta procezo. Precize pezi solidon tiel ke antaŭdifinita volumo de solvilo povas esti uzata malfacilas, kaj malŝparo pro eraro povas esti multekosta - precipe kiam oni laboras kun farmaciaĵoj. Aliaj faktoroj kiel temperaturo plue komplikas norman preparadon. Temperaturaj fluktuoj ŝanĝas la solventan densecon kaj kontribuas al dramaj diferencoj en koncentriĝo.

Uzante ekvilibron, kiu ebligas pezan precizecon ĝis pluraj dekumaj lokoj kaj aŭtomatigante la procezon ligante la ekvilibron al solva dispensilo garantias la plej altan precizecon. Uzi programojn kiel la Dosing Q-App de YAPP16 ebligas aŭtomatajn kalkulojn kaj gravimetrian monitoradon de mezuritaj valoroj. Dokumentado de la temperaturo kaj denseco de la solvilo ankaŭ certigas tre precizajn koncentriĝojn, precipe dum preparado de normoj en postaj tagoj. Rekta datumtransportado de la pez -aplikaĵo YAPP16 al la Thromato -Datuma Sistemo (CDS) de Thermo Scientific ™ Chromeleon ™ 7.2 estas opcio por papera datumado kun plena datuma integreco.
Paŝo 3. Reiru al Bazoj kun Bona Pipetado
La graveco de preciza kaj preciza pipado estas tro ofte preteratentita kaj donita al koncedita. La uzanto -lerteco kaj sperto povas havi signifajn implicojn por sentemaj analizoj kiel HPLC. Elekti la ĝustan pipeton povas redukti homan eraron kaj la asociitajn kostojn de malŝparitaj solviloj.

Mekanikaj pipetoj kun volumena seruro ofertas simplan solvon por malhelpi akcidentajn volumajn ŝanĝojn, dum pli sofistikaj elektronikaj pipetoj forigas uzantan variecon por konstante liveri precizajn volumojn. La pipeta beko ankaŭ estas grava detalo por konsideri por HPLC -analizoj. Konsiletoj pri malaltaj retenoj estas plej bonaj kiam oni laboras kun solviloj de malsamaj viskozecoj, ĉar ili maksimumigas specimenan resaniĝon. Specimena poluado ankaŭ povas okazi rezulte de lekado de la pipeta pinto. Kiel tia, konsiloj kun alta kemia rezisto konservas specimenan integrecon.
Paŝo 4. Filtrilo por precizeco kaj longeco
Atenti plian prizorgadon por filtri specimenojn antaŭ analizo plibonigas fidindecon kaj povas plilongigi la vivon de la HPLC -kolumno malhelpante ŝtopajn efikojn. Seringaj filtriloj estas simpla, rapida solvo por filtri specimenojn antaŭ kolumna kromatografio. Kiel ĉe pipetaj konsiletoj, la solviloj uzataj en HPLC bezonas specifajn filtrilojn por malebligi lekadon kaj specimenan poluadon.

Celulosaj membranoj estas imunaj al dimetil -sulfoksido (DMSO), amidoj, ketonoj, ester, kaj eteraj komponaĵoj. Por precipe severaj solviloj, nekovritaj polieteroj (PTFO) membranoj malhelpas lekadon kaj specimenan poluadon. Specimena filtrado fariĝas tre tempo, kiam la specimeno pliiĝas. Mult-specimenaj filtradaj unuoj, kiel la filtra sistemo Claristep®, povas prilabori specimenojn sen seringoj kaj rapid-traka specimenpreparo sen oferi kvaliton.
Kvin problemojn, kiujn vi bezonas por atenti!
1. Kio estas la plej grandaj specimenaj preparaj problemoj alfrontantaj laboratoriojn?
Laboratorioj estas sub kreskanta premo koncerne tempon kaj koston, ofte traktante ne nur altajn nombrojn de specimenoj sed ankaŭ specimenojn de diversaj naturoj. Specimenpreparo estas areo kie subtilaj diferencoj inter specimenaj tipoj aŭ la specimenaj preparaj metodoj kaj materialoj uzataj povas efiki la rezultojn akiritajn. Certigi kongruon inter la materialoj en la filtra aparato kaj la solvilo povas minimumigi problemojn; Ekzemple, la niveloj de ĉerpaj komponaĵoj, kiuj povus interferi kun analiza detekto.

2. Kio okazas kiam ekzempla preparo iras malbone?
Antaŭ analizaj alt-efikaj likvaj kromatografiaj (HPLC) aplikoj, specimenoj estas preparitaj per diversaj metodoj, kiuj ĉiuj havas la eblon influi analizajn rezultojn influante la specimenon injektitan en la sistemo. Senutila specimenpreparo povas konduki al redukto de kolumna vivo, pliigitaj servaj postuloj por komponentoj, ebla malfunkcia tempo de instrumentado, redukto de kromatografia apartiga efikeco kaj reproduktebleco, kaj multaj aliaj problemoj.
3. Al unua vido, filtrado ŝajnas kiel simpla procezo ...
Kvankam filtrado estas ŝajne malgranda parto de granda fluo de laboro, la efiko elekti la ĝustan filtrilon por donita apliko povas esti grava. Ekzemple, metodoj, kiuj ne forigas sufiĉan partiklan materion, povas rezultigi blokadon de kolumno. Netaŭga elekto de specimenaj preparaj aparatoj povus, en iuj cirkonstancoj, liberigi ĉerpajn komponaĵojn en la specimenon, ligi analizojn de intereso aŭ enkonduki erarojn per specimena perdo - ĉiuj influantaj la kvaliton kaj reprodukteblecon de la rezultoj observitaj. Se vi fidas, ke viaj konsumeblaj filtradoj ne kontribuas al eraroj, kiuj postulas reeldonadon aŭ radik-kaŭzajn enketojn, vi ŝparos monon kaj donos al vi trankvilon.

4. Kio estas la plej oftaj specimenoj preparo 'malsukcesas'?
Malĝusta filtrila membrana elekto estas unu problemo, kiun ni vidas multe. Temoj povas aperi kiel eksteraj pintoj el eltiraĵoj, kiuj povas intermiksi la detekton de la analizaj interesoj. La nekongruo de filtrilaj rimedoj kun specimeno aŭ solvilo koncerne kemian reziston ne nur limiĝas al dissolvaj efikoj sur la filtrilaj rimedoj. Solviloj povas kaŭzi etan ŝvelaĵon de polimeraj membranaj materialoj kiam ne plene kongrua, kiu siavice povas influi la filtran rendimenton, kaŭzante neefikan purigadon de specimenoj. Unu maniero trakti ĉi tiun aferon estas elektante membranon larĝe kongruan kun ambaŭ akvaj kaj organikaj solviloj. Por tipa HPLC -specimenpreparo, siringaj kaj seringecaj filtriloj enhavantaj regeneritajn celulozajn membranojn estas bona eblo pro sia larĝa solvilo.
La uzo de filtrila aparato pli granda ol bezonata por la volumo preparita estas alia ofta falo. La uzo de tro grandaj filtrilaj aparatoj signifas, ke malgrandaj kvantoj de la specimeno restos en la filtrilo, eĉ post kiam oni prenos antaŭzorgojn por forpeli kiel eble plej multe.

5. Kiuj estas la avantaĝoj serioze preni la filtran paŝon?
Fundamenta celo de plej multaj laboratorioj okupiĝantaj pri analiza testado estas disvolvi konsekvencajn procezojn, kiuj subtenas konsekvencajn rezultojn - kaj kiuj postulas konsekvencan filtradon. La elekto de filtra aparato kun la dekstra poro -grandeco kaj retenaj trajtoj helpas certigi efikan partiklan forigon, dum la elekto de taŭga grandeco kaj dezajno de filtrila unuo povas helpi minimumigi specimenan perdon. Bona filtrado ankaŭ helpas protekti la kolumnon kaj eble plilongigas la vivdaŭron de kaj la injektilo kaj la kolumno.
Konkludo
HPLC estas valora tekniko por vivscienco kaj biofarmacia esplorado, ĉar ĝi liveras precizajn, reprodukteblajn rezultojn. Ĉi tiu precizeco dependas de la integreco de la HPLC-specimeno, kaj la plej bona maniero certigi altkvalitajn specimenojn estas komenci per la plej bonaj iloj. Kun solvoj por ultrapura akvo, norma preparado, pipetoj, konsiletoj kaj filtriloj, la HPLC -ekzempla preparo -linio respondecas pri ĉiu detalo. Aŭtomataj solvoj kaj programoj ankaŭ helpas raciigi specimenan preparadon por liveri purajn specimenojn por puraj rezultoj.
Pli da diskutoj pri HPLC -ekzemplaj preparaj solvoj estas bonvenaj!